基因测序原理
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基因测序原理
基因测序是指将基因组的基因序列进行确定的技术,主要是利用现代
分子生物学手段对特定基因组或特定片段提取出基因序列,然后通过特定
的技术手段,根据细胞中DNA的序列进行连续的排序,从而得到基因的具
体序列。
主要有以下几种技术:
1. Sanger法:将DNA 克隆到含有DNA 复制酶的质粒中,采用特定
浓度的dNTP,以聚合酶作用将DNA序列拼接,使基因片段复制成放射性
探针,通过超滤法及电泳等方法即可得到完整的基因序列。
2. 直接测序法:利用PCR反应将目标基因序列扩增,然后利用测序
系统包括测序仪及测序芯片,通过高通量测序技术,进行基因序列的解析。
3. 单细胞测序法:利用纳米流技术将单个细胞的DNA进行扩增,然
后利用特定的芯片进行分离及测序,最后进行转录组分析及蛋白质表达分析,从而获得细胞的基因序列。