革兰氏阳性产芽孢杆菌PPT
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第二十二章 革兰氏阳性产芽孢杆菌
第一节 芽孢杆菌属（Bacillus） 第二节 梭菌属（Clostridium）
第一节 芽胞杆菌属（Bacillus）
芽胞杆菌属是一群需氧、能形成芽孢的革兰氏阳 性大杆菌。本属中主要的致病菌为炭疽芽胞杆菌， 是引起动物和人炭疽的病原菌；蜡状芽胞杆菌的 某些菌株可产生肠毒素，引致食物中毒；其他大 多为腐生菌，主要存在于土壤、水和灰尘中，如 枯草芽孢杆菌。
甘油+ 伯胶糖－ 木－ 甘露醇－淀粉+ 硝酸盐还原+ 吲哚－ H2S－ H2O2+
三、抵抗力
本菌繁殖体的抵抗力不强 ，同一般无芽孢杆菌。 常用消毒剂均能于短时间内将其杀死。芽孢抵抗 力较强，在干燥背光处可存活40年以上。煮沸1h 或干热140 ℃3h可杀灭芽孢，对碘敏感。
五、抗原结构
（一）结构抗原
七、微生物学诊断
1.细菌学检查
（１）镜检：大杆菌，两端平截，竹节状 （２）分离培养：用普通琼脂或血琼脂 （３）纯培养:镜检、串珠试验、生化试验 （４）动物试验：将检验材料制成悬液或纯培养物
给小鼠注射，24-36h,小鼠死于败血症。
2.血清学检查
（１）Ascoli沉淀反应
用加热抽提待检炭疽菌体多糖抗原与已知抗体 进行的沉淀试验。
1.荚膜抗原：多肽，仅见于有毒菌株，与毒力和抗吞噬有关 2.菌体抗原：多糖，与细菌毒力无关。性质稳定，经加热煮沸
甚至高压蒸汽处理，抗原性不被破坏。
在病畜皮毛或腐败脏器中经长时间煮沸仍能与特异性抗体发生反 应形成环状沉淀，称为Ascoli 反应。
3. 芽胞抗原：是芽胞的外膜和皮质组成，具有免疫原性。
（二）保护性抗原（PA）
血平板上，多数菌株有双层溶血环，内环 完全溶血，外环不完全溶血。
三、生化特性
本菌最突出的生化特性是对牛乳培养基的“暴烈发酵”。
接种产气荚膜杆菌
肉 牛高
渣 汤 培 养 基
乳
糖 琼
培脂
养 基
培 养 基
四、致病性
A型：人气性坏疽和食物中毒 B型：羔羊痢疾 C型：绵羊猝狙 D型：牛肠毒血症 E型：犊牛、羔羊肠毒血症
产气荚膜梭菌（Cl. perfringens）
旧名魏氏梭菌，在自然界分布很广。一定 条件下，可引起多种严重疾患，局部组织 出现坏死、水肿、产气。
一、形态及染色特征
菌体直杆状 ，革兰氏染色阳性。一般条件下不形成芽胞，在 无糖培养基上可形成。芽胞大而卵圆，位于菌体中央或近端， 使菌体膨胀。多数菌株可形成荚膜，无鞭毛。
破伤风梭菌（Cl.tetani）
破伤风梭菌是引起人畜破伤 风的病原。具有芽孢，其芽 孢广泛存在于各类土壤中。 本病以骨骼肌发生强直性痉 挛的症状为特征，此菌也称 为强直梭菌。
一、形态
3.液体培养基中呈絮状沉淀生长 4.明胶穿刺培养，呈倒松树状，表面液化呈漏斗状
5.在含青霉素的培养基中，可形成串珠反应，与其它需 氧芽孢杆菌区别。
串珠反应 ：在含青霉素0.5U/ml的培养基中，幼龄炭疽杆菌 因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生质体相互连接成串 。
生化特性 糖发酵：G+ 蔗+ 麦+ 菊+ 蕈糖+ 果糖+
（２）间接血凝试验 （３）协同凝集试验 （４）串珠荧光抗体检查 （５）琼脂扩散试验
八、免疫防治
炭疽痊愈动物可获得坚强的免疫，再次感染者很少 第Ⅱ号炭疽芽胞苗、无毒炭疽芽胞苗预防接种 高免血清进行紧急预防接种 青霉素作为首选药物进行治疗
第二节 梭菌属（Clostridium）
该属细菌多数严格厌氧，革兰氏染色阳性，能形成芽孢， 芽孢直径往往比菌体粗，使菌体膨胀成梭状，但并非梭 菌属的细菌均为梭状，如破伤风梭菌，芽孢位于菌体顶 端，菌体呈鼓槌状。
二、培养特性
1.需氧菌或兼性厌氧，最适生长温度30℃-37℃，营 养要求不高，普通培养基中即能生长良好。
强毒菌株形成灰白色不透 明、大而扁平、表面干燥；
无毒或弱毒菌株形成稍小 而隆起、表面较为光滑湿 润、边缘比较整齐的光滑 型菌落。
强毒株菌落
2. 在血琼脂上一般不溶血，但个别菌株也可轻微溶血。
五、微生物学诊断
1. 直接涂片镜ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ：G+大杆菌，并有荚膜 2. 分离培养：接种血平板，有双层溶血环
3.纯培养：引起牛奶暴烈发酵
4. 动物试验：小鼠、家兔或鸽 5. 肠毒素检查：
取回肠内容物加适量灭菌生理盐水稀释，经离心沉淀后取上清液分 成两份 ，一份不加热，一份加热，分别静脉注射家兔或小鼠。如有 毒素存在，不加热组动物常于数分钟至数小时内死亡，而加热组动 物不死亡。
无芽孢
有芽孢
有荚膜
二、培养特性
本菌对厌氧程度的要求并不严 ，在普通培养基上可生 长，若加葡萄糖、血液，则生长更好。菌落多为圆形、 光滑、隆起、灰白色的圆屋顶样，也可形成圆盘形、边 缘成锯齿状、表面有辐射状条纹的大菌落。
生长非常迅速，快速移植法可帮助此菌的分离。 厌氧肉肝汤中培养，呈均匀浑浊，并产生大量气体。
炭疽芽胞杆菌（B. anthracis）
炭疽芽胞杆菌俗称炭疽 杆菌，是引起人类、各 种家畜和野生动物炭疽 （Anthrax）的病原 。
一、形态及染色特性
革兰氏阳性大杆菌，菌体平直，两端平截。在组织和血液中，单 在或短链，经培养后形成长链，呈竹节状。在组织中或含血液的 培养基中可形成荚膜。芽孢在有氧条件下形成，位于菌体中央， 不膨出菌体。无鞭毛。
炭疽毒素（PA、LF、EF）的组成成分之一，具有免疫原性。
六、致病性
此菌毒力主要与荚膜和毒素有关，荚膜可增强细菌抗吞 噬能力，使之易于扩散；炭疽毒素是造成感染、动物致病 和死亡的主要原因，三种成分单独无毒性，只有EF或LF与 PA结合时，才有致死或水肿效应 。 本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽，草食动物易 感性最强，此菌主要通过消化道传染，也可经呼吸道及皮 肤创伤或通过吸血昆虫传播。
该属细菌能产生多种外毒素和侵袭性酶，致病性强。 产气荚膜梭菌、腐败梭菌、诺维梭菌、肉毒梭菌和破伤
风梭菌等。
该属细菌芽孢直径往往比菌体粗，使菌体膨胀成梭状， 但并非梭菌属的细菌均为梭状，如破伤风梭菌，芽孢位 于菌体顶端，菌体呈鼓槌状。
疾病类型
1.气肿疽与恶性水肿 2.快疫与类快疫 3.痢疾与肠炎 4.食物中毒 5.破伤风
第一节 芽孢杆菌属（Bacillus） 第二节 梭菌属（Clostridium）
第一节 芽胞杆菌属（Bacillus）
芽胞杆菌属是一群需氧、能形成芽孢的革兰氏阳 性大杆菌。本属中主要的致病菌为炭疽芽胞杆菌， 是引起动物和人炭疽的病原菌；蜡状芽胞杆菌的 某些菌株可产生肠毒素，引致食物中毒；其他大 多为腐生菌，主要存在于土壤、水和灰尘中，如 枯草芽孢杆菌。
甘油+ 伯胶糖－ 木－ 甘露醇－淀粉+ 硝酸盐还原+ 吲哚－ H2S－ H2O2+
三、抵抗力
本菌繁殖体的抵抗力不强 ，同一般无芽孢杆菌。 常用消毒剂均能于短时间内将其杀死。芽孢抵抗 力较强，在干燥背光处可存活40年以上。煮沸1h 或干热140 ℃3h可杀灭芽孢，对碘敏感。
五、抗原结构
（一）结构抗原
七、微生物学诊断
1.细菌学检查
（１）镜检：大杆菌，两端平截，竹节状 （２）分离培养：用普通琼脂或血琼脂 （３）纯培养:镜检、串珠试验、生化试验 （４）动物试验：将检验材料制成悬液或纯培养物
给小鼠注射，24-36h,小鼠死于败血症。
2.血清学检查
（１）Ascoli沉淀反应
用加热抽提待检炭疽菌体多糖抗原与已知抗体 进行的沉淀试验。
1.荚膜抗原：多肽，仅见于有毒菌株，与毒力和抗吞噬有关 2.菌体抗原：多糖，与细菌毒力无关。性质稳定，经加热煮沸
甚至高压蒸汽处理，抗原性不被破坏。
在病畜皮毛或腐败脏器中经长时间煮沸仍能与特异性抗体发生反 应形成环状沉淀，称为Ascoli 反应。
3. 芽胞抗原：是芽胞的外膜和皮质组成，具有免疫原性。
（二）保护性抗原（PA）
血平板上，多数菌株有双层溶血环，内环 完全溶血，外环不完全溶血。
三、生化特性
本菌最突出的生化特性是对牛乳培养基的“暴烈发酵”。
接种产气荚膜杆菌
肉 牛高
渣 汤 培 养 基
乳
糖 琼
培脂
养 基
培 养 基
四、致病性
A型：人气性坏疽和食物中毒 B型：羔羊痢疾 C型：绵羊猝狙 D型：牛肠毒血症 E型：犊牛、羔羊肠毒血症
产气荚膜梭菌（Cl. perfringens）
旧名魏氏梭菌，在自然界分布很广。一定 条件下，可引起多种严重疾患，局部组织 出现坏死、水肿、产气。
一、形态及染色特征
菌体直杆状 ，革兰氏染色阳性。一般条件下不形成芽胞，在 无糖培养基上可形成。芽胞大而卵圆，位于菌体中央或近端， 使菌体膨胀。多数菌株可形成荚膜，无鞭毛。
破伤风梭菌（Cl.tetani）
破伤风梭菌是引起人畜破伤 风的病原。具有芽孢，其芽 孢广泛存在于各类土壤中。 本病以骨骼肌发生强直性痉 挛的症状为特征，此菌也称 为强直梭菌。
一、形态
3.液体培养基中呈絮状沉淀生长 4.明胶穿刺培养，呈倒松树状，表面液化呈漏斗状
5.在含青霉素的培养基中，可形成串珠反应，与其它需 氧芽孢杆菌区别。
串珠反应 ：在含青霉素0.5U/ml的培养基中，幼龄炭疽杆菌 因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生质体相互连接成串 。
生化特性 糖发酵：G+ 蔗+ 麦+ 菊+ 蕈糖+ 果糖+
（２）间接血凝试验 （３）协同凝集试验 （４）串珠荧光抗体检查 （５）琼脂扩散试验
八、免疫防治
炭疽痊愈动物可获得坚强的免疫，再次感染者很少 第Ⅱ号炭疽芽胞苗、无毒炭疽芽胞苗预防接种 高免血清进行紧急预防接种 青霉素作为首选药物进行治疗
第二节 梭菌属（Clostridium）
该属细菌多数严格厌氧，革兰氏染色阳性，能形成芽孢， 芽孢直径往往比菌体粗，使菌体膨胀成梭状，但并非梭 菌属的细菌均为梭状，如破伤风梭菌，芽孢位于菌体顶 端，菌体呈鼓槌状。
二、培养特性
1.需氧菌或兼性厌氧，最适生长温度30℃-37℃，营 养要求不高，普通培养基中即能生长良好。
强毒菌株形成灰白色不透 明、大而扁平、表面干燥；
无毒或弱毒菌株形成稍小 而隆起、表面较为光滑湿 润、边缘比较整齐的光滑 型菌落。
强毒株菌落
2. 在血琼脂上一般不溶血，但个别菌株也可轻微溶血。
五、微生物学诊断
1. 直接涂片镜ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ：G+大杆菌，并有荚膜 2. 分离培养：接种血平板，有双层溶血环
3.纯培养：引起牛奶暴烈发酵
4. 动物试验：小鼠、家兔或鸽 5. 肠毒素检查：
取回肠内容物加适量灭菌生理盐水稀释，经离心沉淀后取上清液分 成两份 ，一份不加热，一份加热，分别静脉注射家兔或小鼠。如有 毒素存在，不加热组动物常于数分钟至数小时内死亡，而加热组动 物不死亡。
无芽孢
有芽孢
有荚膜
二、培养特性
本菌对厌氧程度的要求并不严 ，在普通培养基上可生 长，若加葡萄糖、血液，则生长更好。菌落多为圆形、 光滑、隆起、灰白色的圆屋顶样，也可形成圆盘形、边 缘成锯齿状、表面有辐射状条纹的大菌落。
生长非常迅速，快速移植法可帮助此菌的分离。 厌氧肉肝汤中培养，呈均匀浑浊，并产生大量气体。
炭疽芽胞杆菌（B. anthracis）
炭疽芽胞杆菌俗称炭疽 杆菌，是引起人类、各 种家畜和野生动物炭疽 （Anthrax）的病原 。
一、形态及染色特性
革兰氏阳性大杆菌，菌体平直，两端平截。在组织和血液中，单 在或短链，经培养后形成长链，呈竹节状。在组织中或含血液的 培养基中可形成荚膜。芽孢在有氧条件下形成，位于菌体中央， 不膨出菌体。无鞭毛。
炭疽毒素（PA、LF、EF）的组成成分之一，具有免疫原性。
六、致病性
此菌毒力主要与荚膜和毒素有关，荚膜可增强细菌抗吞 噬能力，使之易于扩散；炭疽毒素是造成感染、动物致病 和死亡的主要原因，三种成分单独无毒性，只有EF或LF与 PA结合时，才有致死或水肿效应 。 本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽，草食动物易 感性最强，此菌主要通过消化道传染，也可经呼吸道及皮 肤创伤或通过吸血昆虫传播。
该属细菌能产生多种外毒素和侵袭性酶，致病性强。 产气荚膜梭菌、腐败梭菌、诺维梭菌、肉毒梭菌和破伤
风梭菌等。
该属细菌芽孢直径往往比菌体粗，使菌体膨胀成梭状， 但并非梭菌属的细菌均为梭状，如破伤风梭菌，芽孢位 于菌体顶端，菌体呈鼓槌状。
疾病类型
1.气肿疽与恶性水肿 2.快疫与类快疫 3.痢疾与肠炎 4.食物中毒 5.破伤风