从XY雌鱼雌核发育产生YY超雄黄颡鱼

鱼 。采 用这 种技 术 的 育 种 周期 较 长 ， 且 逐代 测 交 而 的试验 鱼必 须严 格管 理 ， 防止 混 杂 ， 能最 后取 得 成 才 功 。可见 ， 于世代 时 间较 长的 鱼类 而言 ， 对 就未 必是
首 选 的方法 。
Ｅ ２ 解后 ， 别 与 ｌｇ的 成 年 甲 鱼 饲 料 混 合 均 匀 ， Ｅ溶 分 ｋ
尾， 只有 １ 尾 雄 鱼 ， 大 多数 是 雌 鱼 ； 在 ｌ Ｙ １ 绝 而 ２尾 Ｙ超 雄 鱼 测 交 的后 代 出 现 ０ ２ ． ％雌 鱼 。 从 上 述 结 果 可 以推 测 ， — ４１ 黄 颡 鱼 的性 决 定 体 制 是 雌 性 配 子 同 型 （ ｘｇ／ Ｙ含）但 常 染 色 体 性 修 饰 基 因 的影 响 是 比较 明 显 的 。 本 文 还 对 超 雄 ｘ Ｘ ， 鱼 在 商 业 上 大 量 生 产 全 雄 黄颡 鱼 的 可 行 性 和 应 用 前 景 进 行 简 要 的讨 论 。
１５ Ｙ 超 雄 黄 颡 鱼 的 产 生 ． Ｙ
然后过 滤 取 出 卤 虫 作 为 活 饲 料 投 喂 。 每 天 投 喂 三
次， 、 午 、 上 下 晚上各 一次 ， 喂量 以半 小 时 内吃完 为 投
准 ， 续 处 理 ４ｄ 连 ０ 。对 照 组 只投 喂未 经 激 素 溶 液浸
泡 的卤虫 。
雄性 配子 异 型的 鱼类 ， 法 可靠 、 定 ， 且 对 环 境 方 稳 而 友好 ， 不 良的影 响 。它 是 通 过 五代 半 的激 素 性 逆 无
激素溶 液 与 饲 料 的 配 制 将 ２ ０ ｇ的 １． ０ｍ ７ａ乙
炔 基 雌二 醇 （ Ｅ ，ｉ ａ 溶 于 ２０ Ｌ９ ％ 酒 精 中 作 Ｅ ２ｓｍ ） ｇ ０ ｍ ５
于 室温下 放 置 １— ２ｈ 待酒 精 完 全 挥 发 后 ， 入 冰 ２ ４， 放 柜 冷 冻保存 。 激 素性 逆转 试验 取孵化 后第 ９天 的混 性黄 颡 鱼 鱼 苗 １０ ４ ０尾 分成 ７ ， 组 ２ ０尾鱼 苗 ， 中 ６组 组 每 ０ 其
为实验 组 ， 组 为 对 照 组 。实 验 组 用 卤虫 作 为激 素 １
每 间隔 １ ｉ 立 １个 处 理 组 ， １ ｍｎ设 共 ０组 。 另 设 正 常
２ 结 果
２ １ 激 素 性逆 转实 验 ．
授精 对 照组 与单倍 体 对 照组 。采 用冷休 克处 理方 法
阻断减 数 分 裂 第 二 极 体 的 排 出 ， 复 雌 核 二倍 体 。 恢 将 各组 授精 卵依 次 放 入 ４Ｃ冰 水 中 ， 处 理 ２ ｍｎ ￣ 冷 ０ ｉ。
激 素 性逆 转实 验结 果 的检查 由于黄 颡鱼 达 到
雄鱼 与正 常雌 鱼 测 交 ， 后 代 雌雄 鱼性 比推 断 该 候 从 选雄 鱼 的基 因 型是 Ｙ Ｙ或 Ｘ 。 每 条 鱼 测 交 的 后 代 Ｙ 均 分别 在食 品箱 中饲 养 ， 般 ３个 月后 即 可取 出一 一 部 分幼 鱼 ， 腹腔 注射 冰醋 酸 固定 液 ， 可准 确从 形 态 便 上 鉴别 精巢 与 卵巢 。
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５ 期
刘汉勤等 ： Ｘ 从 Ｙ雌 鱼雌 核 发 育 产 生 Ｙ Ｙ超 雄 黄 颡 鱼
７９ １
载体 ， 别 在 每 升 剂 量 各 为 ５／ 、０ ／ 、 ５ ／ 、 分 ０ｔ １０ｔ １０ｔ ． ｇ ． ｇ ． ｇ
２ ０ ｇ ２ ０ｔ ０ ｇ 、５ ／ ． ｇ与 ３ ０ｔ ０／ ． ｇ的 Ｅ ２ 液 中 ， 先 浸 泡 １ ， Ｅ溶 预 ｈ
右 ， 鱼 １０ 左 右 。雄性 长 吻脆 体重 １ｇ以上 。 雄 ５ｇ ｋ １ ２ 人工 催产 ． 按 常规 方法 进行 。 １ ３ 激 素 性逆 转 ．
选 、 性激 素直 接诱 导性 逆转 、 核发 育 、 间杂交 、 雄 雄 种
人工诱 导 三倍体 以及遗传 学 方法 等… 。但 至今 只 有 使用 遗传 学 的方法 生 产 Ｘ Ｙ全雄 鱼 在 尼 罗 罗非 鱼 单 性养 殖广 泛应 用 。这 种 称 为 Ｇ Ｔ 技 术 Ｊ适 用 于 Ｍ￣ ，
两次 ， 、 上 下午 各 一 次 ， 料量 以 １ 饲 ｈ内有 剩 余 为 准 ，
连续 处 理 ４ ｄ 对 照 组 则 投 喂 不 含 激 素 的 甲 鱼 ０。
饲料 。
方法 ， 工诱 导 Ｘ 人 Ｙ雌鱼 雌 核发 育 ， 可 以获得 候 选 便
的 Ｙ 超雄 鱼 。 Ｙ
后 代测 交与 性别 鉴定 取 性 成 熟 的候 选 Ｙ Ｙ超
食 １ ｄ 仍 然不 能 大 量 摄 食 甲鱼饲 料 ， 处 理 期 间 ０后 在 内相 继 死 亡 。 因此 ， 们 采 用 卤 虫 作 为 激 素 载 体 我 （０ ｇ ／ ） 在 开 口摄食 ４ ２０ ｇ Ｌ ， ｄ后 ， 连续 处 理 ４ ｄ 作为 黄 ０，
颡 鱼苗性 逆 转 的常规 方法 ， 一般 成 活率 均在 ６ ％左 ０
的进 步 ， 颡鱼 （ ｅ ｅｂｇｕ ｌｄａｏ Ｒｃａｄｏ ） 黄 Ｐ ｌｏａ ｒｓ ｕ ｉｒｃ ｉ ｒｓｎ 已 ｔ ｆｖ ｈ
的一 种养 殖鱼 类 。我 们 选 用 黄 颡 鱼 作 为 实 验 材 料 ， 研 究 产生 Ｙ Ｙ雄 鱼 的替 代 方法 ， 能 缩 短 育 种周 期 ， 望 减少人 力 、 物力 的损 耗 。本 文 报 道 我 们 采 用 激 素性 逆转结 合 雌 核 发 育 技 术 ， 生 Ｙ 产 Ｙ超 雄 黄 颡 鱼 的 初 步结 果 ， 对 其应 用前 景进 行讨 论 。 并
杂 种 的鉴别 根 据胡 须 和体表 的斑 纹 可 以准 确 地 鉴别黄 颡 鱼雌 核 二倍 体 与长 吻 跪 ×黄 颡 鱼 杂 种 ， 黄颡 鱼胡 须 为黑 色 ， 种 为 白色 。 黄 颡鱼 体 侧 斑 纹 杂
３ —４条 ， 自上 至下水 平 分 布 ， 而杂 种 ３ ４条 自前 至 — 后垂 直分 布 。
１ ６ 统 计 分析 数 据 以 平均 数 ±平 均 数 标 准 差 表 ．
性成 熟 年 龄 时 ， 重 约 ４ —５ ｇ 体 长 １— １ｃ 此 体 ０ ０， ０ ５ｍ， 时通过 肉眼观察 体 形 和泄 殖 孑 特 征 ， 可 以 准 确 的 Ｌ 便 鉴定 雌雄 。计算 各组 的成 活 率 与 雌 性 率 ， 对 结 果 并 进行 评估 。
另取孵 化后 １ｄ的 鱼 苗 ８ ０尾 分 成 ４组 ， 组 ５ ０ 每 ２０尾 ， 中 ３组 为实 验 组 ， 个 为 对 照 组 。实 验组 ０ 其 １
Ｅ２ Ｅ 剂量 为每公 斤 ２ ｍ 、０ｍ 与 １０ｍ ５ ｇ ５ ｇ ０ ｇ。每 天投 喂
性逆 转 的 ｘ ｒ ｙ雌 鱼雌 核 发 育 经 过 Ｅ ， 逆 转 Ｅ性 处理 的黄 颡 鱼 ， 以获得大 批 的雌 鱼 ， 括性 逆转 的 可 包 Ｘ Ｙ雌鱼 和 Ｘ Ｘ雌 鱼 。基 本 上 按 照 ２４雌 核 发 育 的 ．
转和 后 代 测 交 ， 后 获 得 Ｙ 最 Ｙ超 雄 鱼 和 Ｙ 生 理 雌 Ｙ
鱼， 由Ｙ 并 Ｙ超 雄 鱼 和 Ｘ 雌 鱼 交 配 生 产 Ｘ 全 雄 Ｘ Ｙ
为母 液 ， 于 冰箱 中 ４Ｃ 冻保存 备 用 。 置 ￣冷 另外 用 适 量 的 纯 酒 精 将 ２ ｍ 、０ ｇ １０ ｇ的 ５ ｇ ５ ｍ 、０ ｍ
刘汉勤 崔书勤２ 侯 昌春２ 徐 江２ 陈宏溪ｔ
（ ．中国 科 学 院 水 生 生 物 研 究 所 ， 汉 １ 武 ４０ ７ ２ 武 汉康 祥科 技 发展 有 限公 司 ， 汉 ３０２；． 武 ４０ ７ ） ３０ １
摘要 ： 用激素性逆转结合雌核 发育技术 ， Ｘ 雌鱼 产生 Ｙ 采 从 Ｙ Ｙ超 雄 黄 颡 鱼 。 与 性 逆 转 和 后 代 测 交 选 种 技 术 比较 ， 本 文 的 方 法 可 以缩 短 两 代 的育 种 时 间 ， 提 高 超 雄 鱼 的 产 出 。通 过 测 交 证 明 ， 正 常 的 Ｘ 并 与 Ｙ雄 鱼 一 样 ， Ｙ超 雄 黄 颡 Ｙ 鱼 是 能 成 活 和 有 生 育 力 的 ， 后 代 雄 鱼 占 ７ ．％一 ｌｏ ， 均 ９ ． ％ 。从 ２ 其 ５９ ０％ 平 ０３ ０ ９尾 雌 鱼 产 生 的 雌 核 发 育 的 后 代 ２４ ９
生 产 单 性 雄鱼 有 几 种 方法 可供 选 择 ： 人工 挑 如
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 鱼 的 来 源 黄 颡 鱼 与 长 吻 脆 （ ｅ ｃｓ ｓ ． Ｌｉ ａｓ ｏ ｉ ｌ ｇｒｓｉ Ｇ ｎｈｒ购 自武 昌大东 门水 产 品市 场和 汉 ｏ ｉ ｔｓ ｕ ｔｅ） ｎ ｏ ｒ 口华 南特 种 水 产 品市 场 。黄 颡 鱼 雌 鱼 体 重 １０ ０ ｇ左
受精 率 、 化 率 以及 存 活 率 的计 算 基 本 上按 孵 照桂 建芳 等 ＿ 的方 法 。 ５ Ｊ
表 １ 不 同剂 量 的 Ｅ ２ 黄 颡鱼 的成 活率 与雌 性 率 的作 用 Ｅ对
１４ 黄 颡 鱼 的 雌 核 发 育 ．
精 子的 灭活
基本 上按 照 吴清 江等 的方 法 Ｊ ４。
示 。性 比试 验值 与 理论值 的适 合 性用 ｘ 检验 测定 。
雌核 二 倍体 的获得 将 黄 颡鱼 成熟 鱼 卵与长 吻 跪灭 活 的精 子 人 工 授 精 ， 在 授 精 后 １ １ ｍｎ内 ， 并 — ０ｉ
黄颡 鱼 在 良好 的养 殖 条 件下 ， 周 年雌 雄 鱼 均 一 能达 到性 成熟 。在 鲍科 鱼类 中 ， 是 世 代 时 间较 短 它
收 稿 日期 ：０６０．９ 修 订 日期 ：０ ７０－６ ２０．２０ ； ２０ ３１
基金项目： 湖北 省 重点 科 技 攻 关 项 目（０ ２＇ ０ ） 助 ２０ １３ １资 ： ０ 作者简介： 刘汉 勤 （９ ） 男 ； 研 究 员 ； 要从 事 鱼类 遗 传 与 育种 研 究 １６ ， 副 主 通 讯 作者 ： 宏 溪 ，－ ａ ：ｘｈｎ ｈ ．ｃｃ 陈 Ｅｍ ｉ ｈｃｅ ＠ｉｂ ａ．ｎ ｌ
然后取 出置 于 ２ ￣ 温培 养 箱 中孵 化 。每 隔 ３ ６Ｃ恒 ｈ用 相 同温度 的曝 气水换 水 一次 。
从 表 １可 以看 出 ， 以活 卤虫作 为 激 素 载体 的 成 活率 与雌性 率 均 比人 工 配 合 饲 料 的 效 果 好 得 多 ， 原
因是 甲鱼 配合 饲料 的适 口性 差 ， 颡 鱼 苗 在 开 口摄 黄
关 键 词 ： 颡 鱼 ； 逆 转 ； 核 发 育 ； 雄 鱼 黄 性 雌 超
中 图分 类 号 ：９ ２ １ ￥６ ． 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ０３ ０ （ ０ ７ ０ ．７ ８０ １ ．２ ７ ２ ０ ） ５０ １． ８ ０
近 年来 ， 随着 市 场 需 求 的增 长 和人 工 繁 殖 技 术
经成 为淡 水 养 殖 的 重要 对 象 。在 脆 科 （ ａＴ ａ ） Ｂ ｇｉ ｅ 鱼 ｄ 类 中， 鱼 的生 长 速 度 均 比雌 鱼 的快 得 多 。根 据 我 雄 们 的调 查 ， 在相 同养 殖条件 下 ， 雄性 黄 颡鱼 比同胞雌 鱼 的生 长速 度快 ３ ％左 右 。 因此 ， ０ 如能 采 用适 当 的 性 别控 制技 术 ， 在生 产上 养殖 雄性 群体 ， 以提 高 渔 用 产 品 的质 量和产 量 ， 应具 有重 要 的经济 意义 。
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第 ３ 卷 第 ５ ｌ 期
２０ ０ ７年 ９月
水 生 生 物 学 报
ＡＣＴＡ ＨＹＤＲＯＢＩ ＯＧＩ ＯＬ ＣＡ ＳＩ ＣＡ ＮＩ
Ｖｏ ３ｌ， １． Ｎｏ ． ５ Ｓ ｐ．， ２ ０ ０ ｅ ７
从 ＸＹ 雌 鱼 雌 核 发 育 产 生 ＹＹ 超 雄 黄 颡 鱼