鱼类雌核发育的鉴定

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红鲤（红色）♀
普通鲤（青色）♂ 精子经UV照射
红色、全鳞：雌核 F1 青色、全鳞：杂合
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红镜鲤♀ （红色、散鳞）
精 子 经 UV 照 射
镜鲤♂ （青色、散鳞）
红色、散鳞：雌核
F1
青色、散鳞：杂合
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散鳞镜鲤♀ （ss）
精 子 经 UV 照 射
全鳞镜鲤♂ （SS，Ss）
F1
散鳞后代：雌核
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天然雌核发育鱼类的鉴别
• 3.人工授精卵的细胞学观察 • A：人工授精卵切片光镜观察（精核始终保持密致状态） • B：囊胚细胞压片镜检（检测染色体数目）
天然雌核发育鱼类的鉴别
4.视泡期胚胎脑部形态观察 人工雌核发育单倍体胚胎（与失活精子人工授
精）脑部呈S形畸形，而天然雌核发育及人工雌核
发育二倍体胚胎脑部正常。 5.红细胞大小 方正银鲫红细胞及核的长径、短径、面积、体 积均大于二倍体野鲫，即二倍体与三倍体的核体积
3.染色体计数和组型分析（最准确）
雌核发育：囊胚细胞只一套来自雌核的染色体，为单倍体 囊胚期 压片镜检 杂交种：有来自雌核和雄核的染色体各一套，为二倍体
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染色体组型：染色体大小、形态以及着丝点位置
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银大麻哈鱼（2n=60）♀ 美洲红点鲑（2n=48）♂
F1
2n=84：雄核发育 2n=60：雌核发育
Nagy等（1978）
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2. 生化：运铁蛋白位点变异、脂酶
运铁蛋白来说，雌性等位基因不同于雄性，雌 核发育后裔中检测不出来源于雄性的等位基因
1.鲤鱼的运铁蛋白谱带：a-f，红鲤8305E等位基因纯合带，g.其他鲤个体的A等位基因纯合带 2.酯酶同工酶在鲤各组织中的表达L.肝，E眼，H心，B脑，M肌肉，S血清 3.红鲤8305血清脂酶同工酶谱a-d：红鲤8305只有G2纯合带，e-f，红镜鲤G1纯合带 18
单倍体 n
二倍体 2n
三倍体 3n
第三节
安鲫为例）
雌核发育二倍体的鉴定
（一）天然雌核发育鱼类的鉴别（以方正银鲫和普
1.人工繁殖：用正常鲤鱼精子与排出的成熟卵作人工授精，
子代不具一对吻端须
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天然雌核发育鱼类的鉴别
2.辐射精子人工繁殖：遗传失活鲤鱼精子作人工授精，发育 的胚胎不出现辐射雌核发育单倍体综合症，孵出仔鱼正常。 绝大多数的动物单倍体，其胚胎多表现为脑部S形，尾部 短而弯曲，水肿，围心腔扩大及心血管畸形等单倍体综合症。 由于生理上不正前
完成的，
c.第二极体排出的抑制，对接近着丝点的基因来说，
将主要导致纯合后裔，而对远离着丝点的基因来
说，则导致杂合体比例的增加，而对那些与其着
丝点自由分离的基因来说，2/3 后裔应该是杂合的。
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合。
• 3）后代不具父本性状。 • 4）银鲫中，除某些种类外，所有雌核发育后代全为雌性， 表现型似母本，基因型与母本相同或不尽相同，视卵核发 育的途径而定。
人工诱导雌核发育（二倍体）
染色体的倍性
• 各种生物的染色体数目一般是恒定的，它们在体细胞中成 对，在性细胞中成单。通常用n表示性细胞染色体数目。
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1.鲤鱼二倍体中囊胚细胞染色体 （2n=104） 2.鲤鱼雌核发育单倍体囊胚细胞 染色体（1n=52） 3.鲤鱼雌核发育个体人工转性精 巢，示放大细胞 4.鲤鱼雌核发育个体的人工转性 精巢 5.鲤鱼雌性个体经人工转性的性 腺切片，示雌雄同体 6.鲤鱼单倍体畸形鱼苗
吴清江，陈荣德，叶玉珍等.鲤鱼人工雌核发育及其作为建立近交系新途径的研究.遗传学报8(1):5055,1981.
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4.分子标记
遗传标记也能提供到底是由阻止第一有丝分裂还是
由于阻止极体排出而导致雌核发育二倍体的证据。
a.如果二倍体是由第一次有丝分裂的抑制而导致的，由于 它们的两个染色体组来源于一套染色体的复制，因此遗传 组成完全相同，是100%的纯合体。
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b.第一极体排出的抑制，对接近着丝点的基因来 说，应该导致几乎100%的杂合体后裔，但这未必
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（二）人工雌核发育二倍体的鉴定 采用与母性有亲缘关系的另一种鱼类的辐射精
子，此时，任何父性遗传可以通过下列几种方法
识别出来：
a.杂种是不能存活的（产生了单倍体后代） b.杂种在形态上是可以识别的 c.杂种在生化上是可以识别的
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1.形态判别
鲤鱼 体色
青色显性
红色隐性
全鳞显性 鳞片 散鳞隐性
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第三节 雌核发育二倍体的鉴定
作者：宋庆洋
鱼类的进化地位
• 鱼类最早出现在距今4亿年前 的寒武纪 • 是最早出现的脊椎动物 • 是由水生向陆生过渡的种类
（一） 雌核发育（Gynogenesis）
1.定义 雌核发育是指卵子须经精子激发才能产生只具有母系遗 传物质的个体的有性生殖方式。
雌核发育需要同种精子或异种精子刺激，起诱发作用，
和面积各达到了预定的比例1：1.5和1：1.3
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天然雌核发育鱼类的鉴别
6.肝脏及肝细胞的大小
方正银鲫的整个肝脏几乎覆盖整个肠管，重量约重体 重的6-7%，胞质稀疏；鲫的肝脏分布肠管之间，胞质浓， 方正银鲫肝重为鲫的二倍 7.体细胞染色体计数 就方正银鲫和普安鲫等天然雌核发育鲫鱼而言，染色 体数目基本为150+-。而一般进行两性生殖的鲫鱼，且雌、 雄性原核融合者，其染色体数目多在100。 8.侧线鳞数目 鲫侧线鳞片数小于30；银鲫侧线鳞大于30。
但不参与发育 (1)天然雌核发育 (2)人工诱导雌核发育
天然雌核发育
•
天然雌核发育卵子的发生与两性融合生殖的鱼类不同 之处，在于它只进行一次成熟分裂，排出的卵子处于第一 次成熟分裂中期。
天然雌核发育
• 1）卵子具有与母本完全相同的染色体组型 • 2）卵子被近缘两性型种类雄鱼的精子激发后才能发育， 但精子只起激发作用，并未发生雌雄原核的融合或配子配