百草枯中毒血_尿标本分析检测方法的研究进展_陈辉凤
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1 提取方法 百草枯的的提取方法有液-液萃取法、固相萃 取法、渗透-超滤-热凝固法、水浸法及柱切换法等很多种，目 前主要常用的是液-液萃取法和固相萃取法。
1.1 液-液萃取法 液-液萃取是最早用于提取检材中百草 枯的方法。 通常情况下，依据所选用的萃取试剂不同，萃取效 果也不相同。 对于血、血浆和尿液一般选用离子对试剂：十二 烷基硫酸钠 (SDS， 回收率均在 80%以上 ) [1～4] 或辛烷磺酸钠
(SOS，回收率可达 90%以上[5])，但 SDS 比 SOS 更便宜易得。 另 外选用一般试剂： 氯仿+乙醇+硫酸铵+苯酚回收率也能达 76.6%[6]，均能满足实际检测的需求。 但液-液萃取法使用了大 量有毒试剂，对环境和操作人员的身体健康造成威胁，操作 时引入外源性杂质较多，易产生乳化现象，萃取重现性较差， 操作也较费时费力不能及时进行检测，已经被其它提取方法 所取代。
液乙腈
(10：90v) 的 混 合 液 为 洗 涤 液 ，以 二 乙 基 百 草 枯 为 内 标 物 。
7 尿血 Shiurpack CLC-ODS 含庚烷磺酸钠的磷酸 0.001
采用离子对 SPE-高效液相色谱法，DAD 检 测 器 ，波 长 258nm,柱
缓冲液乙腈
温 35℃，流速 1ml/min。 二乙胺调磷酸缓冲液 pH4.0。
采用离子交换固相萃取法提取水溶性正相高效液相色谱法，
5μm 柱
pH 3.3
996PDA 检测器，波长 259nm，柱温 30℃，流速 0.1ml/min。 高氯酸：甲
醇(6：94v) 混 合 液 对 检 材 前 处 理 ，
6 血液 Novapak C18
含 SOS 的 磷 酸 缓 冲 0.1
含 3.0M 含 辛 烷 磺 酸 钠 的 乙 腈 溶 液 ： 二 乙 胺-磷 酸 缓 冲 液(pH3)
无需进化提取，血浆沉淀蛋白处理后高效液相色谱法，用二乙胺
分析 C8 预柱
液乙腈
调 pH 为 3.0， 内 标 物 为 Ethylv Viologen Dibromide，SPD-20A 检 测
器，波长 258nm，柱温 28℃，流速为 1.0ml/min。
4 血液 Symmetrys hield TM 含 25mmol/L SOS 0.005
理后才能进行检测，操作比较复杂。
为还原剂的水溶液中还原法较易推广应用。 由于百草枯极性
2.3 液相色谱法
强，通常情况下较难气化裂解，所以有关气相色谱检测百草
液相色谱法尤其是高效液相色谱法是最常用的百草枯
枯的报道较少。 张婷等[10]将血中百草枯用国产阳离子交换树
检测方法。 检测效果和具体分析方法因选择的色谱柱、流动
萃取柱
回 收 率 (%)
实验方法
Seppak C18 C18
氰基柱 阳离子树脂 Oasis MCX
C18
Oasis MCX
＞87 87.5～98
83 ＞90.3 ＞80 83.8、89.2、83.5
＞90
无需脱蛋白处理，直接过柱萃取，用 CH3OH 洗脱。 上清液过柱萃取，CH3OH、NH4CL 洗脱。 0.1mol/L 的 NH3.H2O 分别过柱。 去蛋白后取上清液，NaOH 中和至弱碱性过柱，8mol/LHCL 洗脱。 50%甲醇水洗杂质，再用 1.0mol/L 氯化铵 50%甲醇液洗脱。 检材用糜蛋白酶酶解，滤液用离子对试剂(十二烷基硫酸钠)固相萃 取，再用酸性甲醇洗脱。 50%甲醇水洗杂质，用含乙腈 40%甲醇 2%的水溶液洗脱。
2.5 质谱联用法 质谱联用是近几年发展起来的一类新型分离检测技术。
目前国内外报道的质谱联用技术主要有气-质联用、液-质联 用、毛细管-质谱联用等。 这些方法检测结果准确可靠、重复 性好，但仪器设备较昂贵，技术含量较高，难以推广应用。
中图分类号 R446.11,R446.12
文献标识码 C
doi:10.3969/j.issn.1674-1129.2009.06.028
文章编号 1674-1129(2009)06-0649-03
百 草 枯 (paraquat，PQ) 又 名 对 草 快 、 杀 草 快 ， 是 目 前 全 世 界 使用最广泛的除草剂之一。 虽然百草枯为中等毒性农药，但 对人畜有很强毒性。 由于目前尚无特效解毒剂，中毒死亡率 较高。 口服吸收率为 5%～15%，其 血 浆 浓 度 与 死 亡 率 密 切 相 关。 对中毒患者血中百草枯浓度检测及监测对临床救治有很 大作用。 另外，由于百草枯吸收后不经代谢，在肾小管中不吸 收，多以原形从肾脏排出，故尿也作为监测中毒患者体内百 草枯浓度变化的常用检材，同时取样难度不大。 本文主要对 近年来国内外对于血液和尿液中百草枯分析方法的研究作 了综述，以便临床检验工作者选择更有效的检测方法。
1mol/L 盐 酸 溶 液 酸 化 ，3500r/min 离 心 15 分 钟 后 ， 取 上 清 液 加 NaOH、NH4CL-NH3(pH=10.3)，用 连 二 亚 硫 酸 钠 显 色 ，波 长 395nm 处比色，回收率达 101.4%+3.82%。 孙世义等[15]用固体 碳酸钠和碳酸氢钠调尿液标本 pH 大于 9 后， 慢速定量滤纸 过滤，滤液加连二亚硫酸钠显色，波长 396nm 处比色，回收率 达 96.5%～103.5%，最低检出限为 0.15ng/ml。 赵燕燕等[16]将血 样 经 20%三 氯 乙 酸 去 蛋 白 处 理 后 采 用 50μl 微 量 比 色 池 ，波 长 257nm 处比色，其回收率为 90.0%～102.4%，最低检出限为 0.01ng。 上述这些方法设备简单，仪器通用，灵敏度高，精密度 和加标回收率均能满足实验要求。 但操作条件要求苛刻，不 易控制，还原产生的蓝色自由基稳定性差，结果的稳定性大
脂固相提取后，在碱性提取条件下用硼氢化钠还原为三级胺
相等的不同而异。 现将国内外研究应用于血、尿标本中百草
供气相色谱 N、P 检测分析 ，以乙基百草Leabharlann Baidu 为 内 标 物 ，进 行 血
枯 分 析 检 测 的 液 相 色 谱 法 归 结 为 表 2 。 [5，11～13，19～21]
表 2 不同色谱柱、不同流动相中不同百草枯液相色谱法
1.3 其它方法 渗透-超滤-热凝固法操作简单， 但提取净 化时间长，提取物难浓缩且不易纯化。 水浸法提取较容易，但
方法
1[7] 2[8] 3[9] 4[10] 5[11] 6[12]
7[13]
检材
淋巴液、血浆 血浆、尿 血浆 血浆 血浆
尿、血、猪肝
血液、尿
表 1 血、尿标本不同萃取柱中百草枯的固相萃取方法
·650·
第 27 卷第 6 期 2009 年 12 月
实验与检验医学 EXPERIMENTAL AND LABORATORY MEDICINE
Vol.27 No.6 Dec. 2009
受 影 响 ，针 对 此 不 足 ，蔡 春 平 等[17]在 《AOCO 测 定 农 药 百 草 枯
标本中百草枯的定性和定量分析。 其回收率为 99.3%+7.6%，
纵观上述方法发现，通常情况下百草枯液相色谱法选用 离子对试剂的流动相、富集特性强的色谱柱，更能获得显著 的分析检测结果，最低检测限可达 1ng/ml。
2.4 毛细管电泳法 对于百草枯毛细管电泳检测方法的研究国外起步较早，
国内却比较滞后。 国外，Vinner E 等[22]用三氯甲烷和硫酸铵将 血清样本去蛋白处理后 (尿液标本直接离心后取上清进样)， 利用熔融石英毛细管载 50mmol/L 的磷酸盐缓冲液(pH 2.5)为 载体进行毛细管电泳分析，紫外波长 200nm 处检测。 其血、尿 中 百 草 枯 回 收 率 分 别 为 52%、71.4%， 线 性 范 围 为 4mg/L，检 测限均达 5pg/ml。 国内，赵燕燕[23]等用推扫富集胶束电动毛细 管色谱法检测了血清中的百草枯。 实验将血清样品用 10%三 氯 乙 酸 去 蛋 白 处 理 后 ， 以 50mmol/L 磷 酸 盐 -80mmol/LSDS (pH=2.5)为缓冲液， 55KPa 压力进样，利用未涂层的溶硅弹性 石 英 毛 细 管 在 电 压 为 22KV 下 进 行 电 泳 分 析 ，DAD 波 长 260nm 处检测。 检测限为 0.002mg/L，RSD 为 2.95%。 同时将 该方法与百草枯的紫外分光光度法作了多方面比较。
上清液过柱后，用 30%甲醇水洗杂质 ，用 1.0mol/l 氯 化 铵 50%甲
RP18 柱
45% 的 乙 腈
醇液洗脱待测物， 采用反 相 离 子 对 高 效 液 相 色 谱 法 ，969PDA 检 测
器，波长 259nm，柱温 25℃，流速 1mol/min。
5 血液 Atlantis HLIC Silica 甲酸铵: 乙腈(60:40v) 0.01
第 27 卷第 6 期 2009 年 12 月
实验与检验医学 EXPERIMENTAL AND LABORATORY MEDICINE
·649·
Vol.27 No.6 Dec. 2009
·综 述·
百草枯中毒血、尿标本分析检测方法的研究进展
陈辉凤，宋乃国综述，田喜凤审校
(华北煤炭医学院生物科学系，河北唐山 063000)
百草枯是离子型有机物质, 挥发性差，必须转化为具有
百 草 枯 的 检 测 限 为 0.1mg/L， 用 NPD 检 测 器 检 测 限 为
挥发性的物质后才能进行气相色谱分析。 已报道的转化方法
0.025mg/L。 上述方法均需要对样品进行特殊的衍生或裂解处
有热解法，催化氢化法、水溶液中还原法，其中以硼酸氢化钠
方法 标本
色谱柱
流动相试剂
检测限 (μg/ml)
实验条件
1 血液 Inertsil ODS-2
含 SOS 的 磷 酸 缓 冲 0.1
采用在线样品预处理柱切换高效液相色谱法， 磷酸缓冲液调
液乙腈
pH2.0，UV3000 检测，波长 280nm,柱温 25℃，流速为 0.8ml/min。
2 血液 Varian ODS C18
提取液较难浓缩，操作较费时，百草枯含量少时易漏检。 柱切 换 法(column-switching)聚 富 集 、净 化 、分 离 于 一 体 ，克 服 了 以 往样品前处理复杂、费时费力的缺点，但设备昂贵，较难推广 应用。
2 分析方法 2.1 紫外分光光度法
百草枯有效成 分 (1，1＇-二 甲 基-4，4’-联 吡 啶 阳 离 子 盐) 的测定早期基本采用分光光度法，如测定百草枯最经典最权 威 的 方 法 —美 国 公 职 分 析 化 学 协 会 (AOCO)的 “公 定 分 析 方 法”969.09 法。 该方法均采用碱性连二亚硫 酸 钠 将 百 草 枯 还 原成蓝色自由基后 ，用分光光度法测定 。 石 杰 等[14] 将 尿 液 用
含量方法的不足和改进》一报道中对操作方法和还原条件进
检测限为 20ng/ml。 Draffan GH 等[18]用硼氢化钠与百草枯反应
行优化，明显提高了自由基的稳定性。
生成二烯六氢化衍生物， 用有机溶剂提取后， 以 1，1＇-二乙
2.2 气相色谱法
基-4，4’-联 吡 啶 二 氯 化 物 作 内 标 物 ，用 FID 检 测 器 血 、尿 中
含 SOS 磷 酸 缓 冲 液 0.2
采用在线样品预处理柱切换反相离子对高效液相色谱法，用
甲醇
TEA 调 磷 酸 缓 冲 液 pH2.8，UV-DAD 检 测 ， 波 长 258nm， 柱 温 为
30℃，流速为 0.8ml/mi。
3 血浆 Simochrom GDS -BP 含 SOS 的 磷 酸 缓 冲 0.01
1.2 固相萃取法 固相萃取法目前是百草枯净化提取 最 常 用的方法，它将百草枯从非常稀释的溶液中富集起来，从而 有利于分析。 现将国内外对于血、尿标本中百草枯的固相萃 取法归结为表 1[7～13]。
百草枯固相萃取法操作简便、快速，萃取回收率高，重现 性好，适合提取微量样品，能满足基层实际检验的需要。 不足 之处是常采用酸液或碱液作为洗脱液，提取液难以浓缩且易 损害分析柱。
另 一 篇 报 道 中 Galaceran 等[24]对 缓 冲 液 的 pH 值 、温 度 、 应用电压缓冲液中阳离子种类和浓度及进样模式等因素对
百草枯及其他除草剂分离的影响做了研究。 毛细管电泳具有 分离效率高、分离速率快、消耗成本低等特点，且样品的前处 理方法简易、避免了分析柱的损害等问题，是气相色谱和液 相色谱的补充。
1.1 液-液萃取法 液-液萃取是最早用于提取检材中百草 枯的方法。 通常情况下，依据所选用的萃取试剂不同，萃取效 果也不相同。 对于血、血浆和尿液一般选用离子对试剂：十二 烷基硫酸钠 (SDS， 回收率均在 80%以上 ) [1～4] 或辛烷磺酸钠
(SOS，回收率可达 90%以上[5])，但 SDS 比 SOS 更便宜易得。 另 外选用一般试剂： 氯仿+乙醇+硫酸铵+苯酚回收率也能达 76.6%[6]，均能满足实际检测的需求。 但液-液萃取法使用了大 量有毒试剂，对环境和操作人员的身体健康造成威胁，操作 时引入外源性杂质较多，易产生乳化现象，萃取重现性较差， 操作也较费时费力不能及时进行检测，已经被其它提取方法 所取代。
液乙腈
(10：90v) 的 混 合 液 为 洗 涤 液 ，以 二 乙 基 百 草 枯 为 内 标 物 。
7 尿血 Shiurpack CLC-ODS 含庚烷磺酸钠的磷酸 0.001
采用离子对 SPE-高效液相色谱法，DAD 检 测 器 ，波 长 258nm,柱
缓冲液乙腈
温 35℃，流速 1ml/min。 二乙胺调磷酸缓冲液 pH4.0。
采用离子交换固相萃取法提取水溶性正相高效液相色谱法，
5μm 柱
pH 3.3
996PDA 检测器，波长 259nm，柱温 30℃，流速 0.1ml/min。 高氯酸：甲
醇(6：94v) 混 合 液 对 检 材 前 处 理 ，
6 血液 Novapak C18
含 SOS 的 磷 酸 缓 冲 0.1
含 3.0M 含 辛 烷 磺 酸 钠 的 乙 腈 溶 液 ： 二 乙 胺-磷 酸 缓 冲 液(pH3)
无需进化提取，血浆沉淀蛋白处理后高效液相色谱法，用二乙胺
分析 C8 预柱
液乙腈
调 pH 为 3.0， 内 标 物 为 Ethylv Viologen Dibromide，SPD-20A 检 测
器，波长 258nm，柱温 28℃，流速为 1.0ml/min。
4 血液 Symmetrys hield TM 含 25mmol/L SOS 0.005
理后才能进行检测，操作比较复杂。
为还原剂的水溶液中还原法较易推广应用。 由于百草枯极性
2.3 液相色谱法
强，通常情况下较难气化裂解，所以有关气相色谱检测百草
液相色谱法尤其是高效液相色谱法是最常用的百草枯
枯的报道较少。 张婷等[10]将血中百草枯用国产阳离子交换树
检测方法。 检测效果和具体分析方法因选择的色谱柱、流动
萃取柱
回 收 率 (%)
实验方法
Seppak C18 C18
氰基柱 阳离子树脂 Oasis MCX
C18
Oasis MCX
＞87 87.5～98
83 ＞90.3 ＞80 83.8、89.2、83.5
＞90
无需脱蛋白处理，直接过柱萃取，用 CH3OH 洗脱。 上清液过柱萃取，CH3OH、NH4CL 洗脱。 0.1mol/L 的 NH3.H2O 分别过柱。 去蛋白后取上清液，NaOH 中和至弱碱性过柱，8mol/LHCL 洗脱。 50%甲醇水洗杂质，再用 1.0mol/L 氯化铵 50%甲醇液洗脱。 检材用糜蛋白酶酶解，滤液用离子对试剂(十二烷基硫酸钠)固相萃 取，再用酸性甲醇洗脱。 50%甲醇水洗杂质，用含乙腈 40%甲醇 2%的水溶液洗脱。
2.5 质谱联用法 质谱联用是近几年发展起来的一类新型分离检测技术。
目前国内外报道的质谱联用技术主要有气-质联用、液-质联 用、毛细管-质谱联用等。 这些方法检测结果准确可靠、重复 性好，但仪器设备较昂贵，技术含量较高，难以推广应用。
中图分类号 R446.11,R446.12
文献标识码 C
doi:10.3969/j.issn.1674-1129.2009.06.028
文章编号 1674-1129(2009)06-0649-03
百 草 枯 (paraquat，PQ) 又 名 对 草 快 、 杀 草 快 ， 是 目 前 全 世 界 使用最广泛的除草剂之一。 虽然百草枯为中等毒性农药，但 对人畜有很强毒性。 由于目前尚无特效解毒剂，中毒死亡率 较高。 口服吸收率为 5%～15%，其 血 浆 浓 度 与 死 亡 率 密 切 相 关。 对中毒患者血中百草枯浓度检测及监测对临床救治有很 大作用。 另外，由于百草枯吸收后不经代谢，在肾小管中不吸 收，多以原形从肾脏排出，故尿也作为监测中毒患者体内百 草枯浓度变化的常用检材，同时取样难度不大。 本文主要对 近年来国内外对于血液和尿液中百草枯分析方法的研究作 了综述，以便临床检验工作者选择更有效的检测方法。
1mol/L 盐 酸 溶 液 酸 化 ，3500r/min 离 心 15 分 钟 后 ， 取 上 清 液 加 NaOH、NH4CL-NH3(pH=10.3)，用 连 二 亚 硫 酸 钠 显 色 ，波 长 395nm 处比色，回收率达 101.4%+3.82%。 孙世义等[15]用固体 碳酸钠和碳酸氢钠调尿液标本 pH 大于 9 后， 慢速定量滤纸 过滤，滤液加连二亚硫酸钠显色，波长 396nm 处比色，回收率 达 96.5%～103.5%，最低检出限为 0.15ng/ml。 赵燕燕等[16]将血 样 经 20%三 氯 乙 酸 去 蛋 白 处 理 后 采 用 50μl 微 量 比 色 池 ，波 长 257nm 处比色，其回收率为 90.0%～102.4%，最低检出限为 0.01ng。 上述这些方法设备简单，仪器通用，灵敏度高，精密度 和加标回收率均能满足实验要求。 但操作条件要求苛刻，不 易控制，还原产生的蓝色自由基稳定性差，结果的稳定性大
脂固相提取后，在碱性提取条件下用硼氢化钠还原为三级胺
相等的不同而异。 现将国内外研究应用于血、尿标本中百草
供气相色谱 N、P 检测分析 ，以乙基百草Leabharlann Baidu 为 内 标 物 ，进 行 血
枯 分 析 检 测 的 液 相 色 谱 法 归 结 为 表 2 。 [5，11～13，19～21]
表 2 不同色谱柱、不同流动相中不同百草枯液相色谱法
1.3 其它方法 渗透-超滤-热凝固法操作简单， 但提取净 化时间长，提取物难浓缩且不易纯化。 水浸法提取较容易，但
方法
1[7] 2[8] 3[9] 4[10] 5[11] 6[12]
7[13]
检材
淋巴液、血浆 血浆、尿 血浆 血浆 血浆
尿、血、猪肝
血液、尿
表 1 血、尿标本不同萃取柱中百草枯的固相萃取方法
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实验与检验医学 EXPERIMENTAL AND LABORATORY MEDICINE
Vol.27 No.6 Dec. 2009
受 影 响 ，针 对 此 不 足 ，蔡 春 平 等[17]在 《AOCO 测 定 农 药 百 草 枯
标本中百草枯的定性和定量分析。 其回收率为 99.3%+7.6%，
纵观上述方法发现，通常情况下百草枯液相色谱法选用 离子对试剂的流动相、富集特性强的色谱柱，更能获得显著 的分析检测结果，最低检测限可达 1ng/ml。
2.4 毛细管电泳法 对于百草枯毛细管电泳检测方法的研究国外起步较早，
国内却比较滞后。 国外，Vinner E 等[22]用三氯甲烷和硫酸铵将 血清样本去蛋白处理后 (尿液标本直接离心后取上清进样)， 利用熔融石英毛细管载 50mmol/L 的磷酸盐缓冲液(pH 2.5)为 载体进行毛细管电泳分析，紫外波长 200nm 处检测。 其血、尿 中 百 草 枯 回 收 率 分 别 为 52%、71.4%， 线 性 范 围 为 4mg/L，检 测限均达 5pg/ml。 国内，赵燕燕[23]等用推扫富集胶束电动毛细 管色谱法检测了血清中的百草枯。 实验将血清样品用 10%三 氯 乙 酸 去 蛋 白 处 理 后 ， 以 50mmol/L 磷 酸 盐 -80mmol/LSDS (pH=2.5)为缓冲液， 55KPa 压力进样，利用未涂层的溶硅弹性 石 英 毛 细 管 在 电 压 为 22KV 下 进 行 电 泳 分 析 ，DAD 波 长 260nm 处检测。 检测限为 0.002mg/L，RSD 为 2.95%。 同时将 该方法与百草枯的紫外分光光度法作了多方面比较。
上清液过柱后，用 30%甲醇水洗杂质 ，用 1.0mol/l 氯 化 铵 50%甲
RP18 柱
45% 的 乙 腈
醇液洗脱待测物， 采用反 相 离 子 对 高 效 液 相 色 谱 法 ，969PDA 检 测
器，波长 259nm，柱温 25℃，流速 1mol/min。
5 血液 Atlantis HLIC Silica 甲酸铵: 乙腈(60:40v) 0.01
第 27 卷第 6 期 2009 年 12 月
实验与检验医学 EXPERIMENTAL AND LABORATORY MEDICINE
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Vol.27 No.6 Dec. 2009
·综 述·
百草枯中毒血、尿标本分析检测方法的研究进展
陈辉凤，宋乃国综述，田喜凤审校
(华北煤炭医学院生物科学系，河北唐山 063000)
百草枯是离子型有机物质, 挥发性差，必须转化为具有
百 草 枯 的 检 测 限 为 0.1mg/L， 用 NPD 检 测 器 检 测 限 为
挥发性的物质后才能进行气相色谱分析。 已报道的转化方法
0.025mg/L。 上述方法均需要对样品进行特殊的衍生或裂解处
有热解法，催化氢化法、水溶液中还原法，其中以硼酸氢化钠
方法 标本
色谱柱
流动相试剂
检测限 (μg/ml)
实验条件
1 血液 Inertsil ODS-2
含 SOS 的 磷 酸 缓 冲 0.1
采用在线样品预处理柱切换高效液相色谱法， 磷酸缓冲液调
液乙腈
pH2.0，UV3000 检测，波长 280nm,柱温 25℃，流速为 0.8ml/min。
2 血液 Varian ODS C18
提取液较难浓缩，操作较费时，百草枯含量少时易漏检。 柱切 换 法(column-switching)聚 富 集 、净 化 、分 离 于 一 体 ，克 服 了 以 往样品前处理复杂、费时费力的缺点，但设备昂贵，较难推广 应用。
2 分析方法 2.1 紫外分光光度法
百草枯有效成 分 (1，1＇-二 甲 基-4，4’-联 吡 啶 阳 离 子 盐) 的测定早期基本采用分光光度法，如测定百草枯最经典最权 威 的 方 法 —美 国 公 职 分 析 化 学 协 会 (AOCO)的 “公 定 分 析 方 法”969.09 法。 该方法均采用碱性连二亚硫 酸 钠 将 百 草 枯 还 原成蓝色自由基后 ，用分光光度法测定 。 石 杰 等[14] 将 尿 液 用
含量方法的不足和改进》一报道中对操作方法和还原条件进
检测限为 20ng/ml。 Draffan GH 等[18]用硼氢化钠与百草枯反应
行优化，明显提高了自由基的稳定性。
生成二烯六氢化衍生物， 用有机溶剂提取后， 以 1，1＇-二乙
2.2 气相色谱法
基-4，4’-联 吡 啶 二 氯 化 物 作 内 标 物 ，用 FID 检 测 器 血 、尿 中
含 SOS 磷 酸 缓 冲 液 0.2
采用在线样品预处理柱切换反相离子对高效液相色谱法，用
甲醇
TEA 调 磷 酸 缓 冲 液 pH2.8，UV-DAD 检 测 ， 波 长 258nm， 柱 温 为
30℃，流速为 0.8ml/mi。
3 血浆 Simochrom GDS -BP 含 SOS 的 磷 酸 缓 冲 0.01
1.2 固相萃取法 固相萃取法目前是百草枯净化提取 最 常 用的方法，它将百草枯从非常稀释的溶液中富集起来，从而 有利于分析。 现将国内外对于血、尿标本中百草枯的固相萃 取法归结为表 1[7～13]。
百草枯固相萃取法操作简便、快速，萃取回收率高，重现 性好，适合提取微量样品，能满足基层实际检验的需要。 不足 之处是常采用酸液或碱液作为洗脱液，提取液难以浓缩且易 损害分析柱。
另 一 篇 报 道 中 Galaceran 等[24]对 缓 冲 液 的 pH 值 、温 度 、 应用电压缓冲液中阳离子种类和浓度及进样模式等因素对
百草枯及其他除草剂分离的影响做了研究。 毛细管电泳具有 分离效率高、分离速率快、消耗成本低等特点，且样品的前处 理方法简易、避免了分析柱的损害等问题，是气相色谱和液 相色谱的补充。