轮状病毒IgM抗体酶联免疫诊断试剂盒说明书

轮状病毒IgM抗体酶联免疫诊断试剂盒说明书

【试剂盒名称】

通用名：轮状病毒IgM抗体酶联免疫诊断试剂盒说明书

【原理及用途】

本试剂盒采用间接ELRSA方法检测轮状病毒IgM抗体，具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简便等优点。适用于血清类标本，对轮状病毒IgM抗体的诊断及流行病学调查具有重大意义，适合一般实验室开展。

【试剂盒组成】

病人标本无需特殊制备处理，采用正确医用技术收集全血标本，离心分离后，提取血清用于检测。待测血清存放于4℃冰箱，采血后24h内测定。若需长时间保存，则应冻于-20℃一下，避免反复冻融。使用前恢复到室温。

【操作步骤】

1)加样：将标本稀释液100ul（或两滴）加到包被板孔内（预留阴、阳性及空

白对照2-5孔），将待测血清用 PBS或生理盐水按1:20稀释后取10ul加入反应孔内。阴性对照1-3孔阳性对照1孔，各加100ul对照血清。空白对照1孔空置。

2)孵育：将反应板震荡使样品混匀后置37℃温箱或水浴反应30分钟。

3)洗涤：用蒸馏水将浓缩洗涤液30ml（50ml）稀释至60ml（1000ml）。机洗：

5次，每孔注入洗涤液300ul或注满，停留30秒后吸尽拍干。

4)加酶结合物：每孔加入100ul（或2滴）酶结合物，空白不加。

5)孵育：置37℃温箱反应30分钟。

6)洗版5次：洗板操作同步骤3。

7)显色：每孔加底物A、B液各50ul（或一滴），充分混匀，37℃避光显色10

分钟。

8)终止：每孔加入终止液50ul（或一滴）混匀终止反应。

【结果判断】

1.酶标仪设定波长450nm，先用空白孔调零，然后测定各孔OD值：如果选

用双波长测定，不必设值空白对照孔。

2.当阴性对照平均OD值小于0.08，阴性对照（PC）OD值，说明试剂盒有

效且实验操作正确，否则应当重复实验。

3.临界值（COT-OFFVALUE）等于0.10加阴性对照平均（NC）OD值。(当阴

性平均OD小于0.05时，按0.05计算，当阴性平均OD值大于或等于0.05时按实际值计算)。

4.标本OD值小于临界值为阴性，标本OD值大于等于临界值为阳性。【注意事项】

1.操作前请仔细阅读说明书，应严格控制反应温度和时间。

2.试剂盒使用前要充分回复到室温。

3.不同批号试剂请勿混用。

4.请将拆封后未用完的包被板放入塑料袋内封紧保存。

【储存于有效期】

试剂盒支2-8℃避光储存，有效期6个月。