血清白蛋白测定及紫外分光光度计的使用
紫外分光光度计使用方法
紫外分光光度计使用方法紫外分光光度计是一种用于测量物质在紫外光区域吸光度的仪器，广泛应用于化学、生物、药物、环境等领域。
正确的使用方法能够保证测量结果的准确性和可靠性。
下面将介绍紫外分光光度计的使用方法。
1. 样品处理。
在进行测量前，首先要对样品进行处理。
通常情况下，样品需要溶解或稀释至适当的浓度，以确保测量结果在仪器的线性范围内。
另外，还需要注意去除样品中的颗粒物或气泡，以避免对测量结果产生影响。
2. 仪器开机。
在样品处理完成后，打开紫外分光光度计的电源开关，待仪器完成启动后，进行基准校正。
校正过程中，需要注意保持仪器处于稳定的工作状态，避免外部干扰对校正结果产生影响。
3. 设置参数。
校正完成后，根据样品的特性和测量要求，设置合适的参数。
包括选择合适的波长范围、光程长度和光谱分辨率等。
合理设置参数能够提高测量的精确度，确保测量结果的可靠性。
4. 测量样品。
将处理好的样品置于样品室中，调节样品室的位置，使光束能够通过样品并达到最佳的测量效果。
启动测量程序，记录测量结果。
在测量过程中，需要注意保持仪器和样品处于稳定状态，避免外部因素对测量结果产生干扰。
5. 数据处理。
测量完成后，对得到的数据进行处理和分析。
根据实际情况选择合适的数据处理方法，如绘制吸光度曲线、计算物质的浓度等。
同时，需要对测量过程中可能存在的误差进行评估和修正，以确保数据的准确性和可靠性。
6. 仪器关机。
在使用完毕后，及时关闭紫外分光光度计的电源开关，进行仪器的清洁和维护工作。
定期对仪器进行检查和校准，确保仪器的正常运行和测量结果的准确性。
总结。
紫外分光光度计作为一种重要的分析仪器，在实验室和生产现场有着广泛的应用。
正确的使用方法能够保证测量结果的准确性和可靠性，提高工作效率和实验质量。
因此，熟练掌握紫外分光光度计的使用方法对于化学、生物、药物、环境等领域的研究工作具有重要意义。
紫外分光光度计的使用方法
紫外分光光度计的使用方法
紫外分光光度计是一种常见的实验室仪器，用于测定样品在紫外光谱区间的吸收光谱。
以下是紫外分光光度计的使用方法及注意事项：
1. 准备样品。
样品应该是清晰透明的溶液或悬浮液，如蛋白质溶液、DNA溶液等。
2. 打开紫外分光光度计电源，并将设备预热10-15分钟。
3. 首先进行零点校准。
将纯溶剂（如水或乙醇）加入光池中，选择零点校准模式，调整波长到零点值，然后按下零点校准按钮。
4. 将样品转移到光池中，调整波长到所需测试的波长，一般为
200-400nm之间。
5. 点击“测量”按钮，记录吸光度值。
6. 完成测试后，用纯溶剂清洗光池，并关闭设备电源。
注意事项：
1. 紫外分光光度计应放置在干燥、无尘的实验室内，避免灰尘进入设备。
2. 操作前要先检查光池是否干净，以免污染样品或影响测试结果。
3. 在测试前应先将样品转移到尽可能相同的溶剂中，以消除不同溶剂的影响。
4. 测量时应注意波长范围，不要选择错波长。
5. 测量后要及时清洗光池，避免样品残留影响下一次测试。
通过合理的使用方法和注意事项，可以使紫外分光光度计得到准确、稳定的测试结果。
紫外分光光度计使用方法说明书
紫外分光光度计使用方法说明书一、简介紫外分光光度计是一种用于测量物质溶液中的吸光度的仪器。
本说明书将详细介绍如何正确操作紫外分光光度计，以便用户能准确、高效地进行实验和分析。
二、设备准备1. 确保紫外分光光度计设备处于良好的工作状态。
2. 清洁光学路径，使用干净、柔软的布轻轻擦拭，以确保准确的测量结果。
3. 打开仪器电源，待指示灯亮起后，设备即可启动。
三、测量样品1. 准备要测量的样品。
确保样品浓度和体积满足实验要求。
2. 将样品转移到光学容器中。
注意避免任何污染物进入样品溶液中。
3. 将装有样品的光学容器放入样品室中，并确保它固定在指定位置。
四、设备设置1. 在设备上设置所需的波长范围。
使用控制面板上的调节按钮进行调整。
2. 调节狭缝宽度以确保测量所需的光束。
3. 根据需要，选择适当的测量模式，并设置光程。
五、校准1. 使用参考溶液对设备进行校准。
参考溶液的选择应根据实验需求而定。
2. 将参考溶液放入光学容器中，与待测样品保持相同的体积。
3. 进行零点校准，确保设备在没有样品的情况下读数为零。
六、测量操作1. 确保样品室盖子关闭，并选择开始测量。
2. 设备将开始测量，显示出吸光度的数值结果。
3. 记录测量结果，在实验过程中根据需要进行其他操作，如多次测量或样品更换。
七、数据处理1. 对测量结果进行分析和处理，根据实验要求制作相关的图表或报告。
2. 如果需要，可使用附加功能进行光谱扫描或记录样品的时间变化。
八、设备维护1. 实验结束后，及时关闭设备电源，并进行日常维护。
2. 清洁光学路径，及时更换灯泡和滤光片等易损部件。
3. 定期检查设备的性能，并进行校准，以确保测量结果的准确性。
九、安全注意事项1. 使用时应佩戴适当的个人防护装备，如手套、护目镜等。
2. 避免直接接触化学品，遵守实验室安全规定。
3. 注意设备的用电安全，确保设备不受到潮湿、高温等不良环境的影响。
这份使用方法说明书提供了紫外分光光度计的详细操作指南，希望能帮助用户正确使用该仪器，并获得准确可靠的实验结果。
血清白蛋白标准操作规程,1200字
血清白蛋白标准操作规程血清白蛋白是一种重要的血液蛋白，其浓度的检测对于评估肝功能和营养状况等方面具有重要意义。
以下是血清白蛋白标准操作规程的详细步骤和注意事项。
一、试剂和仪器准备1. 检测血清白蛋白的试剂包括：白蛋白测定试剂盒、标准品、去离子水等。
2. 仪器包括：分光光度计、细管离心机等。
二、标本的取样和处理1. 选取新鲜、无血液溶血和降脂等异常的血清样本作为检测对象。
2. 血样采集后，立即置于无菌离心管中，以4,000转/分钟离心10分钟，将血浆分离。
3. 将血浆分装在无菌离心管中，分别标注，冷藏保存。
三、试剂的使用及准备1. 将试剂盒中的白蛋白测定试剂平均摇匀，按每次检测的样本数量和所需要的试剂量计算，避免过量使用试剂。
2. 准备好所需标准品的稀释液，按照试剂盒说明书中建议的浓度稀释标准品。
四、试验操作步骤1. 均衡室温为20-25摄氏度。
2. 试剂和样本准备：a. 在试验前半小时，将试剂和样本从冰箱中取出，适应室温。
b. 将待测样本和标准品平均搅拌均匀，避免生成气泡。
3. 试剂预热：取足够的试剂和样本，在试剂的使用温度下预热15分钟。
4. 光度计的调整：a. 打开分光光度计，选择合适的检测波长，适用于试剂盒中所使用的测量波长。
b. 将白色比色杯放入试槽中，调零，使显示屏上的光吸收值为0。
5. 基线测定：a. 将预热的白色比色杯置于试槽中，按下基线的按钮，待显示屏上的光吸收值稳定后，即可进行下一步操作。
b. 注意每次操作前都要进行基线测定，确保测量结果的准确性。
6. 样本和标准品的检测：a. 在预热的白色比色杯中，加入1.0mL的试剂，再加入0.01mL的样本，立即搅拌均匀。
b. 取45秒后的吸光度值作为测量值。
c. 重复上述步骤，测量标准品的吸光度值，并根据标准曲线计算样本中的白蛋白浓度。
7. 结果的记录计算：a. 将吸光度值记录在结果表格中。
b. 根据标准曲线的结果，计算样本中的白蛋白浓度。
血清白蛋白测定及紫外分光光度计的使用
四、临床意义：
• 1、白蛋白/球蛋白=1.5~2.5/1，通过
计算其比值可以判定肝脏的功能情况； • 2、白蛋白降低，其比值降低或倒置： 慢性肝炎（肝细胞功能降低）、肝硬 化（肝细胞坏死、肝腹水）； • 3、球蛋白大量降低：机体免疫功能降 低。
五、方法学评价
1、操作简单、快速，受干扰因素小 2、线性范围：10～60g/L, 3、RCV＜4%（批内重复测定变异系数） 4、白蛋白的测定方法：有色氨酸含量法、 燃料结合法、电泳法、免疫化学法和电化 学测定法。
10 10
于空白管中加入蒸馏水10 μl，各管充分混匀。
2、分光光度计测定方法：波长620nm， 空白管调零，测定标准管和测定管吸光度 值，按公式计算测定结果。
计算公式：
A样 Байду номын сангаас样 C标 A标
（40g/L）
三、参考值：
总蛋白：62~82 g/L 白蛋白：35~55g/L 球蛋白：20~30 g/L 白蛋白/球蛋白=1.5~2.5/1
六、注意事项
1、应保持PH为3.8 2、BCG与多种蛋白呈颜色反应，及与a-球 蛋白、运铁蛋白、结合珠蛋白结合显色， 但血清中BCG在30秒内与白蛋白的反应最 快，且呈主导地位 3、实验小组分批间隔保温。
溴甲酚绿（BCG）与血清蛋白呈非特异性反 应，但是在反应的30秒钟内溴甲酚绿（BCG）与 白蛋白结合形成蓝色复合物呈特异性反应。因此 反应结束后应立刻比色测取吸光度。
二、测定方法
1、加样： 试管三只
试剂
空白管（B） 标准管（C） 测定管（U） 工作试剂（ml） 2 2 2
标 准 液（μl） 样 品（μl）
血清白蛋白（ALB）的测定 (Assays for Serum Albumin) （溴甲酚绿染色法）
实验室紫外分光光度计使用说明及注意事项
实验室紫外分光光度计使用说明及注意事项一、紫外分光光度计的使用方法及注意事项1.1 准备工作我们需要准备好紫外分光光度计。
在购买时，要选择一款性能稳定、精度高的仪器。
在使用前，还需要对仪器进行校准，以确保测量结果的准确性。
我们还需要准备一些标准溶液，用于后续的实验操作。
1.2 实验操作步骤(1)打开紫外分光光度计的电源，等待仪器自检完成。
(2)根据实验需求，选择合适的波长范围。
通常情况下，我们会选择一个较小的范围，如200-400nm,以便更好地观察样品的变化。
(3)将标准溶液倒入比色皿中，然后将比色皿放入紫外分光光度计的样品室中。
注意不要让比色皿中的溶液溢出。
(4)调整仪器的参数，如增益、狭缝宽度等，以获得最佳的测量结果。
(5)等待仪器显示稳定的读数后，记录下测量值。
这个数值就是样品在该波长下的吸光度。
(6)重复上述操作，分别测量不同波长的吸光度值。
根据实验需求，计算出样品的总吸光度。
1.3 注意事项(1)在使用紫外分光光度计时，要注意保护眼睛。
因为该仪器会产生较强的紫外线辐射，长时间直接观察可能会对眼睛造成伤害。
因此，在操作过程中，要佩戴防护眼镜。
(2)在测量过程中，要确保比色皿中的溶液不会溢出。
如果发现溶液有溢出的现象，要及时停止实验，避免影响测量结果和仪器的使用寿命。
(3)在调整仪器参数时，要根据实际需求进行调整。
不同的样品可能需要不同的参数设置才能获得准确的测量结果。
因此，在操作过程中，要灵活运用各种参数设置方法，以便更好地满足实验需求。
二、紫外分光光度计的应用领域及发展前景紫外分光光度计作为一种重要的分析仪器，广泛应用于生物化学、环境监测、食品检测等领域。
随着科学技术的发展，紫外分光光度计在更多领域的应用也将得到拓展。
例如，在药物研发过程中，紫外分光光度计可以用于测定药物的吸收光谱，从而为药物的设计提供重要依据；在新材料研究中，紫外分光光度计可以帮助研究人员了解材料的电子结构和能带结构等信息。
紫外分光光度计使用方法
紫外分光光度计使用方法
紫外分光光度计是一种用于测量样品紫外吸收特性的仪器。
以下是使用紫外分光光度计的步骤：
1. 准备工作：将紫外分光光度计放置在平稳的台面上，确保仪器平衡。
检查光度计的光源和检测器是否处于正常工作状态。
2. 校准：使用标准溶液校准光度计。
选择适当的标准溶液，并按照仪器使用说明书中的步骤进行校准。
3. 准备样品：根据需要，将待测样品制备成溶液或固体。
确保样品处于透明状态，以便紫外光可以透过。
4. 装载样品：打开仪器的样品室，将样品放置在适当的位置上，并关闭样品室。
确保样品与光束的路径在同一直线上。
5. 设定参数：根据样品的特性和所需的测量范围，设置光度计的相关参数。
例如，选择适当的波长范围、光程长度和检测器灵敏度等。
6. 开始测量：启动光度计，开始测量。
仪器将通过发射紫外光并测量透射或吸收的光强，得到样品的光谱图或吸光度值。
7. 记录和分析数据：根据测量结果，记录并分析数据。
可以使用仪器自带的软件或其他外部软件进行数据处理和分析。
8. 清洁和保养：测量完成后，及时清洁样品室和其他附件。
定
期进行仪器的维护和保养，以确保其正常工作。
请注意，具体使用方法和步骤可能会因不同的紫外分光光度计型号而有所不同。
建议在使用前详细阅读仪器的操作手册，并按照其指示进行操作。
紫外分光光度计操作使用说明
紫外分光光度计操作使用说明一、简介紫外分光光度计是一种常用的实验仪器，用于测量物质在紫外光谱范围内的吸收和透射特性。
本文将介绍紫外分光光度计的基本操作步骤和使用注意事项。
二、仪器准备1. 将紫外分光光度计放置在干净、稳定的工作台上，并连接电源。
2. 打开仪器电源开关，并在显示屏上确认仪器是否正常启动。
三、操作步骤1. 校准a. 打开紫外分光光度计软件，并选择校准模式。
b. 清洗紫外分光光度计样品池，确保样品池干净无污染。
c. 将紫外分光光度计样品池放置于样品槽中。
d. 系统校准前，请按照仪器说明书的要求，选择正确的校准模式和校准物质。
e. 点击软件上的校准按钮，开始校准过程。
2. 测量样品a. 清洗紫外分光光度计样品池，确保样品池干净无污染。
b. 将待测样品溶液吸入样品池中。
c. 在软件界面上设置所需的测量模式和参数。
d. 点击软件上的测量按钮，开始测量过程。
e. 测量完成后，及时清洗样品池。
3. 分析数据a. 在软件界面上查看测量数据。
b. 可根据需要，对数据进行分析和处理。
c. 若需要保存数据，可选择合适的格式和路径保存数据文件。
四、使用注意事项1. 注意仪器的使用环境，避免阳光直射、温度过高或过低的场所，以保证测量结果的准确性。
2. 使用前，请检查仪器的光源是否正常，并及时更换损坏的灯泡。
3. 注意样品池的清洁，避免使用有污染或损坏的样品池，以免影响测量结果。
4. 注意选择合适的测量波长和光程，以保证最佳测量效果。
5. 在测量过程中，避免触摸样品池，并注意避免将手指接触到紫外光源，以免损坏仪器或造成伤害。
6. 使用完成后，及时清洗样品池，并将仪器放置在干燥通风处，以延长仪器的使用寿命。
总结：紫外分光光度计是一种常用的实验仪器，能够准确测量物质在紫外光谱范围内的吸收和透射特性。
正确的操作步骤和注意事项是确保测量结果准确性和仪器稳定性的关键。
通过本文提供的使用说明，用户可以更好地掌握紫外分光光度计的操作方法，确保实验工作的顺利进行。
紫外分光光度计的使用方法 光度计操作规程
紫外分光光度计的使用方法光度计操作规程紫外分光光度计是依据物质的吸取光谱讨论物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
基本工作原理和红外光谱仪相像，利用确定频率的紫外可见光照射被分析的有机物质，引起分子中价电子的跃迁，它将有选择地被吸取。
一组吸取随波长而变化的光谱，反映了试样的特征。
紫外分光光度计的使用方法如下：1开机打开样品室盖，检查样品室中是否放置遮光物，若有取出。
打开电源开关，仪器进入预热状态，预热20min。
2选择光源（此操作适用于紫外—可见分光光度计）电源开关打开后，钨灯即亮；若仪器需要在紫外光区（200nm～290nm）工作，则需将光源切换至氘灯；若仪器需要在紫外光区（290nm～360nm）工作，则要同时点亮氘灯和钨灯。
3选择波长调整波长旋钮或输入试验所需的波长，选择须用的单色光波长。
4校准目前型号较新的分光光度计具有开机自动校准功能，无自动校准功能的设备使用前需参照使用说明书手动校准。
5测量如试验方法中无特别规定，通常使用装有蒸馏水的吸取池调零后放入样品和参比样进行测试，并记录测试结果。
6数据处理定量测试时通常需要先测定若干个已知浓度的待测物标准样品，依据其吸光值与浓度绘制标准曲线。
目前新型号的紫外分光光度计本身都有制作和计算标准曲线的功能，实在操作方式可参照设备使用说明。
不具备标准曲线绘制功能的设备，可利用Excel软件或坐标纸辅佑襄助绘制。
7关机测量完毕，取出吸取池，清洗并晾干后入盒保存。
关闭电源，拔下电源插头，在样品室内放入干燥剂，盖上样品室盖，罩上防尘罩。
红外分光光度计基本原理及用途红外分光光度计由光源发出的光，被分为能量均等对称的两束，一束为样品光通过样品，另一束为参考光作为基准。
这两束光通过样品室进入光度计后，被扇形镜以确定的频率所调制，形成交变信号。
红外分光光度计基本原理：分子的紫外可见吸取光谱是由于分子中的某些基团吸取了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸取光谱。
实验五：分光光度法测定血清蛋白含量.
分光光度法测定 血清蛋白含量
实验目的
1.学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原 理。 2.掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的 实验技术。 3.掌握紫外-可见分光光度计的使用方法。
常识
紫外光：10-400 nm；可见光：400780 nm（可被人们的眼睛所感觉）;自 760nm至400μm的电磁波称为红外线，红 外线是不可见光线
导致测量误差的几点因素
分三点：化学因素 光学因素 主观因素 1、化学因素：化学因素是指被测溶液不遵 守光吸收定律所引起的误差。主要有： 被测物浓度的影响；溶液PH的影响；杂志 的影响；放置时间的影响；此外，还有溶 剂，温度，以及溶液体系的均匀性等都会 引起测定的误差。
2、光学因素： 光学因素主要是由分析仪器 的性能低劣所引起的误差，仪器性能的好 坏直接影响到测定结果的可靠性和精密性。 3、主观因素： 由于操作不当所致。如加入 试剂的量的准确，加入顺序，试剂的浓度， 反应温度和反应时间等因素都会对一些有 色物质的生成以及颜色的深浅有影响。
实验用品
（一）器材 试管，移液枪，紫外分光光度计。 （二）试剂 1．0.15mol/L NaCl溶液，用蒸馏水定容。 2．被检血清。
实验内容
用0.15mol/L NaCl溶液将血清作100倍稀释， 选用光径为1cm的石英比色杯，分别在 280nm和260nm波长两处测定溶液的吸光 度（A），根据Lowry-Kalckar公式或 Warburg-Christian公式计算此溶液的蛋白 质浓度，再乘以稀释倍数100得到血清蛋白 质的真实浓度。
实验用品
（一）器材 试管，移液枪，紫外分光光度计。 （二）试剂 1．0.15mol/L NaCl溶液，用蒸馏水定容。 2．被检血清。
紫外分光光度计使用步骤
紫外分光光度计使用步骤
紫外分光光度计是一种常用的分析仪器，用于分析样品中的化合物含量以及化学反应的动力学过程。
以下是紫外分光光度计的使用步骤：
1. 打开紫外分光光度计电源，并等待其预热。
通常情况下，预热时间为20至30分钟。
2. 确保紫外分光光度计的波长选择器处于正确的波长位置。
在测量之前，需要设置所需的波长。
3. 调节光强，以确保光源输出充足。
在测量之前需要进行光强调节。
4. 准备好样品。
样品通常需要稀释到合适的浓度才能进行测量。
确保样品没有气泡或悬浮物，以避免影响测量精度。
5. 使用样品池或石英比色皿等容器盛放样品。
注意不要让盛放容器有气泡或污染物。
6. 将样品池或石英比色皿放入光路中。
确保光路清洁，以避免影响测量精度。
7. 点击“开始测量”按钮，启动光度计测量程序。
测量过程中需要稳定控制光源，样品的温度和湿度等因素。
8. 完成测量后，记得关闭光度计电源，并清洗样品池或石英比色皿等容器。
总之，使用紫外分光光度计需要仔细掌握操作步骤，以保证测量结果的准确性和可靠性。
紫外分光光度计使用方法
紫外分光光度计使用方法
紫外分光光度计使用方法
紫外分光光度计是一种专门用于测量物质中吸收紫外线的仪器。
它可以用来测量溶液中特定物质的吸收波长，以及测量不同溶液中相同物质的吸收强度，从而达到识别物质的目的。
紫外分光光度计的使用方法如下：
1.准备紫外分光光度计：在使用紫外分光光度计之前，要先将其连接到电源上，并打开它的开关。
然后根据不同的操作要求，选择合适的滤光片，并将其安装在光路中。
2.校准样品：将样品放入测量室中，并调节参数，调整滤光片，确保样品在定量位置，调整到正确位置，确保样品处于正常状态，以便获得准确的测量结果。
3.测量：在完成校准之后，就可以开始测量样品，根据紫外分光光度计的显示结果，记录出样品的吸收波长和吸收强度，以及样品的浓度信息。
4.记录数据：在测量完样品之后，要记录出样品的吸收波长和吸收强度，以及样品的浓度信息，以便进行研究分析。
5.清理：在使用完紫外分光光度计之后，要对仪器进行清理，将滤光片和测量室内的被测物质清理干净，以免影响下一次测量结果。
6.存储：在使用完紫外分光光度计之后，要将仪器及其配件存放在避光、通风、干燥处，以免受潮受损。
使用紫外分光光度计有助于我们更好地理解物质的特性，从而更好地探索物质的秘密。
但是，要想正确使用紫外分光光度计，必须对它的使用方法有一定的了解，才能获得准确的测量结果。
紫外分光光度计的使用方法
紫外分光光度计的使用方法一、仪器简介紫外分光光度计是一种常用的实验室仪器，主要用于分析物质在紫外光区域的吸收情况，从而进行定量或定性分析。
其基本原理是利用物质对紫外光的吸收特性，测量样品溶液对不同波长紫外光的吸收率，并根据样品吸收率与标准曲线之间的关系计算出样品中所含物质的浓度。
二、操作步骤1. 开机：将紫外分光光度计插电，并打开电源开关。
待仪器自检完成后，按下“测量”键进入测量模式。
2. 标定：在进行样品测试之前，需要进行标定操作。
首先取一定量的纯水放入比色皿中，将比色皿放置于仪器台面上。
然后按下“标定”键，在弹出窗口中选择“空白”，并确认。
此时仪器会自动调零并记录下当前空白状态。
3. 放置样品：取一定量的待测试样品溶液放入比色皿中，并将比色皿放置于仪器台面上。
注意避免气泡产生。
4. 测量：按下“开始”键开始测量。
仪器会自动扫描一定的波长范围，并记录下样品吸光度数据。
测量完成后，仪器会自动计算出样品的吸光度值。
5. 计算：根据样品吸光度值与标准曲线之间的关系，可以计算出样品中所含物质的浓度。
如果需要进行定性分析，则可以根据不同物质在不同波长下的吸收特性进行判断。
三、注意事项1. 操作前应检查仪器是否处于正常工作状态，并确认比色皿清洁干燥。
2. 测量时应尽量避免气泡产生，以保证数据准确性。
3. 标定操作应在每次使用前进行，以确保测量结果的准确性。
4. 操作完毕后应及时清洗比色皿和仪器表面，并将仪器关闭。
四、总结紫外分光光度计是一种常用的实验室仪器，在化学、生物等领域有着广泛的应用。
正确使用该仪器可以提高实验效率和数据可靠性，但也需要注意操作细节和安全问题。
希望通过本文介绍，读者能够更好地掌握紫外分光光度计的使用方法。
白蛋白检测方法
白蛋白检测方法一、背景简介白蛋白（Albumin）是血液中最主要的蛋白质，占血液中蛋白质总量约 60-70％，主要由肝脏合成，用于维持血液循环及悬浮脂质，参与水溶性和油溶性物质的转运，和作为激活素，如激素和维生素辅助物质。
此外，白蛋白还参与病毒抗原的转移以及病毒抗体结合，在细胞外前列腺素合成反应中起调节作用。
由于白蛋白的重要性，其在血液中的含量可以用来衡量患者的健康情况和疾病的早期发现。
1.血清定量测定法：血清定量测定法是目前常用的检测白蛋白的方法之一。
这种方法采用改良型琼脂（Agarose）橡胶电泳法，在43℃温度下，就可达到白蛋白最佳分离的活性，使血清中的白蛋白分离出各种糖蛋白和其它血液蛋白，准确测定白蛋白含量。
此外，还可以利用反相高效液相色谱和免疫比浊的方法，检测细胞外的白蛋白含量。
2.尿液检测：尿液分析中，白蛋白可采用肝脏松来检测，该试剂可以检测尿液中的低浓度白蛋白。
此外，可采用紫外分光光度计，通过尿液中含有白蛋白的亚硝酸钠氮反应，来测定尿液中的白蛋白含量。
3.免疫分析技术：采用免疫分析法可以准确检测白蛋白含量，例如通过直接免疫吸附法（DIA）、反转阴性聚苯胺吸附-放射免疫分析（IRIA）和免疫化学法（ICA）。
另外还可以采用双抗体特异性抗原反应（SPR）、酶标法（EIA）和免疫钻取技术（IFCT）等高灵敏度的分析技术，快速测定血清中的白蛋白含量。
4、纳米生物传感技术：最近，科学家利用纳米技术来实现高灵敏度和快速的白蛋白检测。
例如采用纳米金粒子和金色葡萄球菌抗原作为特异性结合剂，可以快速灵敏地测定血清中的白蛋白含量。
总之，测定血清、尿液等体液中白蛋白含量的方法，有血清定量测定法、尿液检测、免疫分析技术和纳米生物传感技术等多种，其中最常用的是血清定量测定法，而近年来，采用纳米生物传感技术来检测白蛋白的方法也被广泛应用，得到了广泛的好评。
紫外分光光度计测蛋白质含量
紫外分光光度法测定蛋白质含量1仪器与试剂TU-1 9 01紫外一可见分光光度计，比色管,吸量管标准蛋白质溶液：5、00 mg、mL-l溶液0、9% NaCl洛液，待测蛋白质溶液2实验方法与原理本实验采用紫外分光光度法测定蛋口质含量。
紫外一可见吸收光谱法乂称紫外一可见分光光度法,它就是研究分子吸收19 0 nm〜750nm波长范围内得吸收光谱，就是以溶液中物质分子对光得选择性吸收为基础而建立起来得一类分析方法.紫外-可见吸收光谱得产生就是山于分子得外层价电子跃迁得结果，其吸收光谱为分子光谱，就是带光谱。
蛋口质中酪氨酸与色氨酸残基得苯环含有共轨双键，因此，蛋白质具有吸收紫外光得性质，其最大吸收峰位于280 nm附近（不同得蛋白质吸收波长略有差别）•在最大吸收波长处，吸光度与蛋口质溶液得浓度得关系服从朗伯一比耳定律。
该测定法具有简单灵敬快速高选择性,且稳定性好，干扰易消除不消耗样品，低浓度得盐类不干扰测定等优点。
3实验步骤3、1准备工作3、3、1启动计•算机，打开主机电源开关，启动工作站并初始化仪器。
3、3、2在工作界面上选择测量项目（光谱扫描，光度测量），本实验选择光度测量,设置测量条件（测量波长等）。
3、3、3将空白放入测量池中，点击START扫描空白，点击ZERO校零。
3、3、4标准曲线得制作。
3、2测量工作3、2、1吸收曲线得绘制用吸量管吸取2mL5、00m g/mL标准蛋白质溶液于1 0 mL比色管中，用 0、9% NaCl溶液稀释至刻度，摇匀。
用1 cm石英比色皿，以0、9% N&C1溶液为参比，在190 nm〜40 0 nm区间，q全波段扫描。
3、2、2标准曲线得制作用吸量管分别吸取 0、5、1、0、1、5、2、0 、2、5m L 5、00 mg、niL—l标准蛋白质溶液于5只1 0 mL比色管中，用0、9% N&C1溶液稀释至刻度，摇匀•用1 cm石英比色皿，以0、9%NaC 1溶液为参比，在280 nm处分别测定各标准溶液得吸光度A決记录所得读数.3、2、3样品测定取适量浓度得待测蛋口质溶液3mL,按上述方法测定2 78 n m处得吸光度。
血清总蛋白和白蛋白测定实验方案(参考资料)
血清中总蛋白和白蛋白测定的实验方案血清总蛋白的测定：实验原理血清(浆)中蛋白质的肽键(-CO-NH-)在碱性溶液中能与2价铜离子作用生成稳定的紫红色络合物。
此反应和2个尿素分子缩合后生成的双缩脲(H2N-OC-NH- CO-NH2)在碱性溶液中与铜离子作用形成紫红色的反应相似，故称之为双缩脲反应。
这种紫红色络合物在540nm处有明显吸收峰，吸光度在一定范围内与血清蛋白含量呈正比关系，经与同样处理的蛋白质标准液比较，即可求得蛋白质含量。
实验器材分光光度计实验试剂1.6mol/L NaOH溶液称取NaOH 240g，溶于新鲜制备的蒸馏水约800ml中，定容至1L，贮于有盖塑料瓶中。
2.双缩脲试剂称取硫酸铜结晶(CuSO4·5H2O)3g溶于新鲜制备的蒸馏水500ml 中，加入酒石酸钾钠(NaKC4H406·4H2O），用以结合Cu2+，防止CuO在碱性条件下沉淀)9g和KI(防止碱性酒石酸铜自动还原并防止Cu2O的离析)5g。
待完全溶解后，在搅拌下加入6mol/L NaOH溶液100ml，并用蒸馏水定容至1L，置塑料瓶中盖紧保存。
此试剂室温下可稳定半年，若贮存瓶中有黑色沉淀出现，则需要重新配制。
3.60～70g/L蛋白质标准液可用定值参考血清或标准白蛋白作标准。
实验操作取试管3支，混匀，置25℃30min或37℃10min，在波长540mm处比色，用空白管调零，测各管吸光度。
参考范围60～80g/L。
注意事项1.黄疸血清，严重溶血，葡萄糖，酚酞及溴磺酞钠对本法有明显干扰，故用标本空白管来消除。
但如标本空白管吸光度太高，可影响测定的准确度。
2.高脂血症混浊血清会干扰比色，可采用下述方法消除：取2支带塞试管或离心管，各加待测血清0.1ml，再加蒸馏水0.5ml和丙酮10ml，塞紧并颠倒混匀10次后离心，倾去上清液，将试管倒立于滤纸上吸去残余液体。
向沉淀中分别加入双缩脲试剂及双缩脲空白试剂，再进行与上述相同的其他操作和计算。
紫外可见分光光度计测定蛋白质的实验方法
紫外可见分光光度计测定蛋白质的实验方法紫外分光光度法测定蛋白质含量一、实验目的1.学习紫外分光光度法测定蛋白质含量的原理。
2.掌握紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验技术。
3.掌握TU-1901紫外-可见分光光度计的使用方法并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理1.紫外-可见分光光度法，是以溶液中物质的分子或离子对紫外和可见光谱区辐射能的选择性吸收为基础而建立起来的一类分析方法。
紫外光：10-400 nm可见光：400-780 nm(可被人们的眼睛所感觉)特点：带光谱、分子光谱应用：定性分析-最大吸收波长; 定量分析-朗伯-比尔定律(标准曲线法和标准加入法) a.定性分析原理：吸收曲线：吸收峰的数目、位置、相对强度以及吸收峰的形状.b.定量分析原理：根据朗伯-比耳定律：A=εbc，当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
定量分析常用的方法是标准曲线法即只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含量。
c.仪器组成部件:各种类型的紫外-可见分光光度计，如下图所示，从总体上来说是由五个部分组成，即光源、单色器、吸收池、检测器和信号显示记录装置。
2.本实验采用紫外分光光度法测定蛋白质含量的实验原理：(1)蛋白质可作定量分析的原因：蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，所以蛋白质溶液在275--280nm具有一个吸收紫外吸收高峰。
在一定浓度范围内，蛋白质溶液在最大吸收波长处的吸光度与其浓度成正比，服从朗伯-比耳定律，因此可作定量分析。
该法测定蛋白质的浓度范围为0.1—1.0mg/mL。
(2)此种方法测量的准确度差一点的原因：由于不同蛋白质中酪氨酸和色氨酸的含量不同，所处的微环境也不同，所以不同蛋白质溶液在280nm的光吸收职也不同。
据初步统计，浓度为1.0 mg/mL的1800种蛋白质及蛋白质亚基在280nm的吸光度在0.3—3.0之间，平均值为1.25+/-0.51。
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10
于空白管中加入蒸馏水10 μl，各管充分混匀。
2、分光光度计测定方法：波长620nm， 空白管调零，测定标准管和测定管吸光度 值，按公式计算测定结果。
计算公式：
C样
A样 A标
C标
（40g/L）
三、参考值：
总蛋白：62~82 g/L 白蛋白：35~55g/L 球蛋白：20~30 g/L 白蛋白/球蛋白=1.5~2.5/1
血清白蛋白（ALB）的测定 (Assays for Serum Albumin)
（溴甲酚绿染色法）
一、原理 二、测定方法 三、参考值 四、临床意义 五、方法学评价 六、注意事项
一、原理
在pH4.2缓冲液中，溴甲酚绿（BCG） 与白蛋白结合形成蓝色复合物（血清白蛋 白在pH4.2的缓冲液中带正电荷，在非离 子型表面活性剂存在时，可与带负电荷的 染料溴甲酚绿结合形成蓝绿色复合物）， 在波长620nm处有最大吸收峰，其颜色深 浅与白蛋白浓度成正比。与经过同样处理 的白蛋白校准液进行比较，即可计算出样 品中白蛋白含量。
六、注意事项
1、应保持PH为3.8 2、BCG与多种蛋白呈颜色反应，及与a-球 蛋白、运铁蛋白、结合珠蛋白结合显色， 但血清中BCG在30秒内与白蛋白的反应最 快，且呈主导地位 3、实验小组分批间隔保温。
溴甲酚绿（BCG）与血清蛋白呈非特异性反 应，但是在反应的30秒钟内溴甲酚绿（BCG）与 白蛋白结合形成蓝色复合物呈特异性反应。因此 反应结束后应立刻比色测取吸光度。
二、测定方法
1、加样： 试管三只
试剂 空白管（B）标准管（C）测定管（U）
工作试剂（ml）
2
2
2
标 准 液（μl）
10
样 品（μl）
四、临床意义：
• 1、白蛋白/球蛋白=1.5~2.5/1，通过
计算其比值可以判定肝脏的功能情况；
• 2、白蛋白降低，其比值降低或倒置：
慢性肝炎（肝细胞功能降低）、肝硬 化（肝细胞坏死、肝腹水）；
• 3、球蛋白大量降低：机体免疫功能降
低。
五、方法学评价
1、操作简单、快速，受干扰因素小 2、线性范围：10～60g/L, 3、RCV＜4%（批内重复测定变异系数） 4、白蛋白的测定方法：有色氨酸含量法、 燃料结合法、电泳法、免疫化学法和电化 学测定法。