耐硒微生物的筛选与鉴定

学号：K071041404

湖北民族学院科技学院

本科毕业论文

题目: 一株耐硒微生物的筛选与鉴定

姓名：黄益

班级：K071041404

专业：生物工程

指导教师：唐巧玉

中国·恩施

二零一四年五月

Stu.ID:K071041404

BACHELOR'S THESIS OF HUBEI UNIVERSITY FOR NATIONALITIES

Screening and identification of selenium-resistant

strain of microorganisms

Professional: Biological Engineering

Name：Huang Yi

Academic Advisor：Tang Qiaoyu

Enshi · China

May , 2014

学术声明

1、坚持以“求实、创新”的科学精神从事研究工作。

2、本论文中除引文外，所有试验、数据和有关材料均是真实的。

3、本论文中除注明作者和来源的引文外，不包含其他人、其他机构已经发表或撰写过的研究成果。

4、其他同志对本研究所做的贡献已在论文中做了声明并表示了谢意。

5、本声明的法律后果由本人承担。

作者签名：

年月日

导师审核声明

本人郑重声明：该生所呈交的学位论文，是在本人的指导下独立进行研究工作所取得的成果。其中文字、图、表及其它相关内容均经本人审核，同意作为该生的学位论文提交。

导师签名：

年月日

一株耐硒微生物的筛选与鉴定

黄益

（湖北民族学院生物科学与技术学院，湖北恩施，445000）

摘要:本文以恩施富硒土壤中的微生物为研究对象。使用无菌磷酸盐缓冲液悬浮后再进行其他处理结合平板划线涂布培养分离出耐硒菌株23个。用硒浓度作为变量，利用控制变量法筛选出最耐硒菌株，进行革兰氏染色观察其颜色作初步鉴定，并对其进行生理生化鉴定，初步确定菌种类型。

通过上述初步鉴定实验得到的结论，参照《伯杰细菌鉴定手册》初步判断得到的最耐硒菌种为土壤杆菌属。

关键词：硒；微生物；筛选；鉴定；

Screening and identification of selenium-resistant strain of microorganisms

Huang Yi

(Class K0710414, School of Biological Science and Technology, Hubei Institute for

Nationalities, Enshi, Hubei, 44500, China)

ABSTRACT:This dissertation Enshi Se soil microorganisms for the study.After using sterile phosphate buffer (phosphate buffered saline,PBS) to suspended the thalli,we used other methods including streak plate and spread plate cultivation method.As a result,23 kinds of Se-resistant microorganism was separated.Selenium concentrations was choosed as a variable,using control variable method to select the most selenium- resistant microbial strains,then we went about the preliminary identification by Gram staining,after the physiological and biochemical identification,the type of t-he Strain is initially determined .

According to conclusion obtained by the preliminary identification experi ment,and reference to"berger bacteria identification manual",the most selenium-resistant microbial strain preliminarily determined is Agrobacterium.

Key words：Se;Microorganism;Filter;Identify;

目录

学术声明 (Ⅰ)

摘要 (Ⅱ)

Abstract (Ⅲ)

1 前言部分 (1)

1.1 硒的作用 (1)

1.1.1土壤中微生物的作用................................................................. 错误！未定义书签。

1.1.2 富硒土壤中的微生物 (3)

1.2 本实验的意义 (4)

2 实验部分 (5)

2.1 实验材料与培养基 (5)

2.1.1实验土样来源 (5)

2.1.2培养基及原料来源 (5)

2.1.3主要溶液 (6)

2.1.4仪器设备 (6)

2.2 方法 (7)

2.2.1 土壤耐硒菌的分离 (7)

2.2.2 耐硒菌的筛选 (7)

2.2.3 耐硒菌的菌落观察 (7)

2.2.4 耐硒菌YtbTse20的鉴定 (7)

2.2.4.1 革兰氏染色 (7)

2.2.4.2 V-P测定 (8)

2.2.4.3 明胶液化实验 (8)

2.2.4.4 淀粉水解 (8)

2.2.4.5 接触酶测定 (8)

2.2.4.6 硝酸盐还原测定 (8)

2.2.4.7 甲基红反应 (8)

2.2.4.8 脲酶反应 (8)

2.2.4.9 糖、醇发酵测定 (8)

2.2.4.10 柠檬酸盐利用试验 (8)

2.2.4.11 吲哚试验....................................................................... 错误！未定义书签。

2.3 菌种复壮和保存 (7)