γ-氨基丁酸企标及检测方法(PFI)
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γ-氨基丁酸企标及检测方法
1 γ-氨基丁酸企标要求
除应符合卫生部公告2009年第12号的规定外,应符合重金属和微生物要求。
1.1 性状
本品为白色至淡黄色粉末,具有本品特有的滋味及气味,无异味。
日本富尔玛株式会社
研发部生产管理部
附录A
«γ-氨基丁酸含量的测定»
1.原理
高效液相色谱仪·氨基酸分析系统(HPLC-PC)是包括高性能输送液体装置(泵)的HPLC 系统,并在通常的分离部位安装柱后衍生检测装置。
2.器具及试验试剂
【器具】
・精密天平称
・过滤器
・高效液相色谱仪·氨基酸分析系统
【试验试剂】
・4-氨基丁酸(γ-氨基丁酸、GABA)
・柠檬酸三钠
・高氯酸
・n-癸酸
3.各种溶液的调制
【柠檬酸缓冲液(pH2.2)的调制】
①在9.8g柠檬酸三钠中加入400ml蒸馏水溶解。
②在上述①中加入8ml高氯酸、50μL n-癸酸、得到500mL溶液,用高氯酸调制为pH2.20。
【4-氨基丁酸标准溶液的调制】
ⅰ称量4-氨基丁酸(实验试剂)放入容量瓶中,用蒸馏水定溶。
ⅱ将上述ⅰ放入容量瓶中,用上述柠檬酸缓冲液定溶。
ⅲ用膜片过滤器过滤。
【样品溶液的调制】
・用蒸馏水稀释样品。
然后,在最后的稀释阶段使用上述柠檬酸缓冲液。
4.试验方法
Ⅰ)使上述3中调制的「4-氨基丁酸标准溶液」及「样品溶液」流入高效液相色谱仪·氨基酸分析系统。
并且,此时的条件如下。
【HPLC条件】
・分析柱:Shim-pack Amino-Na(6.0×100mm)
・捕氨柱:Shim-pack ISC-30/S0504 (4.0×50mm)
・移动相:岛津Na型氨基酸移动相试剂盒(AA-MA,AA-MB,AA-MC)
・反应液1(AA-RA):岛津氨基酸分析试剂盒碳酸-硼酸缓冲液(pH10)
・反应液2(AA-RB):岛津氨基酸分析试剂盒OPA试验试剂
・检验器:荧光检验Ex350nm、Em450nm
Ⅱ)根据「4-氨基丁酸标准溶液」的保持时间和面积、用1点绝对校准曲线法算出样品4-氨基丁酸(GABA)的浓度。
日本富尔玛株式会社
研发部生产管理部。