消化胰酶配制方法

适用于，无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者

对一般细胞0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin)

配方：100ml PBS,0.25g胰酶

步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2·12H2O

/2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水)

2 称胰酶0.25g

3 加入PBS中，低速搅拌〈4h冰浴中,或者4℃过夜

低速搅拌0.5h冰浴中

4 调PH7.4

5 仍在冰浴中

6 过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完

tip:低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫，

酶就变性了。低温，防止酶失活

对难消化的细胞：在上述配方中，加入0.02g的EDTA(0.02%)

tip:因为EDTA可以络合Ca2+，增加消化效力好帖，顶一个！！！

不过我们用hanks配制胰酶好呀，对我帮组好大呵呵,亲人呀呵呵,亲人呀Thank you!谢谢分享！谢谢。呵呵应该是Ｄ-Ｈａｎｋｓ吧．excellent好是好，不过你的分子式写错了，PO4HNa2应为Na2HPO4，PO4H2K应为KH2PO4。这种错误好像不该出吧。我用的是EBss配的.呵呵，经典提醒。

我的一位大学老师，有机化学，我称之为董，呵呵。

前几天，和前辈聊，他说：你学了那么多学科，还接触过很多实验，应该在科研上很有前途。我说：等我自己积累到一定程度，就能把昨天的东西也发挥上。

董，你的提醒，促使我加强这个意识！！！好！

提醒一点，一定要分装成小瓶！2~3次即用完！不然胰酶失活，你会很麻烦！胰酶是不能用hanks的,应用D-hanks,不能有钙镁离子我们都用PBS配置，然后加EDTA。方法如下：PBS100ml+250mg胰酶+0.02EDTA

消化作用很快，加EDTA对细胞毒性较小。