临床血液学检查常见实验室技术培训课件

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临床血液学检查常见实验室技术
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•抗凝剂选择
EDTA：对血小板和血细胞形态影响小，而对 其功能影响大。 一般不用于检测PLT功能检 验。 也不适合Ca K Na及其他含N物质检测。
1-2mg/mL 常配成1.5%，100℃烘干使用。
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•肝素钠
抗凝效果好，不影响血细胞形态及不易引起 溶血。缺点：引起白细胞聚集，染色效果差， 价格相对贵。生化分析，红细胞压积测定。 不适合白细胞计数、血小板计数、血涂片检 查和凝血检查。配成1%，取0.5mL 37-50℃ 烘干，可使5mL抗凝，及时使用，过久易失 效。
•渗透性大小 血液中盐浓度、红细胞膜状态、红细胞年龄 临床意义：
溶血性贫血性质 增高：自体免疫溶血性贫血 降低：幼畜缺铁性贫血 测定方法：P87
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血红蛋白含量测定
Hb：含Fe的色素蛋白，占RBC的32-36% 方法：氰化高铁Hb测定法；AHD-575测定法； 沙利氏法
原理：血液与0.1M Hcl作用后，血红蛋白变 为棕色，与标准比色柱比色，求出100mL血 液中所含血红蛋白百分比或克数。
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•各动物Hb参考值（P88） •临床意义：同RBC类似 实验测定：P88
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红细胞计数
• 细胞计数板计数
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血液涂片制作
• 选片 • 推片 • 染色
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• 瑞氏染色法 • 吉姆萨染色 • 瑞Fra Baidu bibliotek-吉姆萨染色
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•将染液滴加至血涂片上（全覆盖）1-2min •加等量中性缓冲液或蒸馏水混匀3-5min •冲洗，风干，观察
注意
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红细胞压积容量测定
•PCV/Hct •红细胞占血液体积比 贫血，补液参考
原理：将抗凝血置于特制温氏管，经一定的 速度和时间离心沉淀，红细胞下沉到最小容 积，即可测的每升血液中红细胞所占容积比 值。
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•各动物正常比值（P84） •临床意义： 升高：脱水，红细胞相对升高所致
降低：红细胞减少，贫血 测定：温氏法
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红细胞渗透脆性
•原理 红细胞在等渗溶液中保持形态不变 置于一系列低渗溶液中，造成溶血
开始溶血：最小抵抗--完全溶血：最大抵抗
抵抗力小：渗透脆性高，抵抗力大：渗透脆 性低。抵抗力大小用NaCl浓度表示。
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临床血液学检查常见实验 室技术
动物采血技术
•禽 翼根静脉 心脏采血
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•猪 成年猪：耳静脉 6月龄内：前腔静脉
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•牛羊 颈静脉 上中1/3交界
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•实验动物 鼠，兔
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血样处理
•血液采集后立即处理 or 冰箱保存 •室温<24h; 根据用途（血清或血浆）选择离 心或者抗凝剂使用 •WBC: 2-3h RBC,Hb:24h PLT：1h