线粒体dna鉴定

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线粒体dna鉴定

篇一：线粒体DnA的结构特征及在鹿科动物物种鉴定中的应用

线粒体DnA的结构特征及在鹿科动物物种鉴定中的应用摘要最新研究表明，作为生物能量的生成场所线粒体是一种具有自我遗传控制功能，本文重点针对鹿科动物的线粒体DnA结构特征进行了研究和分析，通过具体的实验验证了鹿科动物物种鉴定中线粒体DnA的实际功能和应用。同时，还对线粒体DnA的提取方法进行了探索，最后就线粒体DnA 的序列以及动物物种进行了鉴定，就鹿科动物线粒体DnA的研究成果提出了意见。

关键词染色体；线粒体DnA；鹿科动物；物种鉴定

0引言

线粒体是1898年被命名的，其实线粒体的发现却要追踪到1850年。线粒体外膜比较平滑，具有两层的膜包被，

向内的折叠内膜形成嵴，两层膜中间有一个腔，基质居于线粒体的中央。基质内部有可以喝三羧酸进行循环时所需要的所有酶类，内膜上有ATp酶复合体和呼吸链酶系。线粒体其实就是细胞内形成ATp和氧化磷酸化的关键场所，因此，被形象地成为细胞的动力加工厂。

1线粒体DnA结构特征

真核生物所呼吸所用的细胞器就是线粒体，不同物种的细胞之间，其线粒体的数目有着很大的差距，通常情况下都在100个~3000个之间，植物细胞中一般都会含有50个~100个左右的线粒体，而动物的细胞中其线粒体的数目差异性要远远高于植物体内的线粒体数目，多的要达到1000个，少的却只有50个左右。实验表明，植物细胞中的所有线粒体都会参与植物本身的一系列新陈代谢的全过程。植物体内的所有的线粒体通过自身的功能可以把细胞所吸收和合成的糖类、脂肪等所有的储藏能量经过进一步地氧化而生成了co2和h2o，最后通过特定的方式将其释放出去，同时它还能将所存储的一些太阳能经过一系列的转换生成了细胞用以维持自身的生理功能的具体能量-ATp分子。正是由于植物细胞中的线粒体少于动物体内的线粒体，从而制约了能量的来源，因此植物就不可能出现和动物一样的自由活动和快速增长。由于线粒体DnA（mtDnA）相对比较小，所以它仅能决定本身最基本的一些特征，缺少多余的编码结构，因此就难

以产生有效的修复功能。实验表明，只要线粒体DnA受到了不同程度的损伤，哪怕只是一个极其微小的变化，都会直接导致和引发线粒体的正常的功能，这种效应还具有一定的累加性，变异的幅度会随着损害程度的变化而不断地加大，最后就会产生连细胞核都无法具备的一些独特功能。

2线粒体DnA的提取方法

鹿科动物的线粒体DnA的常见的提取方法有：碱变性法；柱层析法；氯化铯密度梯度离心法；Dnase法柱层析法；改良碱变性法等几种。

碱裂解法是借鉴质粒快速提取法所建立，在差速离心获得线粒体后。通过高

篇二：DnA个体识别鉴定书

鉴定机构全称

（英文标题）

（DnA个体识别）××鉴定书

（）公（）鉴（）字[20]号

一、绪论（一）委托单位：（二）委托人：

（三）委托时间：200年月日（四）案情摘要：（五）检材和样本：（以下内容为例举）

1、标记“××”字样物证包装袋一个，内装（现场提取或为受害人的）白色棉内裤一条，裆部可疑斑迹，剪取少许标记为1号检材。

2、嫌疑人张××的白色的确良衬衫一件，其左胸部、

右衣襟处分别可见3cm×2.1cm和2cm×2cm面积的褐色斑迹，剪取少许依次标记为2、3号检材。

3、嫌疑人张××的血样纱布一块，剪取少许标记为4

号检材。（六）鉴定要求：（以下内容为例举）

地址：邮编：

单位名称：电话：第页共页

对上述检材进行DnA检验及同一认定。二、检验

（以下内容为例举）（一）检验过程

1、预实验：取1号检材少许，经酸性磷酸酶检验为阳性。取

2、3号检材少许，经孔雀绿检验为阳性。

2、确证实验：取1号检材少许，经抗人精试验检验，

结果为阳性。取2、3号检材少许，经抗人hb试验检验，结果为阳性。

3、DnA提取：按行标gA/T383-20XX中差异裂解法分离

1号检材，经消化后，收集上清溶液（备用），取沉淀少许涂片，he染色镜检，高倍镜下可检见精子，应用xxx法提取精子DnA。

按行标gA/T383-20XX中chelex法提取2-4号检材DnA。

4、DnA质和量的检测：采用xxx系统扩增1-4号检材DnA，经AbI-7500型定量pcR仪分析，确定1-4号检材DnA的质量。

5、sTR多态性检验：取适量的1-4号检材DnA，应用Identifiler系统，经pcR复合扩增sTR基因座；扩增产物经AbI-3100型DnA序列分析仪电泳分离和激光扫描分析，得到上述检材的sTR分型结果。

6、线粒体DnA序列分析检验：取适量2-4号检材的DnA，扩增mtDnAhVI区16091-16418区间片段，扩增产物经纯化后采用big-Dye试剂盒进行测序反应，测序反应产物在

AbI377型DnA序列分析仪上进行电泳分离和序列分析，得到2-4号检材的序列结果。

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7、Y染色体sTR检验：取适量1-4号检材的DnA，使用Y-xxx系统进行pcR复合扩增，扩增产物Ab-3100型DnA序列分析仪电泳分离和激光扫描分析，得到上述检材的Y-sTR 分型结果。（二）检验结果

1、DnA质和量的检验结果：

2、sTR多态性检验结果：

3、线粒体DnA序列分析检验结果：

2-4号检材在mtDnAhVI区（16091-16418区间）的检测序列与Anderson标准序列比较，碱基变异位置如下：2号：16093c,16223A,16362c3号：16129A,16223A

4号：16129A,16223A4、Y染色体sTR检验结果：

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