猪瘟传染病实验猪瘟诊断技术
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实验任务
每组检测6份血清样品,来自两个不同批次疫苗免疫的同 一ห้องสมุดไป่ตู้群,评价免疫效果。
试验器材:
酶标仪 试剂盒 待测血清 加样器 温箱 去离子水 吸水纸 手套
结果判定
OD450nm≥ 0.15;判定为CSFV-IgG阳性。 OD450nm< 0.10;判定为CSFV-IgG阴性。 阴性对照血清A值应小于0.10,阳性对照血清A值应大于
0.70,否则试验不成立。 未感染也未免疫猪瘟疫苗的健康猪瘟为阴性。 该试验CSFV-IgG值,不能区别疫苗接种和野毒感染。
猪瘟诊断技术
家畜疫病学 实验六 2011-12
实验目的
熟练掌握猪瘟抗体ELISA检测方法。 结合临床资料、免疫程序解释ELISA结果。
实验材料
CSFV抗原包被板 酶标记物 样本稀释液 洗涤液 CSFV-IgG阴性对照血清 CSFV-IgG阳性对照血清 显色剂A 显色剂B 终止液 盖板膜
方法步骤
加样:设阴、阳性对照各2孔,分别加入不稀释的阴、阳性对照血清 100μL ,待检样品孔加100μL样本稀释液和10μL血清。
温育:震荡10s,置37℃ 温育30m。 洗涤:弃去孔内液体,用洗涤液洗涤5次,每次停留1分钟,最后一次
洗后拍干。 加酶:每孔加酶标记物100μL。 温育:置37℃ 温育30m。 洗涤:同上。 显色:每孔加入A/B显色剂各50μL,震荡混匀, 37℃ 避光反应15m。 终止:每孔加入终止液50μL,震荡10s,充分混匀。5m内读数。 读数:酶标仪检测波长设置为450nm。