试验酵母细胞的固定化

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?海藻酸钙凝固的颗粒能反复使用,细胞在空格中可新陈 代谢(固定活细胞),也可以利用细胞中的酶进行酶促 反应(固定死细胞)。
?本实验利用海藻酸钙凝胶包埋酵母生长细胞。
三、 实验材料和仪器
?固定化细胞材料 ?2.5%海藻酸钠溶液20mL,加热助溶,冷至45℃备用。 ?配制50mL 1.5%CaCl2。 ● 20毫升注射器,150ml 烧杯和50ml 烧杯各一个、三角瓶、
℃,否则会凝固。
五、注意事项
?海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量 ?如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠; ?如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少
,影响实验效果。
五、注意事项
?刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形 成稳定的结构
? 检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法。 ? 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容
易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。 ? 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明
制备的凝胶珠是成功的。
谢谢!
玻璃棒、温度计、镊子
四、 实验方法和步骤
?酵母细胞的活化 ?取市售干酵母按1g投入到20ml 36~38℃的温水中活化15~
20分钟,酵母细胞活化时体积会变大,活化前应该选择体 积足够大的容器,以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。
四、 实验方法和步骤
?酵母细胞的固定化 ?在冷却至45~50℃左右海藻酸钠溶液中,加入5mL预热至
35℃的酵母培养液,混合均匀。将混合液装入注射器中, 装上大好针头,以缓慢而稳定的速度将其滴入1.5%CaCl2 溶液中,边滴边摇动三角瓶,即可制得直径为3mm左右的 凝胶珠。
?在CaCl2溶液中钙化30min,即可使用。
五来自百度文库注意事项
?加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环
? 一定要溶解彻底,在溶解过程中不断搅拌,在降温过程中不能低于45
实验四 酵母细胞的固定化
高大响
一、 实验目的和要求
?了解固定化细胞的原理。 ?掌握用海藻酸钠制备固定化酵母细胞的方法。
二、 实验原理
?工业上常用包埋法固定微生物细胞。根据包埋剂的特性 ,海藻酸钠在水相中加热溶解呈溶液状。将细胞加入混 匀,滴入氯化钙溶液中,由于离子的转移作用而凝固, 形成凝胶颗粒,凝胶颗粒中的微小空格将细胞固定。
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