转基因检测实验室环境污染的控制和预防
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１ ． ２ 样 品准 备 区 该 区域 无 压 力 设 置 要 求 。该 区 域 是 用 于 对 样
势， 种植 的国家也不断增多， 但欧盟、 日 本和韩国等国家 和地区对于进 口的食用农产品均要求提 供非转基 因作物
或成分证明 我国也要求含转基 因成分的商品应 明确标
识 。因此 ， 转基因检测工作 的重要 ｌ 生 也 日益突显。 目前 ， 国内外转基 因检测 大多采 用聚合 酶链式 反应 （ Ｐ Ｃ Ｒ） 技
关键 词 ： 转 基因 ； 实验室环境污 染 ； 控制 ； 预 防
０ 引 言
近年来 ． 全球 转 基 因作 物 种植 面积 呈逐 年上 升趋
所有 Ｐ Ｃ Ｒ所需 试 剂 的混合 ） 添加到 Ｐ Ｃ Ｒ管 的操作 。 重要 提示 ： 不 能 将其 它房 间 的材 料 （ 包括扩增 、 模 板 和 目标 核酸 或 阳性 对 照 、 供应 品 、 或设 备 ） 带 进 试 剂 准备 区。
转基 因 则 实验室环境污染进行控制和预防。
备区内还 可设立一个 专用 的封 闭区或房 间用于样
品 的 接 收 和储 存 。这 个 房 间 可 以放 置 冰 箱 用 于 样 品储 存 ， 应 该 和 样 品 准 备 区其 它 区 域 隔 离 开 。样
１ 实验 室的设计分 区和布局
首先 ， 在 设 计建 造 实验 室 时 ， 不 同 区域 应 进行 有
一
等； Ｐ Ｃ Ｒ试剂准备 区用 于 Ｐ Ｃ Ｒ试剂的制备 和保存 ． 例 如 准备 引物 、 探针等 Ｐ Ｃ Ｒ试 剂 。为 了 防止 交 叉 污
染， 避 免 反 复冷 冻 和解 冻 ， 试 剂存 贮 溶液 应 该被 平 均 为 小 的工 作 体 积 ， 储 存 在 这 个 房 间 以备 后 用 ： Ｐ Ｃ Ｒ 主 反 应 液准 备 区 将 进 行 主 反 应 混 合 液 （ 除 了样 品 。
４７ —
隔 在不 同 区域 或 不 同 房 间 。 以降 低 扩 增 产 物 的污 染 风 险 。如 果没 有 条 件 在该 区域 设 立 负 压 ， 此 区域 必 须 建立 排 风装 置 。 重要 提 示 ： 这个 房 间 的物 品不 能 带 人 样 品 准备 区或试 剂准 备 区 。
品 进行 分 样 ， 将样品进行研磨 、 粉碎 、 匀 浆 的区域。 由于在 这 些 粉 碎 、 研 磨 和 匀 浆 处 理 过 程 中 会 产 生 气溶 胶 ， 因此 ， 存 在 阳性 样 品污 染 后 续 操 作 的 可 能 性 。该 区域 与 后 面 的 区 域 应 严 格 隔 离 ， 应 放 在 与
后 面 的 三个 区域 隔 开 的 独 立 的 房 间 中 。在 样 品准
术， 其 中包括普通 Ｐ Ｃ Ｒ和实时荧光 Ｐ Ｃ Ｒ。Ｐ Ｃ Ｒ检测方法 是极其 敏感的， 实验室环境污染存在 巨大的风 险 ， 污染来
源一般为样品的交叉污染、 气溶胶、 灰尘等。如何控制转 基 因检测实验室环境污染至关重要 。本 文将 阐述如何对
该 区域 是 用 来 进 行 Ｐ Ｃ Ｒ扩增 和 Ｐ Ｃ Ｒ分 析 的。
内准 备一 些 样 品核 酸 提 取 时 所 需 的裂 解 液 、 提 取 液
Ｐ Ｅ Ｒ仪放置在这个 区域 。房间保持负压 ， 目的是 防
止核 酸 溢 出 。在 该 区域 人员 一 定要 一直 穿戴 工 作服 和手 套 ， 在离 开房 间前脱 去 ， 防止 扩增 子 污染 其 它地 点 。所 有 用 于扩 增和 产 品检测 的设 备要 指 定用 于这 个 房 间 。Ｐ Ｃ Ｒ分 析 ］ 二 作 也 设 置 在 该 区域 ， 例如 ： 酶 切、 测序 、 克 隆等 ， 但 实 验 室 应 尽 可 能 把 这 些 活 动 分
摘
１ ０ ０ ０ ６ ２ ； ２ ．北京 出入境检验检疫局检验检疫技术 中心 ， 北京
要： 本 文介绍 了对转 基因实验室环境 污染 的控制 和预防的指导方法 ， 从 实验室 的设计 分 区和布局 、 设备 与耗材配 置 、
良好操作 规范等角度 阐述 了具体 的预防污染 的方法 ， 可作 为转基因实验室环境 污染控制预 防的指导依据 。
２ ０ １ ４ 年 第 １期
文 章编号 ： １ ０ ０ ５ － ３ ３ ８ ７ （ ２ ０ １ ４ ） ０ １ — ０ ０ ４ ７ — ４ ９
转基 因检测 实验室环 境污染 的控制和 预防
李 宏 郭铮蕾 韩 碉 李 伟 范 斐
ｌ ￣ｒ ｅ ６ ）
（ １ ．中国合格评定 国家认 可中心 ， 北京
品准备区域的人员不得进入试剂准备 区。 Hale Waihona Puke Baidu １ ． ３ 核 酸提 取 区
核酸提取 区是进行样 品核酸提 取 的区域 。该 区域 为负压 ， 目的是 防止 核 酸溢 出造成 污染 。样 品准备 区 又包括从样品 中进行核酸提取 和纯 化 的区域 以及将 核 酸加到包含 Ｐ Ｃ Ｒ主反 应混 合液 管 中的操作 区域 。添 加完样品后 ， Ｐ Ｃ Ｒ管 的盖子要 尽 可能快 地 盖好 。使 用
效 隔离。最理想 的是把 关键 步骤放在 不 同房 间进 行， 但 考 虑 到成 本 的可 行性 ， 可 以把关 键步 骤 通过 房
间 内部 的隔 离划 分 开 。
对转 基 因 样 品 的 Ｐ Ｃ Ｒ 分 析 需 要 至 少 被 分 隔 在
四个 独立 空 间里 进 行 （ 图 １所 示 ） ， 理 想条件下 ， 四
用 于试 验试 剂 的 准 备 。该 区域 为 正 压 ， 目的是
防止 污染 物 质 溢 入 。该 区 域 内部 又 可 分 为 ３个 区 域： 普通 提 取 试 剂 的准 备 区 、 Ｐ Ｃ Ｒ 试 剂 准 备 区 和 Ｐ Ｃ Ｒ 主反应 液 准 备 区 。在 普 通 提 取 试 剂 的 准备 区
个 区域安 放 于不 同房 间 ｌ １ ］ 。 １ ． １ 试 剂准 备 区
Ｐ Ｃ Ｒ板和胶盖时， 阳性对照和含 目 标序列 的样品要与 待测样本分开操作 ， 以避免模板 添加 时造成交叉 污染
重要提示 ： 这 个 房 间 里 的一 切 物 品不 得带 人 试
剂 准备 区 。 １ ． ４ 扩 增 和产 品检 测 区
势， 种植 的国家也不断增多， 但欧盟、 日 本和韩国等国家 和地区对于进 口的食用农产品均要求提 供非转基 因作物
或成分证明 我国也要求含转基 因成分的商品应 明确标
识 。因此 ， 转基因检测工作 的重要 ｌ 生 也 日益突显。 目前 ， 国内外转基 因检测 大多采 用聚合 酶链式 反应 （ Ｐ Ｃ Ｒ） 技
关键 词 ： 转 基因 ； 实验室环境污 染 ； 控制 ； 预 防
０ 引 言
近年来 ． 全球 转 基 因作 物 种植 面积 呈逐 年上 升趋
所有 Ｐ Ｃ Ｒ所需 试 剂 的混合 ） 添加到 Ｐ Ｃ Ｒ管 的操作 。 重要 提示 ： 不 能 将其 它房 间 的材 料 （ 包括扩增 、 模 板 和 目标 核酸 或 阳性 对 照 、 供应 品 、 或设 备 ） 带 进 试 剂 准备 区。
转基 因 则 实验室环境污染进行控制和预防。
备区内还 可设立一个 专用 的封 闭区或房 间用于样
品 的 接 收 和储 存 。这 个 房 间 可 以放 置 冰 箱 用 于 样 品储 存 ， 应 该 和 样 品 准 备 区其 它 区 域 隔 离 开 。样
１ 实验 室的设计分 区和布局
首先 ， 在 设 计建 造 实验 室 时 ， 不 同 区域 应 进行 有
一
等； Ｐ Ｃ Ｒ试剂准备 区用 于 Ｐ Ｃ Ｒ试剂的制备 和保存 ． 例 如 准备 引物 、 探针等 Ｐ Ｃ Ｒ试 剂 。为 了 防止 交 叉 污
染， 避 免 反 复冷 冻 和解 冻 ， 试 剂存 贮 溶液 应 该被 平 均 为 小 的工 作 体 积 ， 储 存 在 这 个 房 间 以备 后 用 ： Ｐ Ｃ Ｒ 主 反 应 液准 备 区 将 进 行 主 反 应 混 合 液 （ 除 了样 品 。
４７ —
隔 在不 同 区域 或 不 同 房 间 。 以降 低 扩 增 产 物 的污 染 风 险 。如 果没 有 条 件 在该 区域 设 立 负 压 ， 此 区域 必 须 建立 排 风装 置 。 重要 提 示 ： 这个 房 间 的物 品不 能 带 人 样 品 准备 区或试 剂准 备 区 。
品 进行 分 样 ， 将样品进行研磨 、 粉碎 、 匀 浆 的区域。 由于在 这 些 粉 碎 、 研 磨 和 匀 浆 处 理 过 程 中 会 产 生 气溶 胶 ， 因此 ， 存 在 阳性 样 品污 染 后 续 操 作 的 可 能 性 。该 区域 与 后 面 的 区 域 应 严 格 隔 离 ， 应 放 在 与
后 面 的 三个 区域 隔 开 的 独 立 的 房 间 中 。在 样 品准
术， 其 中包括普通 Ｐ Ｃ Ｒ和实时荧光 Ｐ Ｃ Ｒ。Ｐ Ｃ Ｒ检测方法 是极其 敏感的， 实验室环境污染存在 巨大的风 险 ， 污染来
源一般为样品的交叉污染、 气溶胶、 灰尘等。如何控制转 基 因检测实验室环境污染至关重要 。本 文将 阐述如何对
该 区域 是 用 来 进 行 Ｐ Ｃ Ｒ扩增 和 Ｐ Ｃ Ｒ分 析 的。
内准 备一 些 样 品核 酸 提 取 时 所 需 的裂 解 液 、 提 取 液
Ｐ Ｅ Ｒ仪放置在这个 区域 。房间保持负压 ， 目的是 防
止核 酸 溢 出 。在 该 区域 人员 一 定要 一直 穿戴 工 作服 和手 套 ， 在离 开房 间前脱 去 ， 防止 扩增 子 污染 其 它地 点 。所 有 用 于扩 增和 产 品检测 的设 备要 指 定用 于这 个 房 间 。Ｐ Ｃ Ｒ分 析 ］ 二 作 也 设 置 在 该 区域 ， 例如 ： 酶 切、 测序 、 克 隆等 ， 但 实 验 室 应 尽 可 能 把 这 些 活 动 分
摘
１ ０ ０ ０ ６ ２ ； ２ ．北京 出入境检验检疫局检验检疫技术 中心 ， 北京
要： 本 文介绍 了对转 基因实验室环境 污染 的控制 和预防的指导方法 ， 从 实验室 的设计 分 区和布局 、 设备 与耗材配 置 、
良好操作 规范等角度 阐述 了具体 的预防污染 的方法 ， 可作 为转基因实验室环境 污染控制预 防的指导依据 。
２ ０ １ ４ 年 第 １期
文 章编号 ： １ ０ ０ ５ － ３ ３ ８ ７ （ ２ ０ １ ４ ） ０ １ — ０ ０ ４ ７ — ４ ９
转基 因检测 实验室环 境污染 的控制和 预防
李 宏 郭铮蕾 韩 碉 李 伟 范 斐
ｌ ￣ｒ ｅ ６ ）
（ １ ．中国合格评定 国家认 可中心 ， 北京
品准备区域的人员不得进入试剂准备 区。 Hale Waihona Puke Baidu １ ． ３ 核 酸提 取 区
核酸提取 区是进行样 品核酸提 取 的区域 。该 区域 为负压 ， 目的是 防止 核 酸溢 出造成 污染 。样 品准备 区 又包括从样品 中进行核酸提取 和纯 化 的区域 以及将 核 酸加到包含 Ｐ Ｃ Ｒ主反 应混 合液 管 中的操作 区域 。添 加完样品后 ， Ｐ Ｃ Ｒ管 的盖子要 尽 可能快 地 盖好 。使 用
效 隔离。最理想 的是把 关键 步骤放在 不 同房 间进 行， 但 考 虑 到成 本 的可 行性 ， 可 以把关 键步 骤 通过 房
间 内部 的隔 离划 分 开 。
对转 基 因 样 品 的 Ｐ Ｃ Ｒ 分 析 需 要 至 少 被 分 隔 在
四个 独立 空 间里 进 行 （ 图 １所 示 ） ， 理 想条件下 ， 四
用 于试 验试 剂 的 准 备 。该 区域 为 正 压 ， 目的是
防止 污染 物 质 溢 入 。该 区 域 内部 又 可 分 为 ３个 区 域： 普通 提 取 试 剂 的准 备 区 、 Ｐ Ｃ Ｒ 试 剂 准 备 区 和 Ｐ Ｃ Ｒ 主反应 液 准 备 区 。在 普 通 提 取 试 剂 的 准备 区
个 区域安 放 于不 同房 间 ｌ １ ］ 。 １ ． １ 试 剂准 备 区
Ｐ Ｃ Ｒ板和胶盖时， 阳性对照和含 目 标序列 的样品要与 待测样本分开操作 ， 以避免模板 添加 时造成交叉 污染
重要提示 ： 这 个 房 间 里 的一 切 物 品不 得带 人 试
剂 准备 区 。 １ ． ４ 扩 增 和产 品检 测 区