家畜组织胚胎学 1绪论_PPT幻灯片
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第一章 绪论
第一节 家畜组织胚胎学的研究内容 和意义
组织胚胎学包括组织学和胚胎学两部分。
组织学（histology）是研究动物体微细结构及 功能的科学。
动物体是由各种器官系统构成的，每个器官都 包括几种不同的组织，而每一种组织又是由细 胞和细胞间质构成的。
因此，组织学的研究内容包括细胞、基本组织 和器官组织三个部分。
苏木精是碱性染液，可以使细胞核内的染色质 和细胞质中的核糖体等成分染成蓝紫色，故这 些成分被说成是嗜碱性着色的。伊红是酸性染 料，可使多数细胞的细胞质染成粉红色，这些 细胞质被称为嗜酸性的。对碱性和酸性染料亲 和力都不强的结构，称为嗜中性的。
染色方法
苏木精
嗜碱性结构： 细胞核 粗面内质网 游离核糖体等
多糖
HIO4 醛
Shiff试剂 紫红色沉淀物
（氧化）
（碱性品红）
组织化学术
PAS反应，显示小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒
组织化学术
⒉ 免疫组织化学术（immunocytochemistry)
利用组织化学技术的原理，再结合免疫学方 法，则为免疫细胞化学术。主要的检测对象为肽 和蛋白质。
免疫组织化学， 显示胰岛B细胞
HE染色
伊红
嗜酸性结构： 细胞质基质 溶酶体、线粒 体等细胞器 胶原纤维等
染色方法
特殊染色
HE染色法以外的所有染色法，通常是为了 显示某些用HE染色法显示不出的细胞和结 构。如：
苏丹法——显示脂肪 镀银法——显示神经细胞、嗜银颗粒 铁苏木素法——显示心肌闰盘 马氏三色法——显示胰岛细胞 甲苯胺蓝法——显示糖胺多糖
透射电镜（TEM）的分辨率已达到0.2nm左右， 可放大几万到几十万倍。
其工作原理是，电子束透过样品后，投射到荧 光屏上，形成物像。由于电子易散射和被物体 吸收，所以必须制备超薄切片（90-100nm）。
电镜样品的制备过程：
取小材料块（1mm3以内）用戊二醛和锇酸双重 固定→环氧树脂包埋→超薄切片机切片→铅铀 重金属电子染色→电镜观察。
镀银染色，显示大脑皮质神经元
氯化金染色，显示运动终板
Hemalum染色，显示心肌纤维及闰盘
2、组织化学技术
组织化学 ( histochemistry ) ： 通过化学或物理反应原理显示组织或细
胞内化学成分，通常是使其形成有色终末 产物，以便在镜下观察，可进行定位和定 量。
组织化学术
1．一般组织化学术
来自百度文库
新的研究方法
放射自显影术 图像分析术 流式细胞术
三、显微镜
光学显微镜（light microscope LM） 电子显微镜 （electron microscope EM）
一．光学显微镜
光镜
普通光学显微镜（light microscope）的 分辨率为0.2µm，可放大1000倍左右，能 观察组织和细胞的一般结构。
光学显微镜的分类
1、生物显微镜 2、荧光显微镜 3、相差显微镜 4、暗视野显微镜 5、偏光显微镜 6、激光共聚焦显微镜
光镜
光镜
光镜
光镜
大鼠附睾上皮细胞微丝（肌动蛋白）及细胞核
电镜
二 电子显微镜技术
常用的电镜有透射电镜和扫描电镜两种。 与光镜比较，电镜的基本原理是以电子束 代替光线，以电磁透镜代替光学透镜。
②脱水与透明：为使石蜡浸入组织内，把 固定好的材料用乙醇逐级（70%-100%） 脱水。用二甲苯或乙醚等石蜡溶剂使组 织浸透，便于浸蜡。
③浸蜡与包埋：把组织放入融化（58-60℃） 的石蜡中，进行浸透和包埋成蜡块，目的 是使石蜡进入细胞间隙和细胞内，以增加 组织的硬度，便于切片。
④切片与贴片：将蜡块用切片机切成5-10µm 厚的组织切片，并铺展粘到载玻片上。
组织化学术
⒊ 原位杂交术（in situ hybridization)
为核酸（DNA和RNA）组织化学术。 用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与细 胞内待测的核酸结合（杂交），从而在原位显示 该核酸。
组织化学术
原位杂交，显示脐静脉内皮细胞的心房钠尿肽阳性
二、其它研究方法
活体组织研究法
细胞培养术 细胞融合 组织工程术 细胞电泳
⑤染色与封固：把粘好的切片脱蜡后，用适 当的染料进行染色。染色后，再经脱水和 透明，最后把组织用树胶和盖片封片。
除了石蜡切片外，血液可以制成血涂片，疏 松结缔组织和肠系膜等薄层组织可制成铺 片，骨组织可制成磨片,然后固定和染色。
染色方法
最常用的染色方法是苏木精（hematoxylin） 和伊红（eosin）染色的染色方法，简称H.E. 染色。
被金属盐所染的部位，因透过的电子束少而在 荧光屏上显得暗，称为电子密度高，反之则称 为电子密度低。
电镜
透 射 电 镜
电镜
电镜
•扫描电镜（SEM）
是用极细的电子束在样品表面进行扫描并 用特定的探测器收集所发生的二次电子，形成 电信号传送到显像管，在荧光屏上显现出物体 表面的立体图象。
•扫描电镜的样品制备方法：
是利用化学试剂与组织内的某些物质进行 化学反应，在局部形成能够在显微镜下观察 到的沉淀物。例如，过碘酸雪夫氏反应 （periodic acid chiff’s reaction, PAS反 应）的基本原理是通过过碘酸的氧化作用， 使多糖生成醛基，后者与雪夫氏试剂中的无 色碱性品红反应，在反应部位形成紫红色沉 淀，从而证明细胞内含有糖原或粘多糖成分。
分辨率是指能够分辨两颗粒之间的最小 距离。
光镜
显微镜下常用的长度单位
在光镜下所见的组织和细胞的结构叫做一般微 细结构，而在电镜下所见的结构则称之为超微 结构。在光镜和电镜下进行观察时，常用的计 量单位有： 1μm（微米，micrometer）= 1/1000mm（毫米， millimeter） 1nm（纳米，nanometer）= 1/1000μm 1pm（皮米）＝ 1/1000nm
胚胎学（embryology）是研究动物个体胚 胎发育的科学。
胚胎学的研究内容包括配子发生、受精、 卵裂、原肠胚和神经胚形成、胎膜和胎盘 以及器官发生等。
一、固定组织研究法
1.组织学制片技术
一般是先把组织制成薄片，最常用的是石蜡切片，其制 备方法是：
①取材与固定：把新鲜组织放到甲醛溶液 等固定液中，使蛋白质等成分迅速凝固， 尽可能保持其活体时的结构状态。
第一节 家畜组织胚胎学的研究内容 和意义
组织胚胎学包括组织学和胚胎学两部分。
组织学（histology）是研究动物体微细结构及 功能的科学。
动物体是由各种器官系统构成的，每个器官都 包括几种不同的组织，而每一种组织又是由细 胞和细胞间质构成的。
因此，组织学的研究内容包括细胞、基本组织 和器官组织三个部分。
苏木精是碱性染液，可以使细胞核内的染色质 和细胞质中的核糖体等成分染成蓝紫色，故这 些成分被说成是嗜碱性着色的。伊红是酸性染 料，可使多数细胞的细胞质染成粉红色，这些 细胞质被称为嗜酸性的。对碱性和酸性染料亲 和力都不强的结构，称为嗜中性的。
染色方法
苏木精
嗜碱性结构： 细胞核 粗面内质网 游离核糖体等
多糖
HIO4 醛
Shiff试剂 紫红色沉淀物
（氧化）
（碱性品红）
组织化学术
PAS反应，显示小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒
组织化学术
⒉ 免疫组织化学术（immunocytochemistry)
利用组织化学技术的原理，再结合免疫学方 法，则为免疫细胞化学术。主要的检测对象为肽 和蛋白质。
免疫组织化学， 显示胰岛B细胞
HE染色
伊红
嗜酸性结构： 细胞质基质 溶酶体、线粒 体等细胞器 胶原纤维等
染色方法
特殊染色
HE染色法以外的所有染色法，通常是为了 显示某些用HE染色法显示不出的细胞和结 构。如：
苏丹法——显示脂肪 镀银法——显示神经细胞、嗜银颗粒 铁苏木素法——显示心肌闰盘 马氏三色法——显示胰岛细胞 甲苯胺蓝法——显示糖胺多糖
透射电镜（TEM）的分辨率已达到0.2nm左右， 可放大几万到几十万倍。
其工作原理是，电子束透过样品后，投射到荧 光屏上，形成物像。由于电子易散射和被物体 吸收，所以必须制备超薄切片（90-100nm）。
电镜样品的制备过程：
取小材料块（1mm3以内）用戊二醛和锇酸双重 固定→环氧树脂包埋→超薄切片机切片→铅铀 重金属电子染色→电镜观察。
镀银染色，显示大脑皮质神经元
氯化金染色，显示运动终板
Hemalum染色，显示心肌纤维及闰盘
2、组织化学技术
组织化学 ( histochemistry ) ： 通过化学或物理反应原理显示组织或细
胞内化学成分，通常是使其形成有色终末 产物，以便在镜下观察，可进行定位和定 量。
组织化学术
1．一般组织化学术
来自百度文库
新的研究方法
放射自显影术 图像分析术 流式细胞术
三、显微镜
光学显微镜（light microscope LM） 电子显微镜 （electron microscope EM）
一．光学显微镜
光镜
普通光学显微镜（light microscope）的 分辨率为0.2µm，可放大1000倍左右，能 观察组织和细胞的一般结构。
光学显微镜的分类
1、生物显微镜 2、荧光显微镜 3、相差显微镜 4、暗视野显微镜 5、偏光显微镜 6、激光共聚焦显微镜
光镜
光镜
光镜
光镜
大鼠附睾上皮细胞微丝（肌动蛋白）及细胞核
电镜
二 电子显微镜技术
常用的电镜有透射电镜和扫描电镜两种。 与光镜比较，电镜的基本原理是以电子束 代替光线，以电磁透镜代替光学透镜。
②脱水与透明：为使石蜡浸入组织内，把 固定好的材料用乙醇逐级（70%-100%） 脱水。用二甲苯或乙醚等石蜡溶剂使组 织浸透，便于浸蜡。
③浸蜡与包埋：把组织放入融化（58-60℃） 的石蜡中，进行浸透和包埋成蜡块，目的 是使石蜡进入细胞间隙和细胞内，以增加 组织的硬度，便于切片。
④切片与贴片：将蜡块用切片机切成5-10µm 厚的组织切片，并铺展粘到载玻片上。
组织化学术
⒊ 原位杂交术（in situ hybridization)
为核酸（DNA和RNA）组织化学术。 用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针，与细 胞内待测的核酸结合（杂交），从而在原位显示 该核酸。
组织化学术
原位杂交，显示脐静脉内皮细胞的心房钠尿肽阳性
二、其它研究方法
活体组织研究法
细胞培养术 细胞融合 组织工程术 细胞电泳
⑤染色与封固：把粘好的切片脱蜡后，用适 当的染料进行染色。染色后，再经脱水和 透明，最后把组织用树胶和盖片封片。
除了石蜡切片外，血液可以制成血涂片，疏 松结缔组织和肠系膜等薄层组织可制成铺 片，骨组织可制成磨片,然后固定和染色。
染色方法
最常用的染色方法是苏木精（hematoxylin） 和伊红（eosin）染色的染色方法，简称H.E. 染色。
被金属盐所染的部位，因透过的电子束少而在 荧光屏上显得暗，称为电子密度高，反之则称 为电子密度低。
电镜
透 射 电 镜
电镜
电镜
•扫描电镜（SEM）
是用极细的电子束在样品表面进行扫描并 用特定的探测器收集所发生的二次电子，形成 电信号传送到显像管，在荧光屏上显现出物体 表面的立体图象。
•扫描电镜的样品制备方法：
是利用化学试剂与组织内的某些物质进行 化学反应，在局部形成能够在显微镜下观察 到的沉淀物。例如，过碘酸雪夫氏反应 （periodic acid chiff’s reaction, PAS反 应）的基本原理是通过过碘酸的氧化作用， 使多糖生成醛基，后者与雪夫氏试剂中的无 色碱性品红反应，在反应部位形成紫红色沉 淀，从而证明细胞内含有糖原或粘多糖成分。
分辨率是指能够分辨两颗粒之间的最小 距离。
光镜
显微镜下常用的长度单位
在光镜下所见的组织和细胞的结构叫做一般微 细结构，而在电镜下所见的结构则称之为超微 结构。在光镜和电镜下进行观察时，常用的计 量单位有： 1μm（微米，micrometer）= 1/1000mm（毫米， millimeter） 1nm（纳米，nanometer）= 1/1000μm 1pm（皮米）＝ 1/1000nm
胚胎学（embryology）是研究动物个体胚 胎发育的科学。
胚胎学的研究内容包括配子发生、受精、 卵裂、原肠胚和神经胚形成、胎膜和胎盘 以及器官发生等。
一、固定组织研究法
1.组织学制片技术
一般是先把组织制成薄片，最常用的是石蜡切片，其制 备方法是：
①取材与固定：把新鲜组织放到甲醛溶液 等固定液中，使蛋白质等成分迅速凝固， 尽可能保持其活体时的结构状态。