核酸的理化性质及其应用.

• 退火（annealing）：热变性的DNA经
缓慢冷却后的复性。
• 减色效应：复性后，DNA的OD260又降低
到原来的水平。
• 核酸分子杂交
(hybridization)：
热变性的DNA 在复性过程中，具 有碱基序列部分互 补的不同的DNA之 间或DNA与RNA之 间形成杂化双链的 现象。
分开成单链。
•
变性因素：
加热、过量酸或碱。
• 增色效应：DNA变性使溶液OD260增高。
• 解链温度(Tm)：
DNA的热变性 过程中，紫外光吸 收值达到最大值的 50%时的温度。 Tm值与DNA 分子中的G+C含量 呈正比。
三、DNA的复性与分子杂交
• 复性：变性DNA在适当条件下，两条互补
链又重新恢复天然的双螺旋构象。
第五节
核酸的理化性质及其应用
一、一般理化性质
• 酸性 • DNA粘度极大，RNA粘度比DNA小
得多
• 在260nm波长有紫外吸收峰，是由
碱基的共轭双键决定的。这一特性常 用作核酸的定性、定量分析。
wenku.baidu.com 二、DNA的变性
•
概念：在某些理化因
素作用下，DNA分子互 补碱基对之间的氢键断 裂，使DNA双螺旋结构