怎样证明酶是蛋白质

怎样证明酶是蛋白质？

1、酶被酸、碱和蛋白酶水解后的产物是AA；

2、酶具一切蛋白质所具有的颜色反应；

3、一切能使蛋白质变性的因素都可使酶变性失活；

4、酶同样具有蛋白质所具有的大分子性质

◆酶反应速度表示方法

◆ 1.单位时间内底物浓度的减少量

◆ 2.单位时间内产物浓度的增加量

◆一般用反应初速度表示

◆初速度：底物开始反应后，很短一段时间内的反应速度

酶原激活的本质:是切断酶原分子中特异肽键或去除部分肽段后有利于酶活性中心的形成。

酶原激活有重要的生理意义，保护自身组织细胞不被酶水解消化。

什么是酶原激活？它有何生物意义？ (2010年考题8分)

锁钥学说： Emil Fischer提出锁钥学说,认为底物结构必须与酶活性部位的结构互补就像锁和钥匙一样,形成酶-底物复合物.将酶的活性中心比喻作锁孔，底物分子象钥匙，底物能专一性地插入到酶的活性中心（绝对专一性）。

Crosland提出了诱导契合学说,认为当底物与酶接近时，底物分子可以诱导酶活性中心的构象发生改变，使之成为能与底物分子密切结合的构象.

某些酶分子的催化基团可以通过共价键与底物分子结合形成不稳定的共价中间产物，这个中间产物极易变成过渡态，因而大大降低了活化能，使反应速度大为提高。这种催化称为共价催化

亲电子催化是指酶活性中心上的亲电子催化基团从底物分子的亲核原子上争夺一对电子，形成共价键，从而产生不稳定的共价中间物。米氏方程

m —米氏常数

V max —最大反应速度

(1)当v=Vmax/2时，Km=[S]（ Km的单位为浓度单位）

Km等于酶促反应速度达最大值一半时的底物浓度。

(2)是酶在一定条件下的特征物理常数，通过测定Km的数值，可鉴别酶。在一定条件下，某种酶的Km值是恒定的，因而可以通过测定不同酶（特别是一组同工酶）的Km值，来判断是否为不同的酶。

(3)可近似表示酶和底物亲合力，Km愈小，E对S的亲合力愈大，Km愈大，E对S的亲合力愈小。

(4)可用于判断反应级数：当[S]<0.01Km时，反应为一级反应；当[S]>100Km时，ν=Vmax，反应为零级反应.

（5） Km可用来判断酶的最适底物：当酶有几种不同的底物存在时，通过测定酶在不同底物存在时的Km值，Km值最小者，即为该酶的最适底物。

竞争性与非竞争性抑制剂对米氏酶Km和Vmax有何影响? (2011年考题)

◆竞争性抑制的特点：

⑴竞争性抑制剂往往是酶的底物类似物或反应产物；

⑵抑制剂与酶的结合部位与底物与酶的结合部位相同；

⑶抑制剂浓度越大，则抑制作用越大；但增加底物浓度可使抑制程度减小；

⑷动力学参数：Km值增大，Vm值不变。

非竞争性抑制的特点：

⑴非竞争性抑制剂的化学结构不与底物的分子结构类似；

⑵底物和抑制剂分别独立地与酶的不同部位相结合；

⑶抑制剂对酶与底物的结合无影响，故底物浓度的改变对抑制程度无影响；

⑷动力学参数：Km值不变，Vm值降低

活性中心全酶酶原活力单位比活力米氏方程Km 诱导契合变构效应核糖酶

辅酶和辅基固定化酶酶工程

a. 两条途径运行方向相反

β－氧化：每经历一次脱氢、水化、脱氢、硫解的循环反应，脂肪酸减少两个碳片段，生成一分子乙酰CoA。

从头合成：每经历一次缩合、还原、脱水、还原的循环反应，脂肪酸延长两个碳片段。

b. 两条途径的中间产物基本相同

酮体必需脂肪酸脂肪酸的β-氧化

1）循环反应在线粒体中进行，为不可逆反应。（2）每完成一次循环，氧化分解掉一分子乙酰CoA，可生成10分子ATP。

（3）循环中的各酸既不能通过此循环反应生成，也不被此循环反应所消耗。但是各酸在有机体中不断参与其它物质的形成。

（4）三羧酸循环中有，消耗2分子水，两次脱羧反应，生成两分子CO2。循环中有四次脱氢反应，生成三分子NADH和一分子FADH2

（5）循环中有一次底物水平磷酸化，生成一分子GTP。

（6）三羧酸循环的关键酶是柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶系。