抗核抗体检测及临床意义课件

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抗dsDNA检测方法
• 酶联免疫吸附法（ELISA）: ≥100IU/ml 优点：敏感性最高 缺点：过于敏感，同时可能检测到ssDNA抗体和低亲和力dsDNA抗体,而 这两种致病力均不强
• 放射免疫法(Farr): ≥20% 优点：对高亲和度DNA抗体的检测优于CL-IIF 缺点：具有放射性，对技术人员身体造成一定影响
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•基本概念 •ANA荧光核型 •ANAs中的常见抗体
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抗核抗体
• 自身抗体：指抗自身组织、器官、细胞及其成分的抗体 • ANA：指抗细胞核成分（DNA，RNA，蛋白质和酶）的抗体。
ANA存在一个谱。
• ANA新概念：抗核酸(Nucleic acid)和核蛋白 (Nucleoprotein)抗体总称
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抗核抗体谱（ANAs）
抗核不溶成分 抗DNA抗体
抗核小体抗体
dsDNA ssDNA
ANAs
抗核可溶成分 （抗ENA）
抗组蛋白 H1,H2A, H2B, H3,H4 抗Sm,U1RNP,SSA,SSB 抗Scl-70,Jo-1,PM-1 抗rRNP,PCNA…….
抗染色体DNA蛋白
• 蛋白印迹法（WB） 缺点： dsDNA抗原在纯化包备过程中可变性解链，变成ssDNA,导致假阳性结果
• 不同方法检测SLE患者抗dsDNA抗体的结果： everything is possible
• 至少用两种方法做（抗报核抗告体检结测及果临床时意义注课件明方法学）,互为补充。
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风湿免疫性疾病诊断方法
• 症状、体征
• 自身抗体 • 影像学检查 • 病理
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风湿免疫性疾病相关自身抗体
• 抗核抗体谱（ANAs） • 类风湿关节炎相关抗体(RF, 抗CCP等) • 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） • 抗自身免疫性肌炎谱 • 自身免疫性肝病相关抗体谱 • 抗磷脂抗体谱
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抗组蛋白抗体（AHA） （酶联免疫吸附法X2SD)
• 可出现于多种结缔组织病，不具有诊断特异性
• SLE ：50% 活动期SLE 可达90.2% 与LN相关，与SLE疾病活动性存在一定意义的相关性
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抗核抗体谱检测的意义
• 有助于弥漫性结缔组织病的分类和诊断 抗Sm抗体是SLE的标记抗体； 抗Scl-70抗体是SSc的标记抗体； 抗Jo-1抗体是PM/DM的标记抗体；
• 观察疾病活动度和治疗反应 抗dsDNA抗体
• 研究发病机理 抗核小体抗体、抗dsDNA抗体
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ANA荧光核型小结
• 均质型（H）：像大饼，SLE相关 • 核膜型（M)： 像圈圈，SLE相关 • 斑点型（S）：像藕片，抗ENA • 核仁型（N）：像纽扣，SD相关 • 着丝点型（ACA）：像满天星，抗ACA • 胞浆型（C）：像空心大饼,SLE PM/DM PBC相关 • 混合型：稀释后检测有助于区分
• 某些核抗原成分在核仁和 胞浆内比核质内更丰富 (如SSA/RO,Jo-1,rRNP等)
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ANA检测方法-IIF法
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ANA滴度 ANA核型
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ANA滴度的意义
• 结缔组织病的粗筛（>1:160） • 阳性标本还需进一步识别 • 感染、肿瘤及5%正常人可出现低滴度阳性 • ANA阴性基本可以除外SLE • ANA滴度与疾病活动性无明确相关性
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斑 点 型 (S)
• 与抗ENA成分有关 抗Sm 抗RNP 抗SS-A 抗SS-B
• 出现在SLE、MCTD、pSS、SSc、PM/DM等
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斑 点 型 (S)
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核 仁 型 (N)
• 与抗核仁蛋白有关 抗Scl-70 抗RNA多聚酶I 抗PM-Scl
抗着丝点抗体（ACA)
抗核仁抗体
抗5sRNA
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抗dsDNA检测方法
• 以短膜虫或马疫锥虫为底物的间接免疫荧光法(IIF) ：≥1:5
• 短膜虫或马疫锥虫的动基体 内含有天然纯dsDNA，未经 人工处理，不含组蛋白与 ssDNA，抗原性纯一特异。
• 优点：特异性好
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• 与抗胞浆成分有关 • 抗核糖体P蛋白（rRNP）：出现在SLE中 • 抗合成酶：Jo-1、PL-12、PL-7、OJ、EJ • 抗信号识别颗粒（SRP) • 抗线粒体：出现在PBC中 • 抗高尔基体 • 抗溶酶体 • 等等
见于 PM/DM
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胞 浆 型 (C)
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• 出现在SSc中
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Hale Waihona Puke Baidu
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核 仁 型 (N)
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着 丝 点 型(ACA)
• 与抗着丝点染色质有关 存在于有丝分裂期
• 出现在SSc、CREST综合征等中
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着 丝 点 型(ACA)
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胞 浆 型 (C)
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均 质 型 (H)
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核 膜 型 (M)
• 主要与抗dsDNA有关 与抗原底物片固定方法和备制过程有关 出现在SLE中
• 部分与抗核包膜蛋白有关 抗板层素 抗gp210 出现在PBC中
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核 膜 型 (M)
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荧光显微镜下ANA的染色型别
• 均质型（H） • 核膜型（M) • 斑点型（S） • 核仁型（N） • 着丝点型（ACA） • 胞浆型（C） • 混合型
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均 质 型 (H)
• 抗组蛋白 • 抗ds/ssDNA • 抗核小体 • 主要出现在SLE中
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抗dsDNA抗体临床意义
• SLE 的血清特异性抗体 • 多有致病性（IgG型），与亲和力（高）有关 • 与LN与SLE疾病活动性相关，活动期达90％
可用于SLE 疾病活动期判断＆药物疗效观察 • 与SLE急性皮疹、血管炎、浆膜腔炎、白细胞减少等
有关
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