实验动物手术及麻醉
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实验动物手术及麻醉
一、概论
实验操作过程为减轻动物的疼痛及紧迫,常需给予止痛或麻醉。动物麻醉属医疗行为,因此不论是实验前对麻醉药物与方式的选择,或麻醉前中后对动物生理心理状态的评估,均需兽医师专业知识的建议。动物的麻醉必须兼顾:(1)不影响实验结果;(2)临床实际可行;(3)避免动物承受非必要的痛苦。适当的麻醉不但能减轻动物的痛苦,也能减少研究人员承受过多的精神压力。
1. 名词解释:
♦Analgesia:止痛,对疼痛失去敏感性。
♦Tranquillization:精神安定,动物呈现一种行为改变状态,精神与动作迟缓,松懈,对周围环境的反应冷淡、对小疼痛常不在意。
♦Sedation:镇静,轻微程度的中枢神经抑制状态,保持醒觉,但安静。
♦Anesthesia:麻醉,以药物或其他方式抑制动物局部(周边性)或全体(中枢性)神经组织的活性,使动物部分或整个身体完全失去感觉作用。
♦Local anesthesia:局部麻醉。
♦General anesthesia:全身麻醉。完全无知觉与感觉(中枢性)。
♦Surgical anesthesia:外科手术麻醉。完全无知觉与感觉,并有充分的肌肉松弛和痛感消失。
2. 手术分类
实验动物的手术可分为存活手术(Survival surgery)和不存活手术(Nonsurvival surgery)两类,前者指麻醉后或所有手术结束后动物还需生存着,后者指麻醉后或所有手术结束后动物即给与安乐死。进行存活手术时,不论是剖腹、截肢或注射药物、处
理伤口,皆需严格执行手术部位的剃毛消毒(beta-iodine scrub/alcohol),材料灭菌(autoclave)及无菌操作(surgical glove & aseptic operation)视实验需求动物可在术前注射抗生素以避免感染。如进行不存活手术,虽不需存活手术般严格无菌操作,但至少要行操作部位的剃毛消毒和戴手套。
存活手术依对动物的影响程度区分为Major与Minor。Major survival surgery指任何需将体腔暴露在外或严重影响动物正常身体与生理功能的手术,例如:胸腔手术、关节手术、截肢手术...等;Minor survival surgery则是指不需暴露体腔或者对动物生理影响很小的手术,例如:伤口缝合、安装周边血管的导管……基于人道考量单一动物不可执行重复的Major survival surgery,如有必要需于动物实验申请表内提出详细的说明,取得IACUC同意后才可执行。
二、术前照顾
犬、猫、灵长类与猪在进行麻醉前8至12小时需禁食。而小型啮齿类动物及兔不易发生呕吐,因此一般手术前不需禁食,天竺鼠的唾液分泌较多,需多加注意。任何怀孕或健康不良之动物皆须审慎评估麻醉对动物的影响。手术前也需有急救动物的概念,预先准备Atropine、CaCl2 10%、Dexamethasone、Dopamine、Doxapram、Epinephrineate 等急救药物。
(一) 麻醉前给药
镇静剂(Tranquillizers/Sedatives)、止痛剂(Analgesics)、抗乙酰胆碱(Anticholinergics)等药品统称为麻醉前给药。镇静剂及止痛剂可诱导麻醉平缓进行,降低(或直接跨越)麻醉兴奋期的反应,间接可减少麻醉药品使用量,降低动物死亡率。抗乙酰胆类药品可抑制迷走神经的兴奋,避免手术期间动物呕吐及过度流涎现象。
1.Anticholinergics
*Atropine
抑制呼吸道及唾液腺分泌物,防止心脏受到迷走神经的兴奋所产的心跳徐缓。注意:已有心律不整的动物避免使用。
2.Tranquillizers &Sedatives
*Phenothiazines:Chlorpromazine, Acepromazine, Promazine
抑制脑干及大脑皮质,产生安静和减低运动性作用。注意:因血管扩张而易造成血压降低,高剂量时会有肌肉僵直、震颤等现象。可与解离性麻醉剂(ketamine)共享来降低副作用。
*Butyrophenones:Droperidol, Fluanisone, Azaperone
效果比Penothiazine强。注意:易造成血压降低。
*Benzodiazepines:Diazepam(Valium), Midazolam
控制及预防癫痫,可使用于老年、肥胖动物,它可解除Ketamine引起之痉挛。注意:静脉注射太快时会休克。皮下及肌肉注射效果不佳,且刺激性强。
*Alpha-2-adrenargic agonist tranquillizer:Xylazine(Rompun)
常使用于猫科动物与灵长类,肌肉松弛效果佳。注意:刺激呕吐中枢,会使90%猫呕吐。适合与Ketamine合用。
3.Narcotic analgesics(Opioids)
*Morphine, Pethidine, Buprenorphine, Methadone, Fentanyl
属管制药品,精神性安定镇痛作用。注意:低剂量会引起中枢神经抑制现象,较高剂量会产生兴奋,超高剂量会引起中枢神经过度抑制而死亡。
三、麻醉及手术
(一) 麻醉期监控
1.麻醉分期:
第一期无痛期:开始失去知觉。
第二期兴奋期:呼吸急促,狂乱或喊叫,对外界刺激异常反应。
第三期手术麻醉期:分成四节,最适合进行手术。
第四期休克死亡期:呼吸、心跳几乎停止,1至5分钟内可能死亡。
一般来说麻醉希望越快进入第三期(手术麻醉期)状态,此期的第一、第二节足够大部分手术所需。第三、第四节已是动物接近死亡的高危险期,此时必须暂停手术进行急救,否则一旦进入第四期休克期,动物80%以上会死亡。