西尼罗病毒病诊断技术研究进展

列为全 球 重大 流行 病之 一 。 目前 针 对该 病 的诊 断 方 法有 多种 ， 包括 病 原学 、 血清 学 以及 分 子生 物 学方 法 等， 本 文 就 Ｗ ＮＤ各 种 诊 断方 法 的研 究 进 展 进 行 综 述， 为建 立更 准确 、 特异、 快 速 的诊 断方法 提供 参 考 。
原 检测 试剂 盒 ， 利 用 包 被 特 异 性 抗 体 的这 两 种方 法 的 灵 敏 性 比病 毒 噬
部 分地 区 和美 国的 南 部 、 北 部 及 中部 地 区 。近 年 来
随着该 病在 人 和 动 物 中 的频 繁 暴 发 ， 给 发 病 国 家 和
动物 医学 进展 ， ２ Ｏ １ ４ ， ３ ５ （ ３ ） ： ９ ２ — ９ ７
Ｐｒ ｏ ｇｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｎ Ｖｅ ｔ ｅ ｒ ｉ ｎａ ｒ ｙ Ｍｅ ｄｉ ｃ ｉ ｎ ｅ
西 尼 罗病 毒病 诊 断 技 术 研 究 进 展
郑小龙 ， 朱 来华 ， 王 群 ， 孙 涛 ， 孙 明君 ， 邓 明俊 ， 张 晓 文
故命 名 为 ｗＮＶ。２ Ｏ世纪 ９ ０年代 中期 ， 该 病 呈 地方 性散 发 ， 普遍认 为 其对 人类 和 马 的危 害不 大 ， 但 随着
毒株 的变异 ， 人类 和 马 的感 染 病例 越 来越 多 ， 特 别 是 １ ９ ９ ９年首 次传 人 美 国纽 约 至 ２ ０ ０ ３年 导 致 美 国近 万 人感染 和数百人死 亡， 引起 了 全 球 的普 遍 关 注 ¨ ２ 】 。 本 病 目前 广泛 分 布 于 欧 洲 、 亚洲、 非洲 、 澳大利亚 的
展情 况进 行 综述 ， 包括 病原 学诊 断 、 血 清学诊 断和 分子 生 物 学诊 断 。在 病原 学诊 断 方 面 ， 主要 包括 病毒 分 离
鉴定、 抗 原捕 获 Ｅ Ｉ Ｉ Ｓ Ａ 及基 于膜 的 电化 学生 物传 感 器技 术 等 。在 血 清 学诊 断 方 面 ， 主要 包括 ＥＩ １ Ｓ Ａ方法、
织（ Ｗｏ ｒ ｌ ｄ Ｈｅ ａ ｌ ｔ ｈ Ｏｒ ｇ ａ ｎ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ， Ｗ ＨＯ） 和 世 界 动 物 卫 生组 织 （ Ｏｆ ｆ ｉ ｃ ｅ Ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｄ ｅ ｓ Ｅ ｐ ｉ ｚ ｏ ｏ ｔ ｉ ｅ ｓ ， ＯＩ Ｅ）
斑试验或 Ｒ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ低 ， 但特异性 较高， 而 且 使 用 方
便， 可以在 ２ ０ ｍｉ ｎ内 出具 检 测 结 果 ， 且 不 需 要 精 密
的仪器 。
地 区造 成 了极 大 的 健 康威 胁 和经 济 损 失 ， 已成 为 全
球 关 注的公 共 卫 生 和 兽 医卫 生 问题 ， 被 世 界 卫 生 组
术等 ， 并 对各 种 方法 的前景 和优 缺 点进行 了阐述 ， 为 实际应 用及 新 方法 的建 立提供 参 考 。
关键 词 ： 西尼 罗病 毒病 ； 诊 断技 术 ； 病原 学 ； 血清 学 ； 分 子 生物 学
中图分类号 ： Ｓ ８ ５ ２ ． ６ ５ ９ ． ６ 文献标识码 ： Ａ 文章 编 号 ： ｌ ０ ０ ７ ５ ０ ３ ８ （ ２ ０ ｌ ４ ） ０ ３ — ０ ０ ９ ２ ０ ６
西尼 罗病 毒 （ Ｗｅ ｓ ｔ Ｎｉ ｌ ｅ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ， Ｗ ＮＶ ）属 黄 病
样 品要求 高 ， 且 需 在生 物安 全 Ⅲ级 以 上实 验 室 进行 。 将脑 脊髓 液 、 血 液 或组 织 器 官 等样 品 的上 清 液 接 种 到 Ｖｅ ｒ ｏ 、 Ｒ Ｋ一 １ ３或 ＡＰ ６ １等 细 胞 单 层 ， 每 天 观 察 细
胞病 变 （ ｃ ｙ ｔ ｏ ｐ ａ ｔ ｈ ｉ ｃ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ， Ｃ Ｐ Ｅ） ， 如果 Ｃ Ｐ Ｅ 不 明 显
毒科 黄病 毒 属 中的 Ｂ群 虫 媒病 毒 ， 以蚊 子 为传 播 媒
介， 在 自然界 中 以鸟一 蚊一 鸟 的方 式 传 播 循环 ， 人 和 马
可作 为 其偶 然宿 主［ １ ］ 。１ ９ ３ ７年 。 从 乌 干 达 西 尼 罗地 区一 名 发热 女性 的 血液 样 本 中首 次 分 离 到 该 病 毒 ，
（ 山东出入境检验检疫局 ， 山东青岛 ２ ６ ６ ０ ０ ２ ）
摘 要 ： 西尼 罗病毒 病 （ ＷＮＤ） 是 由西尼 罗病毒 （ ＷＮＶ） 感 染 引起 的 一种人 兽 共 患的急 性传 染病 ， 应 用各
种诊 断技 术 对该病 进行 准 确 、 及 时 的诊 断 是 预 防和 控 制 该 病 的 前 提 。 论 文 就 近 年 来 ｗ ＮＤ 诊 断 技 术 研 究 进
Ｄｉ ｖ ｙ ａ ｓ ｈ ａ Ｓ等 用 制 备 的非 结 构 蛋 白 ＮＳ １的
单 克 隆抗体 和兔 高 免血 清分 别作 为 捕 获抗 体 和 检测
抗 体 建 立 了 抗 原 捕 获 ＥＬ Ｉ Ｓ Ａ（ ａ ｎ ｔ ｉ ｇ ｅ ｎ ｃ ａ ｐ ｔ ｕ ｒ ｅ
Ｅ Ｉ Ｉ Ｓ Ａ，ＡＣ Ｅ ） ， 用 以检 测 感 染 ｗ ＮＶ 的 的 非 结 构 蛋
可 以结 合 间接免 疫 荧 光 方 法 进 行 鉴 定 ， 也 可 以 使 用
分 子生 物学方 法 进行 检测 。利 用 中 和试 验进 行 病 毒 鉴定 时要 特别 注 意 ｗＮＶ 与 日本脑 炎 病 毒有 明显 的 交 叉反 应 。
Ｖｅ ｃ Ｔ ｅ ｓ ｔ ⑧ 和 ＲＡＭＰ 是 两 种 商 业 化 的 ｗ ＮＶ 抗
补体 依 赖性 细胞毒 性反 应 、 基 于微球 的免疫 测定 方 法及 表 面增 强拉 曼散射 等 。在 分 子生物 学诊 断方 面 ， 主要
包括 ＲＴ — Ｐ Ｃ Ｒ 和 ＲＴ — ｎ Ｐ Ｃ Ｒ、 ｒ ｅ ａ ｌ ｔ ｉ ｍｅ Ｒ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ、 实 时快速反 转 录环介 导 恒 温 扩增 及 依 赖核 酸序 列的 扩 增技