实验七饥饿与饱食对肝糖原含量的影响

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三、器材和试剂
1.主要器材：手术盘、剪刀、镊子、天平、研钵、离心机、离心 管、恒温水浴箱、分光光度计、微量进样器、试管及试管架、 白瓷凹皿
2.主要试剂：
（1）蒸馏水
（2）5%三氯乙酸
（3）标准的葡萄糖溶液：0.5ml相当于25ug葡萄糖
（4）95%乙醇
（5）碘试剂：I2 100mg 及KI 200mg溶解于30ml蒸馏水中
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观察对比两 组溶液现象
取0.5ml定 量检测
取2滴于白瓷凹皿中
加入碘试剂1滴
医学ppt 观察、记录两组颜
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色，与蒸馏水比较
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四、操作
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四、操作
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四、操作
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五、实验结果
1.性质：糖原溶液呈乳样光泽，遇碘呈红棕色。
2.定量：
糖原浓度(μg /ml)=Au/As ×Cs× 1/1.11
实验七
饥饿与饱食对肝糖原含量 的影响
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一、实验目的和要求
1.掌握饥饿与饱食对小白鼠肝糖原含量的影响 2.熟悉肝糖原提取鉴定的原理和方法 3.掌握低速常温离心机的使用，了解离心技术
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二、实验原理
肝糖原是由许多葡萄糖分子聚合而成的 物质，是动物机体能够迅速动用的糖储存形 式之一。
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二、实验原理
胰岛素
分解
肝糖原
血 糖原合成 肝（肌）糖原 糖
胰高血糖素
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二、实验原理
提取:用三氯醋酸破坏肝组织的蛋白质和酶，使其 沉淀而保留糖原，再用乙醇将糖原从滤液中沉 淀出来，溶于热水中，即为糖原溶液。
性质:糖原溶液呈乳样光泽，遇碘呈红棕色。
定量:肝糖原在浓硫酸中水解为葡萄糖后，分子内 部脱水缩合成5-羟甲基-α-呋喃甲醛。后者与 蒽酮反应生成蓝色化合物，在620nm波长下有 最大光吸收。
肝糖原含量=糖原浓度×100/0.5×液体体积×10–6
注：1.11是用此法测得葡萄糖含量换算为糖原含 量的系数，即100μg糖原用蒽酮试剂显色相当 于111μg葡萄糖用蒽酮试剂所显的色。
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（6）0.2%蒽酮试剂
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四、操作
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四、操作
0.5g肝脏 断头处死
2ml 5%三氯乙酸
研钵中研为匀浆
小白鼠
3ml 蒸馏水洗涤
离心管
4000rpm 离心3min
上清液转移至另一离心管中
加5ml 95%乙醇，混匀，静止1min， 4000r/min离心5min
沉淀即为初步纯化糖原。加2ml H2O 溶解，吹打混匀，即为肝糖原提取液