免疫学检测中的干扰因素
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判断嗜靶抗原的自身抗体对检测的负干 扰，因紧密结合患者的疾病诊断、病史、其 他实验检查的结果综合分析。如甲亢、甲低、 I型糖尿病等。
干扰因素和对策- 自身抗 体
等人采用针对中心稳定区域抗原位点的 捕获和检测抗体，开发了新的检测方法，有利 于具有自身抗体等干扰物质的标本。采用新方 法和目前一商品化试剂盒共检测541份胸痛患 者的血清，其中13.5%的标本两种方法检测均 阳性，14.2 %的标本仅采用新方法检测阳性 。 上述结果说明心梗患者存在自身抗体绝非特 例。
2002;48(11):2008~2016
的干扰－对策
捕获抗体用F(`)2替代完整的 标本用连有热变性（63℃，10 ）的 固相吸附剂（公司）处理（将 热变性加入到标本稀释液或血清中同样 有效），4℃过夜离心后在检测； 检测抗原时，可以用终浓度0.1 2-巯 基乙醇(2- )等加入到标本稀释液或标本 中，使（型）降解。
干扰因素和对策- 类风湿因子
收集10份31～＞1000的患者血清，在美 国和欧洲66各临床实验室进行74个项目的免 疫竞争法或免疫夹心法检测，仪器和试剂均 配套。3445个结果中8.7％为假阳性。错误高 值结果中的21％（所有结果的1.8％）引起了 临床的错误诊断，在使用吸附剂后再检测， 错误结果得到纠正。39％的假阳性结果也可 在使用吸附剂后降低。
随着基础免疫学研究的深入和现代免 疫学理论的建立，使大量免疫学检测技术 被不断地创新、发明；在临床疾病诊治的 应用中也不断地推陈出新。目前应用免疫 学原理检测的检验项目占到三级综合医院 检验科全部检验项目的1／4，医疗收入约 占1／3。这就要求检验人员不断掌握最新 的临床免疫学知识和各种新的检验方法， 了解检验项目的基本原理。
2005;51(5):848-55
嗜靶抗原自身抗体的干扰－对策
为避免以上情况出现，解决的办法是： 测定前标本需用理化方法将免疫复合物解离 后再测定。解离液组成：
干扰因素和对策- 嗜异性抗体
将11261份血清标本使用荧光时间分辨免 疫分析系统（公司，二步法、双位点）检测， 将缓冲液中加入小牛 约210个病人、 3.3~4.7%的标本出现假性升高；加入15热处 理小鼠（33 ）（）可将干扰降为0.86%；同 浓度天然小鼠无效；去除捕获抗体或标记抗 体的段也可将干扰降至0.1%。
ห้องสมุดไป่ตู้
免疫学检测- 干扰因素
标本自身及前处理所造成的干扰因素 －类风湿因子（） －嗜异性抗体 －自身抗体 －补体 －纤维蛋白 －溶血或黄疸 －交叉反应物质 －外源性物质
干扰因素和对策- 类风湿因子
患者体内存在的类风湿因子能显著干扰 许多免疫学检测方法，、型可以与免疫检测 系统中的捕获抗体及标记二抗的段直接结合， 从而导致检测结果假阳性或假性升高。对不 同检测系统的干扰程度有所差异，影响程度 并不与的浓度成正比 。目前，在临床工作中 使用的免疫检测试剂盒大部分均没有很好地 防止干扰的措施，国外著名公司要好于国内 公司。
干扰因素和对策- 嗜异性抗体
嗜异性抗体通常是指与其他种类动物的 免疫球蛋白产生反应的人类抗体，具有广泛 的种特异性。免疫检测系统中大量使用单克 隆抗体，嗜异性抗体可与啮齿类动物的段结 合。这样嗜异性抗体既可与检测系统中的捕 获抗体结合、又可和标记抗体结合，造成检 测结果假阳性或假性升高。嗜异性抗体干扰 的程度、频率与患者的疾病状态、年龄、性 别等无关。
要保证实验结果的正确性和可靠性，必 须对实验整个过程中各个环节中的干扰因素 有比较清楚的掌握和了解。在本次课中主要 讨生论化的是标本本身内在因素、以及由于人为 因临素检对标本处理不当等引起的外在因素、对 免疫检测结果造成的影响。在了解这些因素 的同时，如何在临床工作中注意和解决这些 干扰，以保证结果的准确性。
基本概念
抗原：是一类能刺激机体免疫系统产生特异性 免疫应答、并能与相应免疫应答产物（抗体或 致敏淋巴细胞）发生特异性结合的物质。
抗体： 是由抗原刺激 B细胞经分化增殖形成 的浆细胞合成和分泌 的，能与相应抗原发
基本概念
免疫学检测就是利用抗原和抗体高度特异 性结合的原理而检测分析微量物质的方法。从 20世纪50年代美国学者和发明了放射免疫测定 技术检测胰岛素起，免疫学检测技术经历了从 定性到定量；从常量分析到微量、超微量分析； 从手工检测到全自动化；从单个标本检测到高 通量检测等一系列长足的进步。
免疫检测技术- 标记物
免疫测定技术均是以标记物示踪作为基 础，同位素、荧光素、酶是经典的三大标记 免疫测定技术。这三大标记技术发展了各种 各样的免疫测定方法，如、、荧光免疫测定、 免疫化学发光测定等，目前应用这三大标记 技术的检测试剂盒在临床广为应用。近年来， 作为免疫测定发展方向的非同位素标记技术 以其敏感、安全等倍受关注。
2002；48(4):613~621
表1. 不同处理方法对嗜异性抗体干扰的排除
处理方法
病人数 频率（％）
1 切除捕获抗体段和加入热处理 148
1533后结果正常
2 仅切除捕获抗体段后结果正常
41
3.0 0.82
3 切除捕获抗体段或加入15 天然
4
33或15热处理33后结果正常
4 仅加入15热处理33后结果正常
3
0.08 0.06
干扰因素和对策- 嗜异性抗体
使用免疫化学发光检测系统测定、、β 和皮质醇，前三项为双位点非竞争法，后为 竞争法。160份标本测定有5份（3.1%)假性 升高；53份标本（37.9%)用嗜异性抗体吸附 剂吸收后结果出现差异性下降；有4份标本 的结果出现＞4的显著增高，使临床对结果 的解释出现改变。
2003；49(7):1163～1169
嗜异性抗体的干扰－对策
在标本稀释液或待检标本中加入过量的动 物 (s) ，但加入量不足或亚型不同时无 效（要与捕获抗体和标记抗体的亚型相 同）。 捕获抗体使用F(`)2，切除段。
干扰因素和对策- 自身抗 体 嗜靶抗原的自身抗体，如抗甲状腺球蛋
白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体，能与 靶抗原结合形成复合物，在免疫检测系统中 均可对靶抗原的测定结果造成负性干扰。
干扰因素和对策- 自身抗 体
等人采用针对中心稳定区域抗原位点的 捕获和检测抗体，开发了新的检测方法，有利 于具有自身抗体等干扰物质的标本。采用新方 法和目前一商品化试剂盒共检测541份胸痛患 者的血清，其中13.5%的标本两种方法检测均 阳性，14.2 %的标本仅采用新方法检测阳性 。 上述结果说明心梗患者存在自身抗体绝非特 例。
2002;48(11):2008~2016
的干扰－对策
捕获抗体用F(`)2替代完整的 标本用连有热变性（63℃，10 ）的 固相吸附剂（公司）处理（将 热变性加入到标本稀释液或血清中同样 有效），4℃过夜离心后在检测； 检测抗原时，可以用终浓度0.1 2-巯 基乙醇(2- )等加入到标本稀释液或标本 中，使（型）降解。
干扰因素和对策- 类风湿因子
收集10份31～＞1000的患者血清，在美 国和欧洲66各临床实验室进行74个项目的免 疫竞争法或免疫夹心法检测，仪器和试剂均 配套。3445个结果中8.7％为假阳性。错误高 值结果中的21％（所有结果的1.8％）引起了 临床的错误诊断，在使用吸附剂后再检测， 错误结果得到纠正。39％的假阳性结果也可 在使用吸附剂后降低。
随着基础免疫学研究的深入和现代免 疫学理论的建立，使大量免疫学检测技术 被不断地创新、发明；在临床疾病诊治的 应用中也不断地推陈出新。目前应用免疫 学原理检测的检验项目占到三级综合医院 检验科全部检验项目的1／4，医疗收入约 占1／3。这就要求检验人员不断掌握最新 的临床免疫学知识和各种新的检验方法， 了解检验项目的基本原理。
2005;51(5):848-55
嗜靶抗原自身抗体的干扰－对策
为避免以上情况出现，解决的办法是： 测定前标本需用理化方法将免疫复合物解离 后再测定。解离液组成：
干扰因素和对策- 嗜异性抗体
将11261份血清标本使用荧光时间分辨免 疫分析系统（公司，二步法、双位点）检测， 将缓冲液中加入小牛 约210个病人、 3.3~4.7%的标本出现假性升高；加入15热处 理小鼠（33 ）（）可将干扰降为0.86%；同 浓度天然小鼠无效；去除捕获抗体或标记抗 体的段也可将干扰降至0.1%。
ห้องสมุดไป่ตู้
免疫学检测- 干扰因素
标本自身及前处理所造成的干扰因素 －类风湿因子（） －嗜异性抗体 －自身抗体 －补体 －纤维蛋白 －溶血或黄疸 －交叉反应物质 －外源性物质
干扰因素和对策- 类风湿因子
患者体内存在的类风湿因子能显著干扰 许多免疫学检测方法，、型可以与免疫检测 系统中的捕获抗体及标记二抗的段直接结合， 从而导致检测结果假阳性或假性升高。对不 同检测系统的干扰程度有所差异，影响程度 并不与的浓度成正比 。目前，在临床工作中 使用的免疫检测试剂盒大部分均没有很好地 防止干扰的措施，国外著名公司要好于国内 公司。
干扰因素和对策- 嗜异性抗体
嗜异性抗体通常是指与其他种类动物的 免疫球蛋白产生反应的人类抗体，具有广泛 的种特异性。免疫检测系统中大量使用单克 隆抗体，嗜异性抗体可与啮齿类动物的段结 合。这样嗜异性抗体既可与检测系统中的捕 获抗体结合、又可和标记抗体结合，造成检 测结果假阳性或假性升高。嗜异性抗体干扰 的程度、频率与患者的疾病状态、年龄、性 别等无关。
要保证实验结果的正确性和可靠性，必 须对实验整个过程中各个环节中的干扰因素 有比较清楚的掌握和了解。在本次课中主要 讨生论化的是标本本身内在因素、以及由于人为 因临素检对标本处理不当等引起的外在因素、对 免疫检测结果造成的影响。在了解这些因素 的同时，如何在临床工作中注意和解决这些 干扰，以保证结果的准确性。
基本概念
抗原：是一类能刺激机体免疫系统产生特异性 免疫应答、并能与相应免疫应答产物（抗体或 致敏淋巴细胞）发生特异性结合的物质。
抗体： 是由抗原刺激 B细胞经分化增殖形成 的浆细胞合成和分泌 的，能与相应抗原发
基本概念
免疫学检测就是利用抗原和抗体高度特异 性结合的原理而检测分析微量物质的方法。从 20世纪50年代美国学者和发明了放射免疫测定 技术检测胰岛素起，免疫学检测技术经历了从 定性到定量；从常量分析到微量、超微量分析； 从手工检测到全自动化；从单个标本检测到高 通量检测等一系列长足的进步。
免疫检测技术- 标记物
免疫测定技术均是以标记物示踪作为基 础，同位素、荧光素、酶是经典的三大标记 免疫测定技术。这三大标记技术发展了各种 各样的免疫测定方法，如、、荧光免疫测定、 免疫化学发光测定等，目前应用这三大标记 技术的检测试剂盒在临床广为应用。近年来， 作为免疫测定发展方向的非同位素标记技术 以其敏感、安全等倍受关注。
2002；48(4):613~621
表1. 不同处理方法对嗜异性抗体干扰的排除
处理方法
病人数 频率（％）
1 切除捕获抗体段和加入热处理 148
1533后结果正常
2 仅切除捕获抗体段后结果正常
41
3.0 0.82
3 切除捕获抗体段或加入15 天然
4
33或15热处理33后结果正常
4 仅加入15热处理33后结果正常
3
0.08 0.06
干扰因素和对策- 嗜异性抗体
使用免疫化学发光检测系统测定、、β 和皮质醇，前三项为双位点非竞争法，后为 竞争法。160份标本测定有5份（3.1%)假性 升高；53份标本（37.9%)用嗜异性抗体吸附 剂吸收后结果出现差异性下降；有4份标本 的结果出现＞4的显著增高，使临床对结果 的解释出现改变。
2003；49(7):1163～1169
嗜异性抗体的干扰－对策
在标本稀释液或待检标本中加入过量的动 物 (s) ，但加入量不足或亚型不同时无 效（要与捕获抗体和标记抗体的亚型相 同）。 捕获抗体使用F(`)2，切除段。
干扰因素和对策- 自身抗 体 嗜靶抗原的自身抗体，如抗甲状腺球蛋
白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体，能与 靶抗原结合形成复合物，在免疫检测系统中 均可对靶抗原的测定结果造成负性干扰。