显微镜分类及成像原理
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显微设备成像
报告人：卫元晨
1
2/48
¤目录¤
1 显微镜的早期发展历程 2 显微镜分类及部分成像原理
光学显微镜
倒置生物显微镜 体视显微镜 金相显微镜 荧光显微镜 测量显微镜 共聚焦显微镜
电子显微镜
透射电子显微镜 扫描电子显微镜
3/48
¤目录¤
其他
磁力显微镜 超声显微镜 离心显微镜
3 显微镜临床应用
血管 神经 肌肉
41/48
3-2 病毒、细菌性疾病诊断
15/48
2-1-1 倒置生物显微镜
倒置显微镜的组成和普通显微镜一样，只 不过物镜与照明系统颠倒，前者在载物台 之下，后者在载物台之上，用于观察培养 的活细胞 和放大镜起着同样的作用，就是把近处的 微小物体成一放大的像，以供人眼观察
16/48
2-1-1 倒置生物显微镜
1 图像采集接口 2 目镜 3 图像采集接口 4 图像采集接口 5 光路转换棱镜 6 侧口棱镜 7 中间棱镜 8 检偏器 9 反射滤色块 10 荧光视场光阑 11 荧光孔径光阑 12 滤色片滑块 13 高压汞灯 14 卤素灯 15 视场光阑 16 起偏器 17 孔径光阑 18 聚光镜 19 物镜
34/48
2-3-1 磁力显微镜
基本原理：由于样品上方的电场梯度的存 在，探针与样品表面电场之间的静电力会 引起探针微悬臂共振频率的变化，从而导 致其振幅和相位的变化 优点：与其他磁成像技术比较,磁力显微镜 具有分辨率高、可在大气中工作、不破坏 样品而且不需要特殊的样品制备等优点。
35/48
2-3-2 超声显微镜
2-3-3 离心显微镜
在离心加速度下，为连续观察细胞内的动 态而设计的显微镜。透过离心管中被检材 料的透射光线，靠棱镜或反射镜到达旋转 轴的中心，并经过安装在中心轴上的光学 系统而放大。当旋转速度超过了眼的像残 留时间时，就可以连续进行像的观察。在 高倍放大时接物镜安装在转动部分的中心 轴上。
37/48
13/48
2 显微镜分类及部分成像原理
成像原理
光学显微镜 电子显微镜
接收器类型
目视显微镜 数码（摄像）显微镜
使用的目镜数目
双目显微镜 单目显微镜
光源类型
普通光 荧光 紫外光 红外光
激光
观察对象
生物显微镜 金相显微镜
……
14/48
2-1 光学显微镜
物镜 得到被观察物体放大的实像 目镜 把物镜所成放大的实像，作为物体， 进一步把它放大为虚像 光圈 调节通过反光镜反射的光照在载物台 上的亮度，同时有改变景深的作用 反光镜 将外界的光线反射到载物台上，照 亮标本
7/48
1 显微镜的早期发展历程
1665年，英国科学 家罗伯特· 胡克用他 的显微镜观察软木 切片的时候发现了 细胞。不过，詹森 时代的复合式显微 镜并没有真正显示 出它的威力，它们 的放大倍数很低。
8/48
1 显微镜的早期发展历程
荷兰人安东尼· 列文 冯· 虎克Anthony Von Leeuwenhoek ， 1632-1723)制造的显 微镜单片显微镜的放大 倍数将近300倍，超过 了以往任何一种显微镜 。
通常用x表示
分辨率
最小分辨距离 =0.61 × （光波长/物镜的数值孔径） 要提高分辨率就要用波长更短的照明光，及增大物镜的数值孔 径
关系：显微镜的放大倍数越高，分辨率越高。这是因 为，放大倍数越高，其像的细节看得越清晰，即分辨 率也就越高了。
6/48
1 显微镜的早期发展历程
显微镜是16世纪末叶，荷兰密得尔堡一个眼 镜店的老板詹森和他的父亲罕斯发明的。 1590年，詹森无意中把两片凸玻璃片装到 一个金属管子里，并用这个管子去看街道上 的建筑物，意外发现教堂高塔上大公鸡的雕 塑比原来大了好几倍。詹森父子俩抓住这个 偶然的发现，认真思索，反复实践，用大大 小小的凸玻璃片做各种距离不等的配合终于 发明了世界上第一台显微镜。
32/48
2-2 电子显微镜
光学显微镜、透射电子显微镜、扫描电子 显微镜成像原理比较
33/48
2-3-1 磁力显微镜
采用磁性探针对样品表面扫描检测，检测 时，对样品表面的每一行都进行两次扫描
第一次：在样品表面扫描，得到样品的表面形 貌信息，这个过程与在轻敲模式中成像一样； 第二次：探针回到当前行扫描的开始点，增加 探针与样品之间的距离（即抬起一定的高度） ，根据第一次扫描得到的样品形貌，始终保持 探针与样品之间的距离，进行第二次扫描。在 这个阶段，可以通过探针悬臂振动的振幅和相 位的变化，得到相应的长程力的图像
25/48
2-1 光学显微镜
相衬显微镜：利用光的干涉现象，将人眼 不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差 微分干涉对比显微镜：能观察无色透明的 物体，而且图象呈现出浮雕壮的立体感 数码显微镜：以摄像头作为接收元件 ……
26/48
2-2 电子显微镜
电子显微镜与光学显微镜的成像原理基本 一样，所不同的是前者用电子束作光源， 用电磁场作透镜 由于电子束的穿透力很弱，因此用于电镜 的标本须制成厚度约50nm左右的超薄切片 。这种切片需要用超薄切片机制作
38/48
2-3-5 扫描隧道显微镜
比原子力显微镜分辨率更高 利用量子隧道效应产生隧道电流的原理制 作的显微镜。其分辨率可达原子水平，即 观察到原子级的图像。在生物学中，可观 察大分子和生物膜的分子结构。 扫描隧道显微镜在低温下可以利用探针尖 端精确操纵原子，因此它在纳米科技既是 重要的测量工具又是加工工具
18/48
2-1-2 体视显微镜
1 主机变倍体 2 物镜 3 观察筒 4 变倍旋钮 5 调焦旋钮 6 调焦立柱 7 目镜 8 载物台 9 底座 10 冷光源 11 鹅颈光纤
19/48
2-1-3 金相显微镜
金相显微镜是将光学显 微镜技术、光电转换技 术、计算机图像处理技 术完美地结合在一起而 开发研制成的高科技产 品，可以在计算机上很 方便地观察金相图像， 从而对金相图谱进行分 析，评级等以及对图片 进行输出、打印。
2-3-4 原子力显微镜
原子力显微镜是一种利用原子,分子间的相 互作用力来观察物体表面微观形貌的新型 实验技术.它有一根纳米级的探针,被固定在 可灵敏操控的微米级弹性悬臂上.当探针很 靠近样品时,其顶端的原子与样品表面原子 间的作用力会使悬臂弯曲,偏离原来的位置. 根据扫描样品时探针的偏离量或振动频率 重建三维图像.就能间接获得样品表面的形 貌或原子成分.
20/48
2-1-4 荧光显微镜
荧光显微镜是以紫外 线为光源， 用以照射 被检物体， 使之发出 荧光， 然后在显微镜 下观察物体的形状及 其所在位置。 用于研究细胞内物质 的吸收、运输、化学 物质的分布及定位等 。
21/48
2-1-4 荧光显微镜
细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线 照射后可发荧光； 另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果 用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线 照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类 物质进行定性和定量研究的工具之一。
30/48
2-2-2 扫描电子显微镜
组成
真空系统：：电子束系统中的灯丝在普通大气中会迅 速氧化而失效
真空柱：一个密封的柱形容器 真空泵：用来在真空柱内产生真空
电子束系统：产生一束能量分布极窄的、电子能量确 定的电子束用以扫描成象
电子枪：用于产生电子 电磁透镜：热发射电子需要电磁透镜来成束
成像系统：如次级电子探测器、X射线能谱分析仪等区 分信号以获得所需要的信息
31/48
2-2-2 扫描电子显微镜
应用范围
透射电子显微镜 扫描电子显微镜 生物：种子、花粉、细菌…… 医学：血球、病毒…… 动物：大肠、绒毛、细胞、纤维…… 材料：陶瓷、高分子、粉末、环氧树脂…… 化学、物理、地质、冶金、矿物、污泥(杆菌) 、机械 、电机及导电性样品，如半导体(IC、线宽量测、断面 、结构观察……)电子材料等。
22/48
2-1-5 测量显微镜
测量显微镜，采用透、反 射的方式对工件长度和角 度作精密测量。 照明系统除作透、反射照 明外还可以作斜光线照明 。仪器进一步可连接CCD 电视摄像头，作工件的轮 廓放大；亦可连接计算机 进行数据处理等测量。
23/48
2-1-6 共聚焦显微镜
从一个点光源发射 的探测光通过透镜 聚焦到被观测物体 上，如果物体恰在 焦点上，那么反射 光通过原透镜应当 汇聚回到光源，这 就是所谓的共聚焦 ，简称共焦。
超声显微镜是利用样品声学性能的差别，用声成 像的方法来生成高反差、高放大倍率的超声像的 装置 分类：
吸收式超声显微镜 激光扫描法超声显微镜 布拉格衍射成像法超声显微镜
用途：显示介质材料内部的微小结构。能观察材 料内部与声学性质差别有关的结构，这是用普通 光学显微镜和电子显微镜所不能观察到的。
36/48
39/48
3 显微镜临床应用
基于光学显微镜的显微外科手术 电子显微镜在病理学中的应用较为广泛， 并不断开拓着病理学的新领域。主要表现 在从细胞、亚细胞的形态结构上阐明疾病 的发生、发展及转归规律，丰富了传统病 理学的知识。
40/48
3-1 显微外科
显微外科：组织分离、切 除，器官移植，离断肢再 植等。 1963年，国学者陈中伟 等就成功的进行了断肢再 接手术
29/48
2-2-2 扫描电子显微镜
扫描电子显微镜（SEM）是 1965年发明的较现代的细胞生 物学研究工具 主要是利用二次电子信号成像来 观察样品的表面形态，即用极狭 窄的电子束去扫描样品，通过电 子束与样品的相互作用产生各种 效应，其中主要是样品的二次电 子发射 二次电子能够产生样品表面放大 的形貌像，这个像是在样品被扫 描时按时序建立起来的，即 使 用逐点成像的方法获得放大像
9/48
1 显微镜的早期发展历程
18－19世纪，复合式显微镜得到了充分的 完善，人们发明了能够消除色差和其他光 学误差的透镜组，与现在我们使用的普通 光学显微镜相仿。光学显微镜已经达到了 分辨率的极限。
10/48
1 显微镜的早期发展历程
1938年，德国 工程师Max Knoll和Ernst Ruska制造出了 世界上第一台透 射电子显微镜 (TEM)。
24/48
2-1-6 共聚焦显微镜
传统的光学显微镜使用的是场光源，标本 上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或 散射光的干扰；激光扫描共聚焦显微镜利 用激光束经照明针孔形成点光源对标本内 焦平面的每一点扫描，标本上的被照射点 ，在探测针孔处成像，由探测针孔后的光 点倍增管（PMT）或冷电耦器件（cCCD） 逐点或逐线接收，迅速在计算机监视器屏 幕上形成荧光图像
27/48
2-2 电子显微镜
电子显微镜的分辨率可以达到纳米级(109m)。可以用来观察很多在可见光下看不 见的物体,例如病毒。
螺旋菌光学显微境下电子显微镜下28/48
2-2-1 透射电子显微镜
1932年Ruska发明了以电 子束为光源的透射电子显微 镜，电子束的波长要比可见 光和紫外光短得多，并且电 子束的波长与发射电子束的 电压平方根成反比，也就是 说电压越高波长越短。目前 透射电子显微镜的分辨力可 达0.2nm。
17/48
2-1-2 体视显微镜
体视显微镜又称“实体显微镜”“ 立体显微镜”或称“操作和解剖显 微镜”，是一种具有正像立体感地 目视仪器 双目镜筒中的左右两光束不是平行 ，而是具有一定的夹角——体视角 （一般为12度---15度），因此成 像具有三维立体感 像是直立的，便于操作和解剖，这 是由于在目镜下方的棱镜把像倒转 过来的缘故
显微外科 病毒、细菌性疾病诊断 肾穿刺活检 血液系统疾病诊断 肌肉活检 肿瘤诊断
4 细胞操作简介
4/48
1 显微镜的早期发展历程
光学显微镜主要利用两个凸透镜恰当的调 节组合，对标本进行放大观察。经物镜形 成倒立实像，经目镜进一步放大成像。
5/48
1 显微镜的早期发展历程
重要参数
放大倍数=目镜倍数×物镜倍数
11/48
1 显微镜的早期发展历程
1952年，英国工 程师Charles Oatley制造出了 第一台扫描电子显 微镜(SEM)。
12/48
1 显微镜的早期发展历程
1983年，IBM公司苏黎世实验 室的两位科学家Gerd Binnig 和Heinrich Rohrer发明了扫 描隧道显微镜（STM）。这种 显微镜比电子显微镜更先进， 分辨率可以达到单个原子的级 别，它完全不同于传统显微镜 的概念。 Gerd Binnig Heinrich Rohrer
报告人：卫元晨
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1 显微镜的早期发展历程 2 显微镜分类及部分成像原理
光学显微镜
倒置生物显微镜 体视显微镜 金相显微镜 荧光显微镜 测量显微镜 共聚焦显微镜
电子显微镜
透射电子显微镜 扫描电子显微镜
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其他
磁力显微镜 超声显微镜 离心显微镜
3 显微镜临床应用
血管 神经 肌肉
41/48
3-2 病毒、细菌性疾病诊断
15/48
2-1-1 倒置生物显微镜
倒置显微镜的组成和普通显微镜一样，只 不过物镜与照明系统颠倒，前者在载物台 之下，后者在载物台之上，用于观察培养 的活细胞 和放大镜起着同样的作用，就是把近处的 微小物体成一放大的像，以供人眼观察
16/48
2-1-1 倒置生物显微镜
1 图像采集接口 2 目镜 3 图像采集接口 4 图像采集接口 5 光路转换棱镜 6 侧口棱镜 7 中间棱镜 8 检偏器 9 反射滤色块 10 荧光视场光阑 11 荧光孔径光阑 12 滤色片滑块 13 高压汞灯 14 卤素灯 15 视场光阑 16 起偏器 17 孔径光阑 18 聚光镜 19 物镜
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2-3-1 磁力显微镜
基本原理：由于样品上方的电场梯度的存 在，探针与样品表面电场之间的静电力会 引起探针微悬臂共振频率的变化，从而导 致其振幅和相位的变化 优点：与其他磁成像技术比较,磁力显微镜 具有分辨率高、可在大气中工作、不破坏 样品而且不需要特殊的样品制备等优点。
35/48
2-3-2 超声显微镜
2-3-3 离心显微镜
在离心加速度下，为连续观察细胞内的动 态而设计的显微镜。透过离心管中被检材 料的透射光线，靠棱镜或反射镜到达旋转 轴的中心，并经过安装在中心轴上的光学 系统而放大。当旋转速度超过了眼的像残 留时间时，就可以连续进行像的观察。在 高倍放大时接物镜安装在转动部分的中心 轴上。
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2 显微镜分类及部分成像原理
成像原理
光学显微镜 电子显微镜
接收器类型
目视显微镜 数码（摄像）显微镜
使用的目镜数目
双目显微镜 单目显微镜
光源类型
普通光 荧光 紫外光 红外光
激光
观察对象
生物显微镜 金相显微镜
……
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2-1 光学显微镜
物镜 得到被观察物体放大的实像 目镜 把物镜所成放大的实像，作为物体， 进一步把它放大为虚像 光圈 调节通过反光镜反射的光照在载物台 上的亮度，同时有改变景深的作用 反光镜 将外界的光线反射到载物台上，照 亮标本
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1 显微镜的早期发展历程
1665年，英国科学 家罗伯特· 胡克用他 的显微镜观察软木 切片的时候发现了 细胞。不过，詹森 时代的复合式显微 镜并没有真正显示 出它的威力，它们 的放大倍数很低。
8/48
1 显微镜的早期发展历程
荷兰人安东尼· 列文 冯· 虎克Anthony Von Leeuwenhoek ， 1632-1723)制造的显 微镜单片显微镜的放大 倍数将近300倍，超过 了以往任何一种显微镜 。
通常用x表示
分辨率
最小分辨距离 =0.61 × （光波长/物镜的数值孔径） 要提高分辨率就要用波长更短的照明光，及增大物镜的数值孔 径
关系：显微镜的放大倍数越高，分辨率越高。这是因 为，放大倍数越高，其像的细节看得越清晰，即分辨 率也就越高了。
6/48
1 显微镜的早期发展历程
显微镜是16世纪末叶，荷兰密得尔堡一个眼 镜店的老板詹森和他的父亲罕斯发明的。 1590年，詹森无意中把两片凸玻璃片装到 一个金属管子里，并用这个管子去看街道上 的建筑物，意外发现教堂高塔上大公鸡的雕 塑比原来大了好几倍。詹森父子俩抓住这个 偶然的发现，认真思索，反复实践，用大大 小小的凸玻璃片做各种距离不等的配合终于 发明了世界上第一台显微镜。
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2-2 电子显微镜
光学显微镜、透射电子显微镜、扫描电子 显微镜成像原理比较
33/48
2-3-1 磁力显微镜
采用磁性探针对样品表面扫描检测，检测 时，对样品表面的每一行都进行两次扫描
第一次：在样品表面扫描，得到样品的表面形 貌信息，这个过程与在轻敲模式中成像一样； 第二次：探针回到当前行扫描的开始点，增加 探针与样品之间的距离（即抬起一定的高度） ，根据第一次扫描得到的样品形貌，始终保持 探针与样品之间的距离，进行第二次扫描。在 这个阶段，可以通过探针悬臂振动的振幅和相 位的变化，得到相应的长程力的图像
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2-1 光学显微镜
相衬显微镜：利用光的干涉现象，将人眼 不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差 微分干涉对比显微镜：能观察无色透明的 物体，而且图象呈现出浮雕壮的立体感 数码显微镜：以摄像头作为接收元件 ……
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2-2 电子显微镜
电子显微镜与光学显微镜的成像原理基本 一样，所不同的是前者用电子束作光源， 用电磁场作透镜 由于电子束的穿透力很弱，因此用于电镜 的标本须制成厚度约50nm左右的超薄切片 。这种切片需要用超薄切片机制作
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2-3-5 扫描隧道显微镜
比原子力显微镜分辨率更高 利用量子隧道效应产生隧道电流的原理制 作的显微镜。其分辨率可达原子水平，即 观察到原子级的图像。在生物学中，可观 察大分子和生物膜的分子结构。 扫描隧道显微镜在低温下可以利用探针尖 端精确操纵原子，因此它在纳米科技既是 重要的测量工具又是加工工具
18/48
2-1-2 体视显微镜
1 主机变倍体 2 物镜 3 观察筒 4 变倍旋钮 5 调焦旋钮 6 调焦立柱 7 目镜 8 载物台 9 底座 10 冷光源 11 鹅颈光纤
19/48
2-1-3 金相显微镜
金相显微镜是将光学显 微镜技术、光电转换技 术、计算机图像处理技 术完美地结合在一起而 开发研制成的高科技产 品，可以在计算机上很 方便地观察金相图像， 从而对金相图谱进行分 析，评级等以及对图片 进行输出、打印。
2-3-4 原子力显微镜
原子力显微镜是一种利用原子,分子间的相 互作用力来观察物体表面微观形貌的新型 实验技术.它有一根纳米级的探针,被固定在 可灵敏操控的微米级弹性悬臂上.当探针很 靠近样品时,其顶端的原子与样品表面原子 间的作用力会使悬臂弯曲,偏离原来的位置. 根据扫描样品时探针的偏离量或振动频率 重建三维图像.就能间接获得样品表面的形 貌或原子成分.
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2-1-4 荧光显微镜
荧光显微镜是以紫外 线为光源， 用以照射 被检物体， 使之发出 荧光， 然后在显微镜 下观察物体的形状及 其所在位置。 用于研究细胞内物质 的吸收、运输、化学 物质的分布及定位等 。
21/48
2-1-4 荧光显微镜
细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线 照射后可发荧光； 另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果 用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线 照射亦可发荧光，荧光显微镜就是对这类 物质进行定性和定量研究的工具之一。
30/48
2-2-2 扫描电子显微镜
组成
真空系统：：电子束系统中的灯丝在普通大气中会迅 速氧化而失效
真空柱：一个密封的柱形容器 真空泵：用来在真空柱内产生真空
电子束系统：产生一束能量分布极窄的、电子能量确 定的电子束用以扫描成象
电子枪：用于产生电子 电磁透镜：热发射电子需要电磁透镜来成束
成像系统：如次级电子探测器、X射线能谱分析仪等区 分信号以获得所需要的信息
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2-2-2 扫描电子显微镜
应用范围
透射电子显微镜 扫描电子显微镜 生物：种子、花粉、细菌…… 医学：血球、病毒…… 动物：大肠、绒毛、细胞、纤维…… 材料：陶瓷、高分子、粉末、环氧树脂…… 化学、物理、地质、冶金、矿物、污泥(杆菌) 、机械 、电机及导电性样品，如半导体(IC、线宽量测、断面 、结构观察……)电子材料等。
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2-1-5 测量显微镜
测量显微镜，采用透、反 射的方式对工件长度和角 度作精密测量。 照明系统除作透、反射照 明外还可以作斜光线照明 。仪器进一步可连接CCD 电视摄像头，作工件的轮 廓放大；亦可连接计算机 进行数据处理等测量。
23/48
2-1-6 共聚焦显微镜
从一个点光源发射 的探测光通过透镜 聚焦到被观测物体 上，如果物体恰在 焦点上，那么反射 光通过原透镜应当 汇聚回到光源，这 就是所谓的共聚焦 ，简称共焦。
超声显微镜是利用样品声学性能的差别，用声成 像的方法来生成高反差、高放大倍率的超声像的 装置 分类：
吸收式超声显微镜 激光扫描法超声显微镜 布拉格衍射成像法超声显微镜
用途：显示介质材料内部的微小结构。能观察材 料内部与声学性质差别有关的结构，这是用普通 光学显微镜和电子显微镜所不能观察到的。
36/48
39/48
3 显微镜临床应用
基于光学显微镜的显微外科手术 电子显微镜在病理学中的应用较为广泛， 并不断开拓着病理学的新领域。主要表现 在从细胞、亚细胞的形态结构上阐明疾病 的发生、发展及转归规律，丰富了传统病 理学的知识。
40/48
3-1 显微外科
显微外科：组织分离、切 除，器官移植，离断肢再 植等。 1963年，国学者陈中伟 等就成功的进行了断肢再 接手术
29/48
2-2-2 扫描电子显微镜
扫描电子显微镜（SEM）是 1965年发明的较现代的细胞生 物学研究工具 主要是利用二次电子信号成像来 观察样品的表面形态，即用极狭 窄的电子束去扫描样品，通过电 子束与样品的相互作用产生各种 效应，其中主要是样品的二次电 子发射 二次电子能够产生样品表面放大 的形貌像，这个像是在样品被扫 描时按时序建立起来的，即 使 用逐点成像的方法获得放大像
9/48
1 显微镜的早期发展历程
18－19世纪，复合式显微镜得到了充分的 完善，人们发明了能够消除色差和其他光 学误差的透镜组，与现在我们使用的普通 光学显微镜相仿。光学显微镜已经达到了 分辨率的极限。
10/48
1 显微镜的早期发展历程
1938年，德国 工程师Max Knoll和Ernst Ruska制造出了 世界上第一台透 射电子显微镜 (TEM)。
24/48
2-1-6 共聚焦显微镜
传统的光学显微镜使用的是场光源，标本 上每一点的图像都会受到邻近点的衍射或 散射光的干扰；激光扫描共聚焦显微镜利 用激光束经照明针孔形成点光源对标本内 焦平面的每一点扫描，标本上的被照射点 ，在探测针孔处成像，由探测针孔后的光 点倍增管（PMT）或冷电耦器件（cCCD） 逐点或逐线接收，迅速在计算机监视器屏 幕上形成荧光图像
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2-2 电子显微镜
电子显微镜的分辨率可以达到纳米级(109m)。可以用来观察很多在可见光下看不 见的物体,例如病毒。
螺旋菌光学显微境下电子显微镜下28/48
2-2-1 透射电子显微镜
1932年Ruska发明了以电 子束为光源的透射电子显微 镜，电子束的波长要比可见 光和紫外光短得多，并且电 子束的波长与发射电子束的 电压平方根成反比，也就是 说电压越高波长越短。目前 透射电子显微镜的分辨力可 达0.2nm。
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2-1-2 体视显微镜
体视显微镜又称“实体显微镜”“ 立体显微镜”或称“操作和解剖显 微镜”，是一种具有正像立体感地 目视仪器 双目镜筒中的左右两光束不是平行 ，而是具有一定的夹角——体视角 （一般为12度---15度），因此成 像具有三维立体感 像是直立的，便于操作和解剖，这 是由于在目镜下方的棱镜把像倒转 过来的缘故
显微外科 病毒、细菌性疾病诊断 肾穿刺活检 血液系统疾病诊断 肌肉活检 肿瘤诊断
4 细胞操作简介
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1 显微镜的早期发展历程
光学显微镜主要利用两个凸透镜恰当的调 节组合，对标本进行放大观察。经物镜形 成倒立实像，经目镜进一步放大成像。
5/48
1 显微镜的早期发展历程
重要参数
放大倍数=目镜倍数×物镜倍数
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1 显微镜的早期发展历程
1952年，英国工 程师Charles Oatley制造出了 第一台扫描电子显 微镜(SEM)。
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1 显微镜的早期发展历程
1983年，IBM公司苏黎世实验 室的两位科学家Gerd Binnig 和Heinrich Rohrer发明了扫 描隧道显微镜（STM）。这种 显微镜比电子显微镜更先进， 分辨率可以达到单个原子的级 别，它完全不同于传统显微镜 的概念。 Gerd Binnig Heinrich Rohrer