《细胞生物学》120 细胞增殖及其调控.ppt
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G2 G1
S
标记有丝分裂百分率法测定细胞周期
标记后 S期 G2期 M期 G2期 假设
S
0hr 600 0
0
0
细胞数 2000
1hr 500 100 0
0
周期 20hr
2hr 400 200 0
0
3hr 300 300 0
0
G1期 10hr S期 6hr
3.5hr 250 300 50 0
G2期 3hr
S期检验点
DNA是否 复制完成
G1期检验点
restriction point checkpoint
DNA是否损伤 细胞外环境是否适宜 细胞体积是否足够大
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
讨讨论论32 与组细蛋胞白分是裂在有细关胞的周各期种的因哪子个，时如期微合管成、的微？ 丝等，是在细胞周期的哪个时期合成的？
G2M G1
S
停留在 S期
G1/S
释放
正常培养基培养 T>TS
G2M G1
S
脱离S期
阻断 过量TdR培养基培养 T>TS
G2M G1
S
停留在 G1/S
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
DNA合成阻断法
特点
双阻断 又称TdR双阻断法
讨优论点5 总结阻：断DN一A合次成，阻细断胞法停进留行在细S期胞、周G期1/同S，步同化步，化 为什程么度要不阻高断；两阻次断？2次，所有细胞同步在G1/S。
4hr 200 300 100 0
M期 1hr
5hr 100 300 100 100
6hr 0
300 100 200
7hr 0
200 100 300
8hr 0
100 100 400
Βιβλιοθήκη Baidu
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
标记有丝分裂百分率法测定细胞周期
脉冲标记
TdR 胸腺嘧啶脱氧核苷 thymine deoxyribonucleoside
讨论4 标D记N有A丝特分异裂前百体分，率能法S期测细定胞细摄胞周期，使 用入Td，R的掺理入由DN？A 通常使用3H或者14C标记的TdR
计算方法
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
四、细胞周期同步化
人工同步化 DNA合成阻断法
原理
培养基中过量TdR抑制对数生长期细胞的S期
阻断 过量TdR培养基培养 T>TG2+TM+TG1
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
Eucaryotic Cell Cycle
mitosis or division
A typical mammalian cell has a cell cycle time of 24 hours, with 12 hr G1, 6-8 hr S, 3-4 hr G2, and 1 hr M
第十二章
细胞增殖及其调控
CELL PROLIFERATION AND DIVISION REGULATION
第十二章 细胞周期及其调控
提要
细胞周期 细胞分裂 细胞周期调控
第十二章 细胞周期及其调控
讨论1 细对胞生物增来殖说意，义细胞分裂的意义有哪些？
种族繁衍、个体发育 组织更新 机体修复
→ → 受精卵 初婴1012个细胞 成人1014个细胞
流式细胞仪测定法
标记有丝分裂百分率法测定细胞周期
M G2
S
假设 细胞数
周期
G1期 S期
G1
G2期
M期
2000 20hr 10hr 6hr 3hr 1hr
则 细胞数 S期 600
程序
A 脉冲标记 B 定时取材 C 放射自显影技术
显示标记细胞
D 统计标记有丝分 裂细胞百分数
标记有丝分裂百分率法测定细胞周期 M
2 S期
DNA合成，组蛋白合成及 核小体形成
3 G2期 4 M期
为分裂作准备，合成各种因子， 如微管、微丝、染色体凝集因子
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
三、细胞周期时间的测定
脉冲标记DNA复制和有丝分裂指数观察测定法
标记有丝分裂百分率法 percentage labelled mitoses
C 细胞趋向多样性
进入周期 进入G0期 进入终端分化。
－－认为G1期存在一个限制点（restriction point）或 检验点（checkpoint），控制G1期向S期的过渡，即 细胞的增殖。同样还存在G2期等检验点。
DNA是否损伤， 细胞体积是否足
够大
G2期检验点
M期检验点 纺锤体是否连到
染色体上
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
二、细胞周期各时相主要事件
1 G1期
特点： 变化多
A G1期持续时间易变性 rRNA、tRNA、mRNA合成 加快，结构蛋白和酶形成。
B 生化上的复杂性
如小鼠食道上皮细胞G1期长 达103小时，而十二指肠上 皮细胞G1期仅为6小时。
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
二、有丝分裂过程
前期 prophase 前中期 premetaphase
中期 metaphase 后期 anaphase 末期 telophase
Mitosis视频
第十二章 细胞周期及其调控 第二节 细胞分裂
成人体内每秒钟有数百万新细胞产生，以补偿 衰老和死亡的细胞。
第十二章 细胞周期及其调控
第一节
细胞周期
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
一、细胞周期概念
细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程 事件 现象
所需的时间
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
1 细胞周期时期划分
G1 期 从有丝分裂完成到期DNA复制之前的间隙时间。 S 期 DNA复制时期。 G2期 DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间。 M 期 又称D期，细胞分裂开始到结束。
Gap 2 Synthesis phase
Gap 1
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
2 细胞周期性类型
连续分裂细胞 细胞周期中连续运转，又称周期细胞， 如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞
休眠细胞 不分裂细胞
暂不分裂，适当刺激下可重新进入周 期，称G0期细胞，如淋巴细胞、肝、 肾细胞等。
不可逆脱离细胞周期，不再分裂，又 称终端细胞，如神经、肌肉细胞等。
过量TdR Hela 2 mol·L−1 ；CHO 7.5 mol·L − 1
第十二章 细胞周期及其调控 第二节 细胞分裂
第二节
细胞分裂
第十二章 细胞周期及其调控 第二节 细胞分裂
一、细胞分裂类型
无丝分裂 amitosis 有丝分裂 mitosis 减数分裂 meiosis
第十二章 细胞周期及其调控 第二节 细胞分裂
S
标记有丝分裂百分率法测定细胞周期
标记后 S期 G2期 M期 G2期 假设
S
0hr 600 0
0
0
细胞数 2000
1hr 500 100 0
0
周期 20hr
2hr 400 200 0
0
3hr 300 300 0
0
G1期 10hr S期 6hr
3.5hr 250 300 50 0
G2期 3hr
S期检验点
DNA是否 复制完成
G1期检验点
restriction point checkpoint
DNA是否损伤 细胞外环境是否适宜 细胞体积是否足够大
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
讨讨论论32 与组细蛋胞白分是裂在有细关胞的周各期种的因哪子个，时如期微合管成、的微？ 丝等，是在细胞周期的哪个时期合成的？
G2M G1
S
停留在 S期
G1/S
释放
正常培养基培养 T>TS
G2M G1
S
脱离S期
阻断 过量TdR培养基培养 T>TS
G2M G1
S
停留在 G1/S
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
DNA合成阻断法
特点
双阻断 又称TdR双阻断法
讨优论点5 总结阻：断DN一A合次成，阻细断胞法停进留行在细S期胞、周G期1/同S，步同化步，化 为什程么度要不阻高断；两阻次断？2次，所有细胞同步在G1/S。
4hr 200 300 100 0
M期 1hr
5hr 100 300 100 100
6hr 0
300 100 200
7hr 0
200 100 300
8hr 0
100 100 400
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第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
标记有丝分裂百分率法测定细胞周期
脉冲标记
TdR 胸腺嘧啶脱氧核苷 thymine deoxyribonucleoside
讨论4 标D记N有A丝特分异裂前百体分，率能法S期测细定胞细摄胞周期，使 用入Td，R的掺理入由DN？A 通常使用3H或者14C标记的TdR
计算方法
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
四、细胞周期同步化
人工同步化 DNA合成阻断法
原理
培养基中过量TdR抑制对数生长期细胞的S期
阻断 过量TdR培养基培养 T>TG2+TM+TG1
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
Eucaryotic Cell Cycle
mitosis or division
A typical mammalian cell has a cell cycle time of 24 hours, with 12 hr G1, 6-8 hr S, 3-4 hr G2, and 1 hr M
第十二章
细胞增殖及其调控
CELL PROLIFERATION AND DIVISION REGULATION
第十二章 细胞周期及其调控
提要
细胞周期 细胞分裂 细胞周期调控
第十二章 细胞周期及其调控
讨论1 细对胞生物增来殖说意，义细胞分裂的意义有哪些？
种族繁衍、个体发育 组织更新 机体修复
→ → 受精卵 初婴1012个细胞 成人1014个细胞
流式细胞仪测定法
标记有丝分裂百分率法测定细胞周期
M G2
S
假设 细胞数
周期
G1期 S期
G1
G2期
M期
2000 20hr 10hr 6hr 3hr 1hr
则 细胞数 S期 600
程序
A 脉冲标记 B 定时取材 C 放射自显影技术
显示标记细胞
D 统计标记有丝分 裂细胞百分数
标记有丝分裂百分率法测定细胞周期 M
2 S期
DNA合成，组蛋白合成及 核小体形成
3 G2期 4 M期
为分裂作准备，合成各种因子， 如微管、微丝、染色体凝集因子
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
三、细胞周期时间的测定
脉冲标记DNA复制和有丝分裂指数观察测定法
标记有丝分裂百分率法 percentage labelled mitoses
C 细胞趋向多样性
进入周期 进入G0期 进入终端分化。
－－认为G1期存在一个限制点（restriction point）或 检验点（checkpoint），控制G1期向S期的过渡，即 细胞的增殖。同样还存在G2期等检验点。
DNA是否损伤， 细胞体积是否足
够大
G2期检验点
M期检验点 纺锤体是否连到
染色体上
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
二、细胞周期各时相主要事件
1 G1期
特点： 变化多
A G1期持续时间易变性 rRNA、tRNA、mRNA合成 加快，结构蛋白和酶形成。
B 生化上的复杂性
如小鼠食道上皮细胞G1期长 达103小时，而十二指肠上 皮细胞G1期仅为6小时。
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
二、有丝分裂过程
前期 prophase 前中期 premetaphase
中期 metaphase 后期 anaphase 末期 telophase
Mitosis视频
第十二章 细胞周期及其调控 第二节 细胞分裂
成人体内每秒钟有数百万新细胞产生，以补偿 衰老和死亡的细胞。
第十二章 细胞周期及其调控
第一节
细胞周期
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
一、细胞周期概念
细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程 事件 现象
所需的时间
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
1 细胞周期时期划分
G1 期 从有丝分裂完成到期DNA复制之前的间隙时间。 S 期 DNA复制时期。 G2期 DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间。 M 期 又称D期，细胞分裂开始到结束。
Gap 2 Synthesis phase
Gap 1
第十二章 细胞周期及其调控 第一节 细胞周期
2 细胞周期性类型
连续分裂细胞 细胞周期中连续运转，又称周期细胞， 如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞
休眠细胞 不分裂细胞
暂不分裂，适当刺激下可重新进入周 期，称G0期细胞，如淋巴细胞、肝、 肾细胞等。
不可逆脱离细胞周期，不再分裂，又 称终端细胞，如神经、肌肉细胞等。
过量TdR Hela 2 mol·L−1 ；CHO 7.5 mol·L − 1
第十二章 细胞周期及其调控 第二节 细胞分裂
第二节
细胞分裂
第十二章 细胞周期及其调控 第二节 细胞分裂
一、细胞分裂类型
无丝分裂 amitosis 有丝分裂 mitosis 减数分裂 meiosis
第十二章 细胞周期及其调控 第二节 细胞分裂