实验二--食品防腐剂抑菌效果的测定(1)
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(三)其他 1、无菌陶瓦盖培养皿2套 2、无菌生理盐水1瓶
3、无菌牛津杯10个
(四)仪器
1、超净工作台
2、1mL移液枪
四、实验步骤
1、熔化培养基
2、制平板
将熔化培养基倒入平皿内约25mL(培养皿底约
一半高度),待其凝固。
3、涂布平板接种
用移液枪吸取0.2mL菌液加到上述平板中,用无
菌三角玻璃涂棒涂布均匀。
实验二 食品防腐剂抑菌效果的测定
一、实验目的
了解山梨酸钾产生抑菌效果的原理
学会利用管碟法(牛津杯法)测定食品防 腐剂的抑菌效果 了解不同浓度山梨酸钾对不同微生物抑菌 活性的影响
二、实验原理
山梨酸钾是一种真菌抑制剂,防腐作用主要靠未解
离的分子,在pH6.0以下对霉菌和酵母菌有明显的
抑制作用,在pH>6.5时无效。
牛津杯里的防腐剂向琼脂培养基扩散渗透,通过对
试验菌的抑杀作用而影响细菌的生长繁殖,在牛津 杯周围形成抑菌圈。依据抑菌圈的大小可以判断抑 菌能力的强弱。
三、实验器材
(一)培养基及试剂
葡萄糖蛋白胨琼脂培养基
山梨酸钾溶液(0.20%、0.30%、0.40%、0.50%) (二)菌种 1、啤酒酵母 2、金黄色葡萄球菌
5、正置培养:
细菌 37℃ 6、结果判定: 根据牛津杯周围有无抑菌圈及其直径大小,来判 断该菌对山梨酸钾的敏感程度。用直尺测量抑菌 圈大小,并记录。 真菌 28℃
ห้องสมุดไป่ตู้
五、实验结果及分析
山梨酸钾浓度(%) 抑菌圈直径 0.20 0.30 0.40 0.50
啤酒酵母 金黄色
葡萄球菌
(mm×mm)
分析:
六、思考题
1、山梨酸钾抑菌的机理是什么?
2、山梨酸钾在食品中主要抑制哪些微生物? 3、用管碟法测定时,为什么不用玻璃皿盖而
用陶瓦盖?
4、加牛津杯和药液:
标记药液浓度后,用无菌镊子将牛津杯等距离放 置在培养基上,用移液枪在每个牛津杯中加入不 同浓度的药液0.2mL。如下图:
1 2 0 3 4
1:0.20% 2:0.30% 3:0.40% 4:0.50% 0:空白
注意:(1)牛津杯内加入药液后不要再移动 (2)不能在陶瓦盖上做记号