实验四 食品中防腐剂的测定-紫外可见分光光度法
防腐剂的测定
常用化学防腐剂及其作用机理（1）合成有机防腐剂∙苯甲酸和苯甲酸钠∙山梨酸和山梨酸钾∙对羟基苯甲酸酯∙脱氢醋酸和胶氢醋酸钠∙丙酸盐（2）无机防腐剂∙亚硫酸及其盐类∙硝酸盐和亚硝酸盐（3）天然防腐剂及其应用∙酒精∙有机酸∙甲壳素和壳聚糖∙乳酸链球菌素防腐剂的测定防腐剂是一种能够抑制食品中微生物生长和繁殖的化学物质。
如果按照国家规定的数量使用，不仅可以防止食品生霉，而且可以防止食品防腐剂是一种能够抑制食品中微生物生长和繁殖的化学物质。
如果按照国家规定的数量使用，不仅可以防止食品生霉，而且可以防止食品变质或腐败，并能延长保存时间，同时对食用者也不会引起什么危害。
因此，对防腐剂的使用必须控制一定的使用量，而且应具备以下特点：⑴凡加入食品中的防腐剂，首先是对人体无毒、无害、无副作用的；⑵长期使用添加防腐剂的食品，不应该使机体组织产生任何的病变，更不能影响第二代发育、生长；⑶加入防腐剂之后，对食品的质量不能有任何的影响和分解；⑷食品加入防腐剂之后，不能掩蔽劣质食品的质量或改变任何感官性状。
我国允许使用的防腐剂有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、对羟基苯甲酸乙酯及丙酯等。
其中前两种应用广泛。
苯甲酸及其盐类使用范围：酱油、醋、果汁类、果酱类、葡萄糖、罐头，最大使用剂量1g／公斤；汽酒、汽水、低盐酱菜、面酱类、蜜饯类、山楂糕、果味露，每公斤最多使用0.5g。
山梨酸及其盐类在酱油、醋、果酱类中，每公斤最多允许使用1 g；对低盐酱菜类、面酱类、蜜饯类等使用0.5g/㎏。
苯甲酸随食品进入体内时与甘氨酸结合成马尿酸，从尿液中排出体外，不再刺激肾脏；山梨酸进入机体后参与新陈代谢，最后生成CO2和H2O，被排出体外，由于山梨酸及其盐类价格贵一般不常用，多数用在出口食品中。
苯甲酸又名安息香酸，为白色有丝光的鳞片或针状结晶，熔点1 22℃，沸点249.2℃，100℃开始升华。
在酸性条件下可随水蒸汽蒸馏，微溶于水，易溶于氯仿、丙酮、乙醇、乙醚等有机溶剂，化学性质较稳定。
苯甲酸钠的测定
1绪论1.1苯甲酸钠的作用苯甲酸钠是一种常见的防腐剂，在食品中具有防腐的作用。
苯甲酸钠的化学式为C6H5COONa，它的相对分子质量为144.00，俗称“安息香酸钠”，并且英文名为Sodium Benzoate。
苯甲酸钠的防腐作用在在酸性和碱性的条件下有很大不同。
因为在碱性条件下苯甲酸钠没有杀菌抑菌的功效。
相反在酸性条件下，苯甲酸钠是防腐剂的最佳选择，实践证明苯甲酸钠在PH是2.5-4.0时防腐效果最强。
苯甲酸钠和苯甲酸都是较好的防腐剂，二者也有密切的关系。
苯甲酸钠在酸性条件下能转化成苯甲酸。
虽然如此，它们也不完全相同，苯甲酸钠的溶解度比苯甲酸的溶解度强。
例如，苯甲酸是在1870年，由H. Fleck在试验中尝试用一种酸来代替以熟知的水杨酸时，意外地发现了一个新物质的存在，那就是苯甲酸并且发现了它的具有防腐的特殊作用。
苯甲酸虽然是一种酸，但在当时那个时代并不能大量生产，所以还不能替代水杨酸。
因此，直到近代才开始投入使用。
一经使用得到了众人的认可，从此，苯甲酸作为防腐剂在食品中的使用居于前几位。
苯甲酸具有很多优点，其中它有一个最大的优势:价格便宜、效果好。
由于水果在自然条件下储存时间短，不易运输。
人们为了延长时间，用苯甲酸钠来做水果的保鲜剂。
因为苯甲酸钠有杀菌作用，对细菌，霉菌和发酵菌都有较好的抑制作用。
除了水果，在一些果汁，果酱，牛奶，果冻中苯甲酸钠也常被使用。
善于观察的人会发现化妆品和护理用品的保质期都在两年到三年之间，这都是防腐剂的神奇功效。
1.2测定苯甲酸钠的方法1.2.1高效液相色谱法方法: 标准曲线制备:分别取不同量苯甲酸钠、山梨酸钾、糖精钠标准贮备液制成混合标准系列,样品制备:样品制备:吸取1.0mL样品于10mL比色管中,加入甲醇至刻度,超声2min,静置,上清液过硅胶G小柱净化后,再过0.45u滤膜,滤液备用,进样量10u。
色谱条件:色谱柱,Shim Pack clc -ODS柱,5.0x160mm;流动相(甲醇:0.03mol/L NH4Ac = 15: 85),速度:2.0mL/min;柱温:30;长:2.0nm,进样10ul;以RT值定性,以峰面积外标法定量。
肉制品中食品添加剂(山梨酸、苯甲酸)的测定—紫外分光光度计的使用
（ 紫 外 使分 用光 ）光 度 计 的
一、紫外分光光度计概述
（二）仪器的结构
目前，紫外分光光度计的型号较多，但它们的基本构造 都相似，都由光源、单色器、样品吸收池、检测器和信号显 示系统等五大部件组成，其组成框图见图 1-1 。
表1-4 K2Cr2O7溶液透射比（25℃）
（ 紫 外 使分 用光 ）光 度 计 的
三、紫外分光光度计的维护与保养
（四）吸收池的配套性检验
吸收池配套性检验的具体步骤 如下：
1）检查 3）擦拭
2）标记 4）检验
透射比的偏差小于0.5%的吸收池可配成一套。
（ 紫 外 使分 用光 ）光 度 计 的
一、紫外分光光度计概述
（一）仪器工作原理
在一定的条件下，吸光物质对单色光的吸收符合朗伯比 尔定律，即 ： A=εbc
式中 A 为吸光度；b 为光程长度（即吸收池厚度），单位为 cm；c 为吸光物质的 物质的量浓度，单位为 mol/L；ε为摩尔吸光系数，单位为 L/(mol∙cm)；
技能点：紫外分光光度计的使用
目录页
一、紫外分光光度计概述 二、紫外分光光度计的使用 三、紫外分光光度计的维护与保养
（ 紫 外 使分 用光 ）光 度 计 的
一、紫外分光光度计概述
紫外分光光度法是利用物质对紫外光谱区域内的光具有 选择性吸收的现象，对物质进行定性和定量分析的方法 。用 于测量和记录待测物质分子对紫外光的吸光度及紫外吸收光 谱，并进行定性定量以及结构分析的仪器，称为紫外吸收光 谱仪或紫外分光光度计。
（ 紫 外 使分 用光 ）光 度 计 的
紫外分光光度法在食品检测及食品安全分析中的应用
紫外分光光度法在食品检测及食品安全分析中的应用紫外分光光度法是一种常用的分析技术，广泛应用于食品检测及食品安全分析。
该方法通过测量物质在紫外光波长范围内的吸光度，可以确定物质的存在以及浓度。
下面将详细介绍紫外分光光度法在食品检测及食品安全分析中的应用。
首先，紫外分光光度法在食品成分分析中起着重要的作用。
对于食品中的蛋白质、核酸、氨基酸等成分，紫外分光光度法可以通过测量它们在紫外光下的吸光度，来确定其存在及浓度。
比如，测量食品中的蛋白质浓度可以根据280nm波长处的吸光度进行计算。
这对于食品的营养价值分析非常重要。
其次，紫外分光光度法在食品中添加剂、防腐剂以及污染物的检测中具有重要的应用价值。
许多食品中添加了各种添加剂，如防腐剂、甜味剂和色素等。
紫外分光光度法可以通过测量它们在紫外波长下的吸光度，来确定是否存在及其浓度。
此外，紫外分光光度法还可以用于检测食品中的重金属离子、农药残留以及有害物质等。
这不仅可以对食品质量进行评估，还可以保障人们的健康。
另外，紫外分光光度法还可用于食品中微量元素的分析和检测。
食品中的微量元素，如铁、锌、钙等，对人体健康起着重要的作用。
紫外分光光度法可以通过测量这些微量元素特定波长处的吸光度，来确定其含量以及存在形式。
这对于食品营养价值的评估以及食品安全性的分析非常重要。
此外，紫外分光光度法还可以用于食品中一些特定活性物质的分析。
比如，茶叶中的儿茶素、葡萄酒中的类皂苷等。
测量它们在紫外波长下的吸光度可以用于确定它们的存在以及含量，从而评估食品中的活性物质的含量。
总的来说，紫外分光光度法在食品检测及食品安全分析中应用广泛且重要。
它可以用于食品成分分析、添加剂和污染物的检测、微量元素分析以及特定活性物质的分析等。
通过紫外分光光度法，可以对食品的质量和安全性进行评估，保障人们的健康。
因此，紫外分光光度法在食品检测及食品安全分析中具有重要的应用前景。
实验 紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂
实验紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂实验目的：1．掌握蒸馏操作；2．掌握紫外可见分光光度法测定苯甲酸的方法和原理。
实验原理：为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
其使用量一般在0.1%左右。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。
由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验采用蒸馏法对鲜橙多中的苯甲酸进行了测定，苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，可在225nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
仪器与试剂：紫外分光光度计，蒸馏装置；无水硫酸钠，磷酸，硫酸，氢氧化钠，重铬酸钾，苯甲酸；鲜橙多。
操作步骤：1、样品前处理：准确称取10.0g均匀的样品，置于250 mL蒸馏瓶中，加1mL H3PO4，20g无水Na2SO4，70mL水，三粒玻璃珠进行第一次蒸馏。
用预先加有5mL 0.1mol﹒L-1 NaOH的50mL容量瓶接收馏出液，当蒸馏液收集到45mL时，停止蒸馏，用少量水洗涤冷凝器，最后用水稀释至刻度。
吸取上述蒸馏液25mL，置于另一个250mL蒸馏瓶中，加入25mL 0.033mol﹒L-1 K2Cr2O7溶液,6.5mL 2mol﹒L-1H2SO4溶液，连接冷凝装置，水浴上加热10min，冷却，取下蒸馏瓶，加入1mL H3PO4、20g无水Na2SO4、40mL水和三颗玻璃珠，进行第二次蒸馏，用预先加有的5mL 0.1mol﹒L-1 NaOH的50mL容量瓶接收蒸馏液，当蒸馏瓶收集到45mL左右时，停止蒸馏，用少量洗涤冷凝器，最后用水稀释至刻度。
根据样品中苯甲酸含量，取第二次蒸馏液5～20mL，置于50mL容量瓶中，用0.01mol﹒L-1 NaOH定容，以0.01mol﹒L-1 NaOH作为对照液，于紫外分光光度计225nm处测定吸光度。
教案：紫外可见分光光度计 法测定食品中苯甲酸钠的含量
紫外可见分光光度计法测定食品中苯甲酸钠的含量一、实验目的1、了解和熟悉紫外-分光光度计的原理、结构和操作方法；2、掌握紫外分光光度法测定苯甲酸的吸收光谱图；3、掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸钠的含量。
二、实验原理为了防止食品在储存、运输过程中发生腐蚀、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一，其使用量一般在0.1%左右。
苯甲酸及苯甲酸钠具有芳香结构在近紫外光区具有较强的吸收。
通过实验证实，苯甲酸在230nm处具有最大吸收。
另一方面，它在水中具有适当的溶解度，所以，可将标样和样品处理成水溶液，采用紫外分光光度计，通过标准曲线法而实现酸性食品中苯甲酸（钠）含量的测定。
由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。
从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验测定雪碧、可口可乐、醒目等饮料中苯甲酸（钠），样品不用处理，在230nm波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
3、仪器和试剂仪器：紫外可见分光光度计 TU-1810（北京普析通用仪器有限公司），1.0cm石英比色皿，50ml容量瓶11个，吸量管5mL一支、1mL两支。
试剂：苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过干燥的苯甲酸钠1.000g（105℃干燥处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。
该贮备液可置于冰箱保存一段时间；0.1mol/L NaOH溶液；市售饮料。
四、实验步骤1、标准曲线的制作苯甲酸钠标准溶液（100.0mg/L）：准确移取苯甲酸储备液5.00mL 于50mL容量瓶中，加入蒸馏水稀释定容。
苯甲酸钠系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液0.00mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL和5.00mL于6个50mL容量瓶中，各加入0.1mol/LNaOH溶液1.00mL蒸馏水稀释定容，摇匀。
3.紫外分光光度法测定苯酚
3.紫外分光光度法测定苯酚实验四紫外分光光度法测定苯酚1.⽬的要求⒈学会使⽤UV-2102PC型紫外可见分光光度计。
⒉掌握紫外光谱法定量分析⽅法与原理。
2．基本原理苯酚在220-380nm处具有特征吸收，因此其含量可⽤紫外分光光度计作测定，不需进⾏显⾊反应，⽅法简便，快速，且准确度⾼。
3. 仪器与试剂⒈仪器：UV-2102PC型紫外可见分光光度计； 10mL吸量管1只； 50mL容量瓶7个； 100mL容量瓶5个。
2.试剂：0.250g/L苯酚标准溶液准确称取25.0mg分析苯酚，溶于适量⽔中，全部转移⾄100mL容量瓶中，⽤纯⽔稀释⾄刻度，摇匀。
4. 实验步骤⒈绘制吸收光谱图和选择测量波长⽤吸量管取4mL0.250g/L苯酚标准溶液于50ml容量瓶中，⽤纯⽔稀释⾄刻度，摇匀。
此溶液在UV-2102PC型紫外可见分光光度计上，⽤1cm⽯英液槽，以纯⽔为参⽐溶液，于波长220-380nm范围内，分辨精度1nm，绘制吸收光谱图，并选择测量波长λmax.⒉绘制标准曲线取5只50mL容量瓶，由吸量管分别加⼊ 2.00、4.00、6.00、8.00、10.0mL0.250g/L苯酚标准溶液，以纯⽔稀释⾄刻度。
摇匀。
得⼀系列苯酚标准溶液。
⽤1cm⽯英液槽，以纯⽔为参⽐溶液，在选定波长处测上列各标准溶液的吸光度。
绘制标准曲线。
⒊试样溶液的测定⽤移液管取适量试样溶液于50mL容量瓶中,按上述步骤2配制溶液并测定吸光度。
平⾏测定⼆份。
（⿊体字部分实验报告中请按⾃⼰实际操作撰写）5．数据处理⒈根据实验所苯酚吸收光谱曲线，运⽤理论知识根据吸收谱带的位置形状及吸收强度（摩尔吸光系数），对所做谱图进⾏解析，判断苯酚紫外光谱的吸收带与跃迁类型。
2绘制标准曲线，并由曲线求算试样溶液中苯酚量（mg/L）. 6．问题讨论本实验测定时能否⽤玻璃液槽代替⽯英液槽盛放溶液，为什么？紫外光谱实验参考⽂献紫外及可见光谱包括有⼏个谱带系，不同的谱带系相当于不同电⼦能级的跃迁。
紫外分光光度法检测饮料中防腐剂的实验方案[20121120][1]
![紫外分光光度法检测饮料中防腐剂的实验方案[20121120][1]](https://img.taocdn.com/s3/m/05a34b42af1ffc4ffe47acc0.png)
紫外可见分光光度计法测定食品中防腐剂的含量一、实验目的1.进一步了解和熟悉紫外-分光光度计的原理和结构，以岛津UV-2450为例学习紫外分光光度计的操作。
2.掌握利用紫外分光光度法测定苯甲酸和山梨酸的吸收光谱图。
3.掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸和山梨酸及其钠盐和钾盐的含量。
二、实验原理为了防止食品在储存、运输过程中发生腐蚀、变质，常在食品中添加少量防腐剂。
防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸和山梨酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。
苯甲酸具有芳香结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。
根据苯甲酸（钠）在225nm处有最大吸收，测得其吸光度即可用标准曲线法求出样品中苯甲酸的含量。
山梨酸具有α,β-不饱和羰基结构，在波长255nm处有π—π*跃迁的K吸收带，因此可根据它们的紫外吸收光谱特征可以对它们进行定性鉴定和定量测定。
由于食品中防腐剂用量很少，GB2760-2011 规定0.2-1.5g/kg，并且食品样品中其它的成分也可能对防腐剂的测定具有干扰作用，因此一般可预先将样品中的防腐剂与其它成分进行分离，再经过提纯和浓缩进行测定。
常用的分离方法包括蒸馏法和溶剂萃取法等。
本实验采用溶剂萃取法，先用HCl溶液将样品进行酸化，再利用乙醚将这两种防腐剂品从样品中萃取出来，然后将乙醚蒸发，剩下的萃取物经过碱性溶液（NaOH）溶解与处理。
最后对照标准物质，利用紫外分光光度计对目的成分进行检测。
三、实验仪器和试剂1.紫外可见分光光度计UV2450（日本岛津），1.0cm石英比色皿，50mL容量瓶。
2.HCl溶液（1:1）、NaOH溶液（40g/L）、NaCl溶液（5%）。
3.苯甲酸钠标准溶液的配制（1）苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过干燥的苯甲酸钠 1.000g（105℃干燥处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。
[整理版]苯甲酸钠的检测
![[整理版]苯甲酸钠的检测](https://img.taocdn.com/s3/m/3fbedb38443610661ed9ad51f01dc281e53a56e3.png)
苯甲酸钠的检测一、苯甲酸钠的简介：苯甲酸钠（化学式：C6H5CO2Na），是苯甲酸的钠盐。
苯甲酸钠是很常用的食品防腐剂，有防止变质发酸、延长保质期的效果，在世界各国均被广泛使用。
然而近年来对其毒性的顾虑使得它的应用受限，有些国家如日本已经停止生产苯甲酸钠，并对它的使用作出限制。
苯甲酸钠大多为白色颗粒，无臭或微带安息香气味，味微甜，有收敛性；易溶于水（常温）53.0g/100ml左右，PH在8左右；苯甲酸钠也是酸性防腐剂，在碱性介质中无杀菌、抑菌作用；其防腐最佳PH是2.5-4.0，在PH5.0时5%的溶液杀菌效果也不是很好。
苯甲酸钠亲油性较大，易穿透细胞膜进入细胞体内，干扰细胞膜的通透性，抑制细胞膜对氨基酸的吸收；进入细胞体内电离酸化细胞内的碱储，并抑制细胞的呼吸酶系的活性，阻止乙酰辅酶A缩合反应，从而起到食品防腐的目的。
熔点：300℃。
沸点：249.3℃在760 mmHg下分子量:144性状:白色颗粒或结晶性粉末。
无气味，有甜涩味。
用途:1主要用作食品防腐剂，也用于制药物、染料等。
2用于医药工业和植物遗传研究，也用作染料中间体、杀菌剂和防腐剂。
3防腐剂；抗微生物剂。
4苯甲酸钠液室重要的酸型饲料防腐剂。
使用时转化为有效形式苯甲酸。
使用范围及使用量参见苯甲酸。
此外，也可作为食品的防腐剂。
5苯甲酸钠也是重要的酸型食品防腐剂。
使用时转化为有效形式苯甲酸。
使用范围及使用量参见苯甲酸。
此外，也可作为饲料的防腐剂。
6该品用作食品添加剂（防腐剂）、医药工业的杀菌剂、染料工业的媒染剂、塑料工业的增塑剂，也用作香料等有机合成的中间体。
7用作血清胆红素试验的助溶剂、食品添加剂（防腐剂）、医药工业的杀菌剂、染料工业的媒染剂、塑料工业的增塑剂，也用作香料等有机合成的中间体。
二、苯甲酸钠的测定酸碱滴定法测定苯甲酸钠本实验采用双相滴定法测定碳酸饮料中苯甲酸钠的含量。
本实验选做紫外-可见分光光度法测定碳酸饮料中苯甲酸钠的含量，并将结果与双相滴定法进行对照苯甲酸钠的测定可以使用HCl滴定，但因为生成的苯甲酸常温下溶解度很小，几乎不溶于水，由此造成滴定终点的pH突越不够明显，另外游离的苯甲酸附着在容器和液面表面会影响观察滴定结果，并在一定程度上吸附少量的指示剂，不利于终点判断。
食品中防腐剂测定方法的研究
食品中防腐剂测定方法的研究摘要：研究了紫外分光光度法测定食品中防腐剂(苯甲酸)的含量。
样品中苯甲酸的最小检出量为 0.0010mg/ml, 回收率为 98%。
该方法简便易行, 灵敏准确。
关键词：防腐剂;测定;紫外分光光度法食品防腐剂苯甲酸的测定 ,通常采用乙醚提取碱滴定法和水蒸气蒸馏紫外分光光度法测定,这两种方法测定程序复杂且周期长 ,回收率也较低。
本文作者在前人工作的基础上 ,采用了新的测定方法。
即乙醚萃取紫外分光光度法测定。
样品分析结果表明：该方法简便准确、快速可行。
1食品防腐剂对微生物或霉菌具有杀灭、抑制或阻止生长作用的食品添加剂为防腐剂。
我国准许使用的防腐剂GB2760-1986 有：苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐、二氧化硫、焦亚硫酸钠及其钾盐、丙酸钙、丙酸钠、对羟基苯甲酸乙酯、丙酯、脱氢醋酸、双乙酸钠、葡萄糖-δ-内酯和乳酸链球菌素。
1996 年对GB2760-1986 作很大修订,把二氧化硫、焦亚硫酸钾及其钠盐列入漂白剂。
将葡萄糖-δ-内酯归到稳定和凝固剂中。
特别是把保鲜剂、过氧化氢、乙氧基喹、仲丁胺、桂醛、噻苯咪唑、苯基苯酚、苯基苯酚钠等统统归到防腐剂中。
这与日本相反。
1997 年以前日本把噻苯咪唑、联苯、苯基苯酚、苯基苯酚钠等列为防腐剂,1997 年单列项为防霉剂。
食品防腐剂 GB2760-1996共有 28个品种,1997 年新增丙酸、纳他霉素和液体二氧化碳(催化法)。
1998 年增补单辛酸甘油脂。
1999 年增加脱氢醋酸钠。
2002 年增加对羟基苯甲酸甲酯钠,对羟基苯甲酸乙酯钠和对羟基苯甲酸丙酯钠。
截止到2003 年共 36 个品种。
2试剂与仪器苯甲酸标准溶液：0.05mg/ml (准确称取 0.5000g 苯甲酸以 0 .01mol/L 的 NaOH 溶解并定容至1000ml, 使用时再以蒸馏水稀释 10 倍)。
756 型紫外可见分光光度计上海分析仪器厂3实验条件的选择取 0.05mg/ml 苯甲酸标准溶液 3ml 于 125ml 分液漏斗中 ,加入 20ml 饱和氯化钠溶液, 再加入一定量的1：1HCl 和 25ml 乙醚, 充分振荡后静置。
四种食品防腐剂检测方法的研究的开题报告
四种食品防腐剂检测方法的研究的开题报告1. 研究背景随着现代食品加工技术的不断发展，食品防腐剂在食品加工和储存过程中得到了广泛应用。
不同种类的食品防腐剂对食品的保质期和品质起着至关重要的作用。
然而，食品防腐剂对人体健康的影响引起了越来越多的关注。
为此，监管部门需要对食品中的防腐剂进行检测，以保证食品安全。
针对这一需求，需要开展食品中防腐剂的检测研究。
2. 研究目的本研究旨在探讨四种食品防腐剂常见的检测方法，包括高效液相色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法和红外光谱法，比较其优劣势，为食品安全监管提供技术支持。
3. 研究内容(1) 食品防腐剂的种类及其应用；(2) 高效液相色谱法在食品防腐剂检测中的应用；(3) 气相色谱法在食品防腐剂检测中的应用；(4) 紫外分光光度法在食品防腐剂检测中的应用；(5) 红外光谱法在食品防腐剂检测中的应用；(6) 比较四种方法的优缺点。
4. 研究方法(1) 文献综述法：通过查询学术文献、专业杂志、期刊论文，收集和整理关于食品防腐剂检测技术的研究成果，了解当前食品防腐剂检测的发展现状和进展；(2) 实验室实验法：采用高效液相色谱法、气相色谱法、紫外分光光度法和红外光谱法对食品中的防腐剂进行检测，并比较分析其检测效果和可靠性。
5. 研究意义本研究可以为食品安全监管机构提供技术支持，加强食品防腐剂的检测和控制。
同时，该研究可以推动食品检测技术的创新和发展，提高我国食品安全监管水平，为人民群众的身体健康保驾护航。
6. 研究进度安排(1) 第一周：查找文献资料并进行整理；(2) 第二周：学习高效液相色谱法检测技术；(3) 第三周：学习气相色谱法检测技术；(4) 第四周：学习紫外分光光度法检测技术；(5) 第五周：学习红外光谱法检测技术；(6) 第六周：进行实验室实验，并收集数据；(7) 第七周：数据处理和结果分析；(8) 第八周：撰写开题报告和学术论文。
实验D 防腐剂测定
实验9（序号待统编）紫外分光光度法测定雪碧中苯甲酸的含量一、目的要求1、掌握用紫外——可见分光光度法测定防腐添加剂的原理和方法2、加深对蒸馏分离不同有机物的方法理解和操作技术的掌握二、原理将样品酸化后进行蒸馏，苯甲酸随蒸汽馏出。
收集馏出的馏分，加入强氧化剂将馏出液中的有机物完全氧化分解，再次蒸馏，并用碱吸收得苯甲酸钠。
用紫外分光光度计于225nm 处进行测定。
采用标准曲线法并计算样品中苯甲酸的含量。
三、仪器与试剂紫外分光光度计，蒸馏装置。
NaOH溶液：0.1mol·L-1, 0.01mol·L-1；K2Cr2O7溶液：0.03333mol·L-1；H2SO4溶液：2 mol·L-1；苯甲酸标准溶液：100mg/L，称取0.1000g苯甲酸（经105℃烘干）于250mL烧杯中，加入0.1mol·L-1NaOH100mL，搅拌溶解后，转移入1000mL容量瓶中，用水定容；Na2SO4（无水）；H3PO4。
四实验步骤1、标准曲线的绘制（1）、移取50.00mL苯甲酸标准液于250mL蒸馏瓶中，加H3PO41mL，Na2SO4（无水）20g，水70mL，玻璃珠（防爆沸）3-4粒进行蒸馏。
用50mL容量瓶（预先加有5mL0.1mol·L-1NaOH）收集馏出液。
当馏出液约为40mL时，停止蒸馏，用少量水吹洗冷凝器，洗液并入容量瓶，最后用水定容。
（2）、移取第一次馏出液于另一个250mL蒸馏瓶中，加入0.03333 mol·L-1K2Cr2O7溶液25mL，2mol·L-1H2SO4溶液6.5mL，连接冷凝装置，在水浴上加热约10min，冷却，加入H3PO41mL，Na2SO4（无水）20g，水40mL，玻璃珠（防爆沸）3-4粒进行蒸馏。
以下操作同（1）。
（3）、移取第二次馏出液2.00，4.00，6.00，8.00，10.00mL，分别置于50mL容量瓶中，用0.01mol·L-1NaOH溶液定容。
紫外可见分光光度法测定饮料中的防腐剂——苯甲酸
4、苯甲酸钠溶液0.5mg/ml：
59.02mg苯甲酸，加入100ml的0.1mol/L NaOH溶解，最后加入900ml纯化水，浓度为50mg/L；
0.2361g苯甲酸，加入400ml的0.1mol/L NaOH溶解，最后加入3600ml纯化水，浓度为50mg/L；
序号
试剂名称
瓶
Байду номын сангаас备注
1
85%磷酸
6
白试剂瓶（60ml），AR（原瓶）分装
2
无水Na2SO4
3
AR（原瓶），用量25g/组
3
NaOH溶液
6
0.1mol/L，白试剂瓶（250ml），用量10ml/组
4
H2SO4溶液
6
2mol/L，白试剂瓶（250ml）
5
K2Cr2O7溶液
6
0.033mol/L，白试剂瓶（250ml）
紫外可见分光光度法测定饮料中的防腐剂——苯甲酸
仪器：10组（2-4人/组）
序号
仪器名称
个
备注
1
紫外可见分光光度计
2
411仪器室，配擦镜纸、滤纸条、比色皿（1cm）
2
蒸馏装置
20
2个/组，单口圆底烧瓶（250ml、磨口24#）
10
平衡管（磨口24#），胶管连接
10
蛇形冷凝管（40cm、磨口24#），配胶管
6
苯甲酸钠溶液
6
0.1mg/ml，棕试剂瓶（500ml），用量30ml/组
7
玻璃珠
3
白试剂瓶（广口，60ml）
8
分光光度法在食品防腐剂检测中的应用
侯芳菲（天津生物工程职业技术学院 天津 300400）分光光度法在食品防腐剂检测中的应用分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析的方法。
所用方法有紫外可见分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法和原子吸收分光光度法。
防腐剂作为重要的食品添加剂之一，能防止食品腐败、变质，抑制食品中微生物繁殖，延长食品保存期。
防腐剂在抑制微生物繁殖的同时，也不可避免的对人体产生副作用，但是在正确的使用范围、正确的使用量内，其安全性完全能够保障。
因此，防腐剂的检测对于保障人民群众的健康具有非常重要的意义。
1 紫外分光光度法纳他霉素，也称游链霉素,是一种重要的抗菌素,能有效杀灭及抑制食品中的霉菌、酵母菌和其他真菌的生长。
目前,纳他霉素作为一种天然的食品防腐剂已被批准应用于某些乳制品。
纳他霉素在实际应用中的使用量仅为山梨酸钾的1/50～1/100。
周玉虎[1]建立了一种紫外分光光度法快速测定酸奶中纳他霉素的方法。
该方法在甲醇和醋酸介质下，采用超声萃取进行前处理，优化了超声萃取时间、波长、酸度等试验条件，并由正交试验进一步验证。
对几种酸奶样品中纳他霉素进行测定，回收率均在92.89%～104.61%之间。
摘 要：对紫外分光光度法、红外分光光度法、荧光分光光度法及原子吸收分光光度法在食品防腐剂检测中的应用进行了阐述。
关键词：分光光度法 防腐剂 检测目前，我国食品工业多使用苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钠盐，苯甲酸和山梨酸均为共扼型有机化合物,在近紫外光区具有较强的吸收。
卫敏[2]等用紫外分光光度法测定调味品酱油和醋中苯甲酸含量，对影响提取效果的因素进行了试验，确定了水浴时间和水浴温度对苯甲酸含量测定结果的影响是有限的，而馏分体积、无水硫酸钠的加入量和蒸馏速度是影响苯甲酸含量测定的主要因素。
测得的结果与气相色谱法测定结果的相对误差10%以内，样品加标的回收率为91%～102%。
紫外分光光度法测定食品中苯甲酸含量
标准曲线的绘制： 标准曲线的绘制：
取苯甲酸标准使用液0、1、2、4、6ml分 取苯甲酸标准使用液0 6ml分
别置于100ml容量瓶中，各加入5%NaHCO 别置于100ml容量瓶中，各加入5%NaHCO3 100ml容量瓶中 溶液2ml (1+2v)盐酸溶液 ml， 2ml， 盐酸溶液２ 溶液2ml，(1+2v)盐酸溶液２ml，加水至 刻度，摇匀。放置15min,尽量让CO 逸尽。 15min,尽量让 刻度，摇匀。放置15min,尽量让CO２逸尽。 用1cm吸收池于波长230nm处测定其吸光 1cm吸收池于波长230nm处测定其吸光 吸收池于波长230nm 以吸光度为纵坐标， 度。以吸光度为纵坐标，以浓度为横坐 标绘制标准曲线。 标品: 液体样品: 酱油、食醋、饮料取10ml于１２５ml分 酱油、食醋、饮料取10ml １２５ml 10ml于 ml分
流漏斗中，加入(1+2v)盐酸溶液２ml进 流漏斗中，加入(1+2v)盐酸溶液２ml进 (1+2v)盐酸溶液 行酸化，用无水乙醚萃取二次，每次３ 行酸化，用无水乙醚萃取二次，每次３ ml，每次振摇１min。 ０ml，每次振摇１min。 合并乙醚层于另一干净分流漏斗中，用 合并乙醚层于另一干净分流漏斗中， NaCL溶液洗涤二次 每次５ 溶液洗涤二次， ５％NaCL溶液洗涤二次，每次５～１０ ml。然后蒸馏瓶回收乙醚， ml。然后蒸馏瓶回收乙醚，用 溶液溶解，定容至１ 20ml5%NaHCO3溶液溶解，定容至１00ml 备用。 备用。
(GB2760—1996)规定： (GB2760 1996)规定： 1996)规定 苯甲酸及苯甲酸钠在碳酸饮料中的最大 使用量为0.2g kg； 0.2g／ 使用量为0.2g／kg； 低盐酱菜、酱菜、蜜饯、食醋、果酱(不 低盐酱菜、酱菜、蜜饯、食醋、果酱( 包括罐头) 最大使用量为0.5g kg(以 0.5g／ 包括罐头)、最大使用量为0.5g／kg(以 苯甲酸计)。 苯甲酸计)
食品添加剂焦亚硫酸钾含量测定方法
一、概述食品添加剂是指为了改善食品质量和外观，在食品生产加工过程中对食品进行改性、增香、增色、防腐等目的而添加的物质。
其中，焦亚硫酸钾是一种常见的食品添加剂，用于防止食品褪色和腐烂。
然而，过量使用焦亚硫酸钾可能会对人体健康造成危害，因此需要对食品中焦亚硫酸钾的含量进行严格监控和检测。
二、食品添加剂焦亚硫酸钾含量测定方法1. UV-Vis分光光度法UV-Vis分光光度法是一种常见的测定焦亚硫酸钾含量的方法。
该方法利用焦亚硫酸钾在紫外光下的吸光特性，通过测定其在特定波长下的吸光度，从而推算出其含量。
这种方法简单、快速，适用于大批量样品的检测，因此在食品生产和检验领域得到了广泛应用。
2. 气相色谱法气相色谱法是一种高效分离和测定食品中焦亚硫酸钾含量的方法。
该方法利用气相色谱仪对样品中的焦亚硫酸钾进行分离，并通过识别和测定峰值来确定其含量。
该方法精确度高、灵敏度好，适用于各种类型的食品样品。
3. 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种利用高效液相色谱仪对食品中焦亚硫酸钾进行分离和测定的方法。
该方法具有分离效果好、分析速度快的特点，适用于各种复杂样品的检测。
4. 电化学法电化学法是一种利用电化学分析技术对食品中焦亚硫酸钾进行测定的方法。
该方法通过在特定条件下测量样品中焦亚硫酸钾的电化学行为，从而确定其含量。
这种方法操作简便、准确度高，适用于各种类型的食品样品。
5. 总气体发生法总气体发生法是一种通过将食品样品中的焦亚硫酸钾转化为二氧化硫气体，再通过一系列反应和测定来确定其含量的方法。
该方法操作简单、灵敏度高，适用于各种类型的食品样品。
三、结论食品添加剂焦亚硫酸钾的含量测定方法有多种，各有其特点和适用范围。
在实际检验过程中，需要根据不同的样品类型和实际情况选择合适的测定方法，确保检测结果的准确性和可靠性，从而保障食品安全和人体健康。
对食品添加剂的使用也需要严格控制，避免过量使用对人体造成危害。
希望通过对食品添加剂含量的严格监控和检测，能够保障食品质量和用户的健康。
实验四食品中防腐剂的测定-紫外可见分光光度法
实验四食品中防腐剂的测定-紫外可见分光光度法光谱技术在食品分析中的应用实验四食品中防腐剂的测定-紫外可见分光光度法一、实验目的1、了解紫外可见分光光度计仪器的基本结构和原理；2、学会紫外可见分光光度计仪器的操作技术；3、了解食品中防腐剂的测定意义；4、学会用此法测定山梨酸。
二、基本原理用三氯甲烷从样品中提取出山梨酸，再以碳酸氢钠提取，使山梨酸形成钠盐溶于水溶液中，山梨酸钠水溶液在254nm处有最大的吸收峰，测其吸光度可对其定量。
三、仪器和试剂1、仪器（1）紫外分光光度计UV-2450（岛津），石英比色皿（2）组织捣碎机2、试剂（1）三氯甲烷：以三氯甲烷体积之半的碳酸氢钠（0.5mol/L）提取两次，用无水硫酸钠干燥，过滤备用。
（2）0.5mol/L碳酸氢钠：取21克碳酸氢钠溶于500毫升水中。
（3）0.3mol/L碳酸氢钠：将13.6克碳酸氢钠溶于500毫升水中。
（4）6mol/L盐酸（5）山梨酸标准液（100微克/毫升）：准确称取100毫克山梨酸于1000毫升容量瓶中，用0.3mol/L碳酸氢钠稀释至刻度，使用时再稀释成50ug/ml的山梨酸标准使用液。
四、实验步骤1、样液的制备：称取50.0克样品加450毫升水于组织捣碎机中，搅5分钟，取10克匀浆于50毫升容量瓶中，以水定容，移取10毫升此溶液于分液漏斗中，加6mol/L盐酸1～2滴酸化，用50毫升氯仿提取1分钟，将氯仿层分至250毫升带塞锥形瓶中，用3克无水硫酸钠干燥，振摇后静置。
2、标准曲线的绘制：取25毫升比色管5支，分别加入山梨酸标准使用液0、0.5、1.0、1.5、2.0毫升，用0.3mol/LNaHCO3稀释至刻度，于254nm处测吸光度，作标准曲线。
3、样品中山梨酸的测定：取上述氯仿液25毫升于125毫升分液漏斗中，用25毫升0.3mol/L碳酸氢钠提取1分钟，静置分层后，小心放出氯仿层，测水层吸光度，从标准曲线中找出山梨酸的含量。
紫外分光光度法测定食品中苯甲酸钠的含量
紫外分光光度法测定食品中苯甲酸钠的含量【摘要】利用紫外分光光度法测定食品中苯甲酸钠含量。
在222nm处有最大吸收，可通过紫外分光光度法进行测定。
该法检测成本低，不需要大型仪器及特殊试剂，具有简便快速的特点，可应用于一般工厂实践中。
【关键词】紫外分光光度法；苯甲酸钠；含量测定食品防腐剂是在食品工业中使用比较广泛的一种食品添加剂，其主要作用是抑制微生物的生长繁殖，以提高食品的保质期。
苯甲酸钠是目前国内外广发应用的一种食品防腐剂，具有水中溶解度大，防腐效果好的特点。
从保证食品安全的角度来说，研究简便快速测定食品中苯甲酸钠的方法具有重要的现实意义。
[1]紫外分光光度法是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种仪器分析方法，本文研究通过紫外分光光度法来测定各类食品中防腐剂苯甲酸钠的含量，不但操作方便，而且实验条件简单，适合于食品防腐剂的快速检测。
[2]1.仪器与试剂1.1仪器TU—1810紫外分光光度计、FA1004 型电子天平、石英比色皿、水浴装置，容量瓶、分液漏斗、移液管、吸耳球、量筒、烧杯、玻璃棒等。
1.2试剂苯甲酸钠（分析纯），40g/L氢氧化钠溶液，50%浓度的盐酸，乙醚（分析纯），蒸馏水酱油、水塔陈醋、美年达、甘草杏肉（超市购入）。
2.实验方法2.1最大吸收波长的确定配置（1.000g/L）的苯甲酸钠标准溶液1000mL，准确吸取1.00mL于100mL 容量瓶中，用蒸馏水稀释成浓度为10mg/L的苯甲酸钠溶液，摇匀，以蒸馏水为参比，在波长200—300nm波长范围内测定吸光度，记录苯甲酸钠的最大吸收波长，结果如图1所示：由图1分析可知，在200—300nm的波长范围内，苯甲酸钠的波长在222nm 处，有最大吸收波长，则222nm即为吸收测定波长。
2.2标准曲线的绘制吸取苯甲酸钠标准溶液0mL、0.1mL、0.2mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、3.0mL于100mL容量瓶中，分别加入1mL0.1mol/L的氢氧化钠溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，在222nm处测其吸光度，并以吸光度（A）为纵坐标，浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线，结果如图2所示。
c三、任务3：食品中防腐剂的紫外光谱测定
紫外与可见分光光度法比较
可见分光光度法 紫外分光光度法 基于物质对紫外光的吸收而对 物质进行定性和定量分析的一 类方法 200-400nm,氘灯,石英吸收池 绘制吸收曲线,选择最大波长； 合适的参比液 是否存在共扼结构以及苯 环的定性判断依据；有机 物的定量分析
定义
基于物质对可见光的吸收而对 物质进行定性和定量分析的一 类方法 400-780nm,钨灯,玻璃吸收池 有色溶液；显色剂；控制PH; 绘制吸收曲线,选择最大波长 减小干扰;合适的参比液 一般作为无机物、有机物 的定量分析
项目三：光学分析-紫外可见分光光度法分析
任务3：食品中防腐剂的 紫外光谱测定
任务分析：
为了防止食品在储存、运输过程中发生变质、腐败，常在食品中添加 少量防腐剂。防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规 定。苯甲酸和山梨酸以及它们的钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的 两种主要防腐剂。苯甲酸具有芳烃结构，在波长228nm和272nm处有K 吸收带和B吸收带；山梨酸具有α、β不饱和羰基结构，在波长250nm处 有π→π＊跃迁的K吸收带,因此 们进行定性鉴定和定量测定。 根据它们的紫外吸收光谱特征可以对它
任务实施
• 防腐剂定性鉴定
• 取经提纯稀释后的乙醚萃取液，用1cm的石英 吸收池，以乙醚为参比，用紫外可见分光光度计 在波长210～310nm范围作紫外吸收光谱，根据 吸收峰波长及吸收强度确定防腐剂的种类。
任务实施
• 工作曲线测定食品中防腐剂含量
紫外光、紫外吸收曲线
紫外光区域的波长范围：10－400nm; 紫外分光光度法的波长范围：200nm-400nm 紫外吸收曲线绘制：
如四氯化碳中二 硫化碳测定检查Fra bibliotek任务实施
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光谱技术在食品分析中的应用
实验四食品中防腐剂的测定-紫外可见分光光度法
一、实验目的
1、了解紫外可见分光光度计仪器的基本结构和原理；
2、学会紫外可见分光光度计仪器的操作技术；
3、了解食品中防腐剂的测定意义；
4、学会用此法测定山梨酸。
二、基本原理
用三氯甲烷从样品中提取出山梨酸，再以碳酸氢钠提取，使山梨酸形成钠盐溶于水溶
液中，山梨酸钠水溶液在254nm处有最大的吸收峰，测其吸光度可对其定量。
三、仪器和试剂
1、仪器
（1）紫外分光光度计UV-2450（岛津），石英比色皿
（2）组织捣碎机
2、试剂
（1）三氯甲烷：以三氯甲烷体积之半的碳酸氢钠（0.5mol/L）提取两次，用无水硫酸钠干燥，过滤备用。
（2）0.5mol/L碳酸氢钠：取21克碳酸氢钠溶于500毫升水中。
（3）0.3mol/L碳酸氢钠：将13.6克碳酸氢钠溶于500毫升水中。
（4）6mol/L盐酸
（5）山梨酸标准液（100微克/毫升）：准确称取100毫克山梨酸于1000毫升容量瓶中，用0.3mol/L碳酸氢钠稀释至刻度，使用时再稀释成50ug/ml的山梨酸标准使用液。
四、实验步骤
1、样液的制备：称取50.0克样品加450毫升水于组织捣碎机中，搅5分钟，取10克匀浆于50毫升容量瓶中，以水定容，移取10毫升此溶液于分液漏斗中，加6mol/L盐酸
1～2滴酸化，用50毫升氯仿提取1分钟，将氯仿层分至250毫升带塞锥形瓶中，用3克
无水硫酸钠干燥，振摇后静置。
2、标准曲线的绘制：取25毫升比色管5支，分别加入山梨酸标准使用液0、0.5、
1.0、1.5、
2.0毫升，用0.3mol/LNaHCO3稀释至刻度，于254nm处测吸光度，作标准曲线。
3、样品中山梨酸的测定：取上述氯仿液25毫升于125毫升分液漏斗中，用25毫升
0.3mol/L碳酸氢钠提取1分钟，静置分层后，小心放出氯仿层，测水层吸光度，从标准曲
线中找出山梨酸的含量。
五、数据处理
1、绘制标准曲线、得出线性方程及相关系数R ，并算出25ml 提取液（氯仿样液）中所含山梨酸的量（g ）
2、山梨酸（g/kg ）=10002550
105010500⨯⨯⨯⨯W X W ：样品质量（g ）
X ：25ml 提取液（氯仿样液）中所含山梨酸的量（g ）（从标准曲线查得）
六、仪器操作规程
1、打开计算机电源，启动Windows 系统；
2、打开仪器电源开关；
3、打开电脑桌面仪器工作站图标，点击“链接”，仪器自动进行自检，预热30分钟；
4、基线校正：进入程序操作界面→方法设定→置入空白（参比）溶液→点击仪器条上“基线”，点击“确定” →点击“λ到波长”，输入一适当波长值，点击“确定” →点击“自动调零”（基线校正1-2次）；
5、样品测定：置入样品（参比置于内池，样品置于外池）→点击“开始”（吸光度测定）→保存图谱及数据，数据处理→结束；
6、测定完毕后，点仪器条上“断开”，关闭仪器工作站程序→关闭仪器电源开关→关闭电脑主机→关闭总电源。
七、注意事项
1、在开启仪器前，一定要先熟悉仪器操作规程。
2、注意比色皿的拿取，小心操作。
3、移取酸液时小心操作，防止被酸灼伤。
八、思考题
1、从本次实验结果而言，食品中添加的山梨酸是否超标？
2、相关系数R 的意义？。