细菌学卫生检验种类及标准.ppt

分离培养 可疑菌落
增菌培养
形态观察
生化反应
血清学鉴定
结果报告
药物敏感试验
5
细菌学检验报告原则
• 分级报告 • 一级报告：直接涂片染色结果及培养结果 • 二级报告：分离培养及药敏结果 • 三级报告：细菌种属、药敏结果、结果评价和建
议
6
7
无菌原则 正确采 样时间
正确采 样部位
足够样本量
多样性采集 做好记录
2.注意保温，不可置冰箱保存，因为会使病原菌 死亡，尤其是脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌及流 感嗜血杆菌；
3、脑脓肿吸出物尚须检测厌氧菌和寄生虫
培养基选择：普通血培养瓶、厌氧血培养瓶、血平皿、
中国蓝平皿、流感嗜血杆菌平皿等。
15
（二）细菌学检查 1．涂片检查：革兰染色：查找一般细菌，尤其脑
膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和链球菌多见。抗酸染 色：查找结核分枝杆菌。墨汁染色：查找新型隐 球菌。 2．细菌培养：脑脊髓液培养多数需3～4天，在 此期间如有细菌生长，经鉴定报告“××菌”，同 时报告药敏试验结果。
血培养
二级报告
一级报告
三级报告
“检出***菌”，药敏试验结果； 7天仍无生长现象，报告为“7 天培养无细菌生长”（结核可
培养8周报告阴性）
13
（二）细菌学检验
14
二、脑脊液标本细菌学检验
（一）标本的采集与送检 1. 采样：腰椎穿刺术无菌采集脑脊液3-5ml，床边接种
或放入无菌试管中，立即送检（采样到送检不超过1h）；
8
一、血液标本细菌学检验 二、脑脊液标本细菌学检验 三、穿刺液和引流液标本细菌学检验 四、尿液标本细菌学检验 五、脓液和分泌物标本细菌学检验 六、痰液标本细菌学检验 七、生殖道标本细菌学检验 八、粪便标本细菌学检验
9
一、血液标本细菌学检验
种类 常见病原菌 G+球菌 金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、
化脓链球菌、草绿色链球菌、肠球菌
G+杆菌 结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加特纳菌
G-球菌 脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌，卡他布兰汉菌
G-杆菌 真菌
大肠埃希菌、铜绿假单胞苗、克雷伯杆菌、肠杆菌、变 形杆菌、沙雷菌、沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、嗜 血杆菌
念珠菌、曲霉菌、隐球菌、球孢子菌
厌氧菌 拟杆菌、产气荚膜梭菌
液、腹水为5-10ml 3、收集送检：无菌收集并置于无菌抗凝试管送检
，无法立即送检可冷藏；标本还可床边接种或置厌 氧运送培养基内送检，无法立即送检可室温保存。
18
（二）细菌学检查
1、标本处理：①浆液离心沉淀物涂片；②脓液直
接涂片；③含血细胞，加等量蒸馏水破坏红细胞后， 离心沉淀物涂片
2、涂片检查：这类标本因原部位是无菌的，只要
16
1. 不染色镜检 2. 革兰、抗酸、墨汁染色
离心涂片，同时增菌
离心沉淀物或増菌培养物
脑脊液
单菌落涂片染色
床边接种
报告单
17
三、穿刺液和引流液标本细菌学检验
（一）标本的采集与送检 1、标本来源：胸腔积液、腹水、心包积液、关节
液、胆汁、鞘膜液深部组织液等 2、标本量：心包积液、关节液为1-5ml，胸腔积
第七章 细菌学卫生检验种类及标准
邵丽军
1
主要内容
第一节
体液、分泌物及排 泄物细菌学检验
第二节
各种环境标本细菌学检 验及卫生标准（自学）
2
临 床
第一节
体液、分泌物及排 泄物细菌学检验
检
验
流
确定检查目的和方法
程
正确规范的采集和运送标本
应用良好的检测技术和方法，提供准确的结果或报告
临床感染性疾病的诊断和治疗
3
细菌学鉴定方法
• 1、形态结构检查 • 2、细菌生长特性检查如菌落 • 3、生化试验 wk.baidu.com 4、血清学试验 • 5、药敏试验 • 6、细菌毒素检测 • 7、分子生物学检测 • 8、噬菌体分型试验 • 9、动物试验
4
临床标本常规细菌学检验程序
标本选择 标本采集与运送 观察标本、前处理
直接涂片
快速检验
10
（一）血液标本的采集与送检 1. 采样时间：发热期、用药之前、 病情发展 2. 采样部位及频率：多部位、高频率 例1：亚急性心内膜炎：24h内在三个不同部位采
集3次血标本，两次间隔不少于15分钟，如培养 阴性，就再采3次血标本。 例2：急性脓毒血症：在10分钟内在不同部位采2 ～3次血标本。
用中段尿采集法、导尿法和膀胱穿刺法采集标本
无菌导尿管采集尿液，在排出15ml尿液后收集，有潜在 引入尿道菌的危险；留置导尿管采尿，先以75%酒精消 毒导管口，用无菌注射器收集10ml；长期留置导尿管患 者，应在更换新尿管时留取尿标本。
20
2、采集时间：通常应采集早晨起床后第一次尿 液，在抗菌药物应用之前采集尿液10-15ml
11
3. 样本采集的量：成人血量5～10ml，婴儿1ml ～2ml，儿童3ml～5ml；当怀疑为真菌感染时 ，应采集双份量，分别作双相培养(37℃/28℃) 。
4. 样本的送检：尽快，室温 5. 操作：直接采血注入含増菌肉汤的培养瓶或用
不含防腐剂的肝素抗凝管至实验室接种，需同时 做需氧和厌氧培养
12
检出细菌即可诊断感染的类型，故直接涂片很重要。 革兰染色：查找一般细菌。抗酸染色：查找结核分枝 杆菌。
3、分离培养及鉴定：离心沉淀物分别接种增菌肉
汤、血琼脂平板、中国蓝或麦康凯琼脂平板、厌氧血 琼脂平板。如有细菌生长，需进一步鉴定和药敏试验 后报告。
19
四、尿液标本细菌学检验
（一）标本的采集与送检 1、采集方法：防止尿液被尿道口菌群污染，采
尿液菌，培养结果才有临床意义。② 离心沉淀物 分别接种血琼脂平板、中国蓝或麦康凯琼脂平板 或疑似菌相应培养基，可疑菌落进行涂片、染色 、生化鉴定、药敏等。
22
3、结果报告
① 涂片镜检，报告形态特点和染色情况； ② 尿液细菌计数，如为革兰阳性菌＞104CFU／m1
；如为革兰阴性菌＞105CFU／m1，可诊断为泌 尿系感染。 ③ 10％的尿路感染者可能在同份尿标本中分离到两 种细菌，并都是病原菌。但当检出3种或以上不 同微生物，认为标本被污染。 ④ 分离到的细菌，经鉴定及药敏试验后，可报告“ 检出***菌，药敏结果是***”；48h无细菌生长 ，报告阴性。报告“2天培养无细菌生长”。
3、送检：及时送检，室温不超过2h；冷藏不超 过8h；淋病奈瑟菌和厌氧菌培养应保温送检。
21
（二）细菌学检查
1、显微镜检查：离心沉淀物涂片。根据临床情
况选择染色方法如革兰染色和吕氏美蓝染色（淋 球菌）、抗酸染色（结核分枝杆菌）、暗视野显 微镜直接观察（钩端螺旋体）。
2、分离培养及鉴定：①必须做倾注培养法计数