中药鉴定新技术新方法及其应用

名词解释

1.生物效价检测：中药指纹图谱系指中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段（光谱、波

谱、色谱等技术），得到的能够标示该中药材或中药制剂样品组分群体的特征图谱。

2.中药脉序图谱--夹角：又称“分叉角”，指在叶脉的分支点以上，分支与源脉延伸方向之间的夹角。

3.电泳：指分散系中带电的分子或颗粒在外加电场的影响下，向电极移送的现象。

4.DNA条形码：用单一的小片段基因序列来区分物种，作为物种的条形编码。

5.PCR：即多聚酶链式反应，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，是体外酶促合成

特异DNA片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环

进行，使目的DNA得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。

6.中药脉序图谱鉴別法：指在自然光或灯光的条件下，用肉眼或放大镜（少数用中、低倍显微镜）观测

叶片，通过比较不用种类植物之间的脉序类型、各级叶脉、叶齿内脉（叶缘

齿中的叶脉）以及它们表现等方面的差异，来鉴别植物或中药的品种、真例

的方法。

7.LC-MS：液-质联用技术，是液相色谱和质谱的在线联用，此在线联用可充分发挥液相色谱的分离功能

和质谱仪的高灵敏度及高选择性定性分析功能，来获取复杂混合物的所含化学成分的轮廓和

混合物中单一成分的结构信息。

8.毛细管电泳（CE）：带电粒子在高压直流电场的驱动下，在毛细管中按其淌度或分配系数不同进行高

效、快速分离的电泳新技术。

9.电渗流：毛细管电泳所用的石英毛细管柱，在ph>3的情况下，其内表面带负电，和缓冲液接触时形成

双电层，在高压电场的作用，形成双电层一侧的缓冲液由于带正电荷而向负极方向移动形成电

渗流。

10.ELSA：即酶联免疫吸附试验法，由于酶的高效生物催化作用，一个酶分子在数分钟内可以催化几十、

几百个底物分子发生反应，产生了放大作用，使得原来极其微乎其微的抗原或抗体在数分钟后

就可被识别出来的技术。

11.中药微性状鉴别法：借助仪器观察中药材的表面（包括断面）肉眼不易察觉的细微性状特征并以此

作为鉴定依据的一种鉴别方法。

12.叶脉：贯穿于叶肉的维管束。

13.免疫原性：抗原刺激机体产生免疫反应的性质。

14.反应原性：抗原与免疫反应产物发生特应性结合的性质。

15.X射线衍射分析法：用于分析物质的物相组成，各物相的晶状体结构，各种结构基元（分子、链段、

原子团、原子或离子）在空间的排布的一种分析技术。

16.中药指纹图谱：中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段（光谱、波谱、色谐等技术），

得到的能够标示该中药材或中药制剂样品组分群体的特征图谱。

17.中药色谱指纹图谐：一种综合的、可量化的色谱鉴定手段。借以鉴别真伪、评价原料药材以及半成

品和成品质量均一性和稳定性。其基本属性是“整体性”和“模糊性”。

简答

1.指纹图谱常见研究方法

（1）光谱法：紫外光谱（UV）、红外光谱（IR）、荧光光谱（FS）、核磁共振谱（NMR）、质谱（MS）（2）色谱法：薄层色谱（TLC）、高效液相（HPLC）、气相色谱（GC）、毛细管电泳（HPCE）、高效逆流色谱（HSCCC）、超临界流体色谱（SFC）

2.液质联用常用的两种电离方式（离子源）

（1）电喷雾（ESI）

（2）大气压化学电离（APCI）

3.电感耦合等离子体发射光语（ICP－OES）仪器特点

①除稀有气体、卤素、氮、氧等以外的约70余种元素都可以在10-6-10-9g/ml的量级进行高灵敏度的分析；

②可以进行多种元素的快速同时测量；

③精密度高（浓度为检出限的10倍时，误差为3%-5%)；

④校准曲线线性范围可达4－5个数量数（痕量到常星的元素分析）；

⑤由于等离子温度高，化学干扰及离子化干扰影响小；

4.简述中药显微数量分析鉴别法的基本操作步骤及显微测量、计量的方法。

①基本操作步骤：1）取样：2）制片：3）显微观察、寻找研究的显微特征；

4）显微测量、计量：5）数据处理。

②显微测量方法：在光学显微镜下，用测微尺测量每个显微特征，如纤维、石细胞等的长度、直径等数

值，每个测量数值不少于20个数值。计算最大值、最小值和平均值。

③显微特征计量法：将每个样品制片平分为9个区域，分别在各区域光学显微镜下，用网格测微尺统计

一个观测视野中显微组织特征，如淀粉粒、草酸钙簇晶等的数量，合并数据，计算

单位面积的数量：每样品观测5张制片，统计平均值、标准差。

5.HPCE与普通电泳的区别？

6.简述中药指纹图谱的必要性和可行性。

1）中药（包括中成药）缺乏质量控制的方法手段；

2）借鉴化学药的质量控制方法；

3）中药内在有效成分或指标成分的定量定性分析——控制药品质量；

4）中药成分多样性——不能用一两化学成分来评价它的质量；

5）物质群的整体控制；

6）现代色谱技术和波谱技术将药材中所含有的成分进行分离并给出质量相关的数据；

7）指纹图谱当前带动中药工业现代化的关键技术。

7.简述影响毛细管电泳电滲流的因素。

电渗流大小受到Zeta电势、双电层厚度和介质粘度的影响，一般Zeta电势越大，双电层越薄，粘度越小，电渗流越大。改变外加电场、改变缓冲液成分和浓度、改变缓冲液PH均能改变Zeta电势；加入添加剂、改变温度则能影响介质粘度。

8.简述抗原抗体的基本原理。

抗原与抗体能够特异性结合是基于两种分子间的结构互补性与亲和性，这两种特性是由抗原与抗体分子的一级结构决定的。抗原抗体反应可分为两个阶段：第一为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，该阶段反应快，但不出现可见反应；第二为可见反应阶段，抗原抗体复合物在环境因素（如电解质、pH、温度）的影响下，进一步交联和聚集，表现为凝集、沉淀、溶解等肉眼可见的反应，此阶段反应慢。