肌酸激酶ppt课件

▪ CK有四种同功酶形式：肌型(CK-MM)、脑型(CK-BB)、杂化型 (CK-MB)和线粒体型(CK-MtMt)。CK-MM型主要存在于各种肌 肉细胞中，CK-BB型主要存在于脑细胞中，CK-MB型主要存在 于心肌细胞中，CK-MtMt型主要存在于横纹肌线粒体中
▪ CK主要存于胞浆中，少量存在于线粒体、微粒体中
▪ 巨CK1(M-CK1)：巨分子酶，多为CK-BB与IgG或IgA 的复合物，少数为CK-MM与IgG或IgA的复合物
▪ 巨CK2(M-CK2或CK-mt):存在于线粒体膜上，线粒 体崩解时随碎片进入血液，呈低聚状态
▪ M-CK1不被抗CK-M抗体抑制，活性被100%测出。故 在测CK-MB活性时，测得的CK-MB活性假性增高
▪ 此法所测值常高于其它方法：可能与CK-MM分为1、2、3亚型有 关。一般抗MM血清对MM3抑制较好，但对MM1抑制较差。正常情 况下血中MM亚型的存在以MMl为主，故导致正常值明显偏高。 AMI第一天血中以MM3为主，但第二天以后则以MMl为主
-
8
免疫抑制法检测CK-MB活性原理图解
-
9
▪ 注意，红细胞及许多组织中都含有腺苷酸激酶(AK)，催化下
列反应：2ADP AK
ATP+AMP,也影响CK-MB 的测定结
果偏高，故测定CK活性尽量不用溶血标本
▪ AMP及五磷酸二腺苷（AP5A）能竞争性地抑制肌肉及红细胞中 的AK，试剂中加入AMP及AP5A，能有效抑制AK的干扰, 抑制率 可达90%～95%
▪ NaF能抑制AK,但也能和CK激活剂Mg2+ ，逐渐形成 MgF2沉淀，所以NaF与Mg2+分开配制，临时 混合
▪ CK同工酶半衰期短，故酶活性的高低受标本 采集时间的影响也较大
-
10
▪ 2.琼脂糖凝胶电泳法：特点：准确可靠；缺点：灵敏性较差
▪ 原理：在电泳条件下，CK-BB迁移最快，CK-MB居中，其次CKIg的复合物（巨CK1型）， CK-MM最慢
▪ 电泳法血清CK同工酶正常值：CK-MB<5%；CK-MM>94%-96%； CK-BB 无或极少量
▪ M-CK2绝大多数不影响CK总活力升高
-
6
常见CK家族成员分布及比例列 表
1.1 2.7 20
小肠
8
子宫 前列腺
甲状腺
5-16 34-39
4-26
2-20 2-6
-
0-1
64-93
59-60
7
73-96
临床CK常用检测方法
▪ CK同工酶检测方法包括1.酶活性法：免疫抑制、电泳、离子交 换层析、放射免疫、化学荧光等；2.酶质量法：mass质量法等
▪ 3.酶质量法-mass质量法：其原理是利用CK-MB抗原性，根据 抗原抗体反应测CK-MB酶蛋白浓度，单位为μg/L。准确性高 ，但检测时间长
▪ 4.酶质量法：近年来应用CK-MB单克隆技术制备出特异性极高 的只和CK-MB作用的抗体血清。方法简单，特异性高，是目前 重点发展的方法，国内应用不多
▪ 1.免疫抑制法:具有简单、快速、不需手工操等特点，临床多用 。
▪ 原理：正常人血清CK-BB极少可忽略不计，应用单克隆抗体与CK 中的Βιβλιοθήκη Baidu亚基结合，抑制CK-MM及CK-MB中的M亚基活性，通过速率 法测定B亚基, 结果乘以2即CK-MB活性
▪ 免疫抑制法的原理是假定标本中无CK-BB活性。但在某些因素下 CK-BB升高, 必定影响CK-MB测定结果，甚至出现CK-MB＞CK
肌酸激酶及其临床意义
郑大五附院重症医学科 石宗华
-
1
？？
▪ 什么是肌酸激酶（CK）？ ▪ CK升高有什么意义？ ▪ CK有几种同工酶？ ▪ CK家族成员有哪些？ ▪ CK-MB升高-----心肌梗死？ ▪ CK-MB不升高-----排除心肌梗死？ ▪ CK-MB能高于CK么？ ▪ 有哪些因素能导致CK升高？
-
2
肌酸激酶
▪ 肌酸激酶( CK)，旧称磷酸肌酸激酶，参与能量代谢，分子 量81000，两个亚基组成
▪ ADP+磷酸肌酸
CK
ATP+肌酸
▪ CK在人群中不是正态分布，正常人CK变动与人种、性别、 年龄、肌块大小、体力活动等有关。安静时血清CK总活性
：男：10-100U/L，女：10-60 U/L
▪ 临床上测定的血清CK指的是CK的总活性
▪ 2.巨CK1的干扰：正常情况下相应的酶有着高分子团，不被抗 CK-M抗血清所抑制，表现为CK-MB/CK＞50％，而CK活力正常或 轻度或中度增高,CM-MB的假阳性升高。如炎症、恶性肿瘤等
▪ 3.溶血的干扰。红细胞中含有腺苷酸激酶(AK)能使CK-MB的测定 结果假性升高
▪ 4.当CK含量很高时，M亚单位含量同样很高，此时试剂中抗M抗 体量可能不足，M亚单位没有全部被抑制，CM-MB结果明显偏高 。如剧烈运动等
▪ 正常情况下，CK极少透出细胞膜，细胞外液中CK浓 度仅是细胞内液的1/10000-1/1000
-
4
CK及其同工酶的分布表
CK亚基 M B
CK同工酶 MM
MB BB
主要组织部位
骨骼肌、平滑肌
心肌 脑
Mt
MtMt
肝脏、横纹肌线
粒体中
-
5
▪ 临床上，CK家族除了CK-MM、CK-BB、CK-MB、CKMtMt外，还存在巨CK1(M-CK1)、巨CK2(CK-mt)
▪ 熬夜、过劳、剧烈运动、某些药物(如秋水仙碱)也会使肌 酸激酶增高
▪ 运动后人体血清CK活性升高：一是运动使肌细胞膜通透性 升高；二是运动导致肌细胞损伤
▪ 血清中CK升高一般提示含CK的细胞通透性增高或细胞的破
坏
-
3
CK家族成员分布及比例
▪ CK分布于骨骼肌、心肌、脑、 胃肠平滑肌、甲状 腺、肺组织中。以骨骼肌含量最高，其次为心肌， 再其次为脑和胃肠平滑肌
▪ 酶质量法和免疫抑制法所测结果有时不一致：酶变性失活但 仍保留抗原性，此时用测酶活性的方法结果会偏低
▪ 临床中免疫抑制法测定CK-MB，当CK-MB/CK超过30%时，如无
溶血，须警惕巨CK1或CK-BB存在，应进行CK同工酶电泳法鉴
别
-
11
小结:影响CK-MB结果的因素
▪ 1.当CK-BB CK-BB存在时，不能被免疫抑制法抗CK-M抗体所抑制 ，故测定得的CK-MB 的检测值偏高，甚至高于CK总 活性检测值 ｡如:颅脑损伤､前列腺恶性肿瘤､新生儿､婴幼儿等