鹿人工授精技术要点

鹿人工授精技术要点
赵伟刚魏海军
(中国农业科学院特产研究所吉林长春130112)
随着科学技术的不断发展进步，利用鹿的繁殖生理原理，在鹿的繁殖过程中采用同期发情、冷冻精液、人工授精及早期妊娠诊断等先进新技术，可以加快鹿的繁殖和育种工作，大大提高了养鹿业的生产水平和生产能力，加速茸鹿品质改良，提高鹿产品数量和质量，推动养鹿业持续健康稳定发展。

一、人工采精
1、假阴道采精
用木或铁材料制成形似母鹿的外型，包上鹿皮，在后臀适当部位留出安装假阴道及保温装置的孔直及空间。

以硬质橡胶管做外壳，软质橡胶做内胎，中间设一注水打气阀孔做成假阴道。

将假阴道安装在采精场内假台鹿的适宜部位，立即拨赶供试公鹿入采精场诱其爬跨假台鹿，使公鹿阴茎插入假阴道内射精。

2、电刺激采精
采精公鹿用专用麻醉药麻醉使其侧卧保定，保定好公鹿的四肢，掏出直肠内的宿粪；用剪毛剪剪短尿道口附近的长毛，用刺激性较小的消毒剂清洁尿道口部位，导出阴茎并用绷带将龟头下端阴茎缠绕数圈，使龟头露出，将一条干净的毛巾覆盖在尿道口前部，然后将直肠探子插入直肠20~25 cm并使电极部位与直肠腹面接触，打开电压开关，一档一档升高电压，间断性刺激公鹿射精中枢，直至射精。

将精液收集到温热的集精杯中，避免冷打击。

此外还有按摩法、附睾取精和阴道取精法，目前应用较少，这里不作介绍。

二、精液检查及稀释
正常精液为乳白色或乳黄色。

正常情况下精液无味或微腥。

采到的精液立即送到实验室，先加少量稀释液，取一滴初步稀释的精液置400~600倍显微镜下精子检查密度和活力，确定是否继续稀释或确定稀释倍数。

原则是预计解冻后每管冻精含有有效精子数不少于1500万。

稀释时，将与精液等温（38℃左右）的稀释液用干净消毒后的滴管沿试管壁缓缓加入精液中，并慢慢转动试管使其混合均匀（不能摇动或剧烈震荡）。

边稀释边镜检，直到稀释到恰当的倍数。

三、精液保存
1、常温保存
根据精液的活力和密度用常温稀释液将精液稀释，在无剧烈温度变化及相对稳定的情况下精液可在常温下保存48~72小时。

2、冷冻保存
（1）平衡将稀释好的精液用硫酸纸封好管口，再用棉片包好试管或将装有精液的试管装入与精液等温的水杯中，放入4~5℃的冰箱中缓缓降温平衡3~5小时。

（2）分装将平衡好的精液分装装管，有条件的可使用分装机分装，如没有分装机可进行手工分装，用一次性注射器将精液抽到细管中（注意在抽精液的过程中不要使细管中混有空气），另一端要留有1㎝的空隙，用封口粉封口。

另外据现场经验，可以选将稀释好的精液进行分装，再用毛巾多层包裹进行平衡效果更佳。

（3）冷冻分装后的细管精液可用程序降温仪进行冷冻，如无条件可进行手工冷冻，将细管精液平放在距液氮面2-2.5cm的铜纱网上停留10-15分钟，等精液冻结后，打开冷冻容器盖子，冻精按鹿号投入盛满液氮的不同提筒中，细管的封口端在上，棉塞封口端在下，不得倒置，并迅速浸泡在液氮中。

在冷冻过程中注意液氮液面的高度，细管精液距液氮面过低或过高，都会造成精子大批死亡。

（4）解冻细管冻精从液氮中取出后立即放入盛有38±2℃温水的杯中，经过5～8秒钟立即取出，待全部融化时，用用吸纸或纱布擦干水珠，即可镜检后装入输精枪内等待输精。

解冻后检查精子活力，达0.3以上，有效精子数1000万/支以上，有效使用时间（上限）1小时。

四、母鹿同期发情
同期发情能在短时间内使畜群集中发情，使母鹿配种妊娠、分娩及犊鹿的培育在时间上相对集中，从而有效地进行饲养管理，进行人工授精，节约劳动力和费用，同时又因配种同期化，对以后的分娩产羔、鹿群周转以及商品鹿的成批生产等一系列的组织管理带来方便，适应现代集约化生产或工厂化生产的要求。

同期发情有两种方法：一种方法是促进黄体退化（前列腺素处理法），从而降低孕激素水平；另一种方法是抑制发情（孕激素处理法），增加孕激素水平。

目前鹿同期发情常用的是孕激素处理法中的阴道栓塞法。

阴道栓为T型，中间有硬塑料骨架，外包被着发泡的硅橡胶，硅橡胶的微孔中有孕激素。

用放置器成品阴道栓送
到母鹿的阴道里。

11～13天左右取出阴道栓，同时每头母鹿肌注250国际单位孕马血清，母鹿将在58~60小时后达到发情高峰，使用这种方法的同期发情率可达80%左右。

也可在取出阴道栓时用公鹿进行试情，母鹿在第一次接受爬跨后12～16小时左右输精，准胎率会有所提高，但操作繁琐。

五、人工输精
目前常用的茸鹿人工输精方法有三种，即开膣器输精法、直肠把握输精方法和腹腔镜输精法。

这三种方法可根据不同鹿种而采取不同方法，目前马鹿母鹿应用最广泛的是直肠把握法，花母鹿常用开膣器或腹腔镜输精法。

1、直肠把握输精法
适用于体型较大的马鹿母鹿或手小能伸入骨盆腔口的梅花鹿母鹿，将待输精的母鹿麻醉侧卧保定，马母鹿可用保定器站立保定。

操作者剪平指甲戴好长臂医用手套，并在手套表面涂上温热的专用润滑剂，插入直肠，排出宿粪，隔直肠壁握住子宫颈，使阴道和子宫颈大致成一条直线，另一手持装有细管精液输精枪，经由阴道前庭入口缓缓前伸插入子宫颈阴道开口，通过子宫颈管内3~5个皱褶，将精液输入到子宫颈深部或子宫体内，然后撤出输精枪，同时给母鹿肌注促黄体素释放激素A3 25微克。

2、开膣器输精法
此法适用于不能进行直肠把握输精操作的母鹿，其主要过程与直肠把握输精法相同，不同的是操作者使用专用的开膣器缓慢插入母鹿阴道，使开膣器前端紧靠子宫颈口处，借助灯泡光亮，找到子宫颈口，然后将输精枪插入子宫颈阴道开口完成输精，同时给母鹿肌注促黄体素释放激素A3 25微克。

3、腹腔镜输精法
将待输精的母鹿麻醉并保定在特制的手术架上，剪去腹中线到乳房前的腹毛，洗净消毒处理后，在母鹿腹部距乳房15㎝处在腹中线左侧用7mm的套管和探针打一孔，放入充气管，充入CO2，将内窥镜管通过套管插入母鹿腹腔内，观察子宫角及排卵点情况，在对侧相同部位，用手术刀片划入一小口约1.5cm, 操作者用专用输精针从另1个小口将精液注入双侧子宫角远端1/3处，然后消毒缝合，肌注25微克促黄体素释放激素A3和160万单位青霉素后完成输精。

直肠把握法和开膣器法操作简单，而腹腔镜输精法则解决了因梅花鹿体型小、子宫
颈特殊导致的不易通过子宫颈输精的难题。

另外，由于实行精准输精，还可以显著减少精液用量，进一步提高了优秀种公鹿的繁殖效率，降低了输精成本，特别适合极其珍贵的种公鹿精液或X、Y分离精液的输精。

六、补配
人工输精结束后，对母鹿须进行查漏补配，第一种方法是用公鹿试情，揭示出的复发情母鹿继续实行人工输精，这样利于后代血统。

第二种方法是采用试情揭示出复发情母鹿，利用本场的高产种公鹿进行本交。

第三种方法是人工输精结束后10~12天往母鹿圈中放入一只种公鹿让其自由交配，不用试情，这种方法提高准胎率，但系谱不清。

七、妊娠诊断
鹿饲养者通常都想及早了解自己所饲养的母鹿是否怀孕及人工授精母鹿的受胎率。

根据妊娠状况，饲养者可以对整个鹿群的喂养、繁殖和产仔管理做出相应的计划。

掌握母鹿怀孕状态是非常有价值的。

1、直肠触诊技术
这项技术应用于马鹿。

一般是在妊娠的第40～50天间进行，通过直肠壁感触子宫情况。

技术员可以通过触摸来判断胎盘或胎膜是否形成。

此法如操作不当对鹿会造成过度应激。

2、超声波扫描技术
使用超声波扫描技术对家畜进行妊娠诊断现已非常流行，一般在妊娠45天左右进行，方法是将探头从直肠伸进母鹿体内，探头所发出的超声波到达子宫，如果子宫里的胚或胎儿在显示器上成像，就可以判定母鹿已经怀孕。

该技术可区分人工授精后代和返情复配后代，准确率非常高。

此外，妊娠诊断还有血液黄体酮测定技术、粪便中类固醇激素代谢物测定技术和PSPB技术，相对比较繁琐，这里不作介绍。