实验六 果蝇唾液腺染色体的观察及制备.
果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告
果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告果蝇唾腺染色体标本的制备与观察实验报告一、实验原理双翅目昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色体。
这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约400um，相当于普通染色体的100—150倍，因而又称为巨大染色体。
唾腺染色体处于体细胞染色体联会配对状态。
并且唾腺染色体经过多次复制而并不分开，每条染色体大约有1000—4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体。
多线染色体经染色后，出现深浅不同、密疏各别的横纹，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征；如染色体有缺失、重复、倒位．易位等，很容易在唾腺染色体上识别出来。
各染色体的异染色质的着丝粒部分互相靠拢形成染色中心；横纹有深浅、疏密的不同，各自对应排列，这意味着基因的排列。
唾腺染色体广泛应用于细胞遗传学、发生遗传学、进化遗传学及分子遗传学的研究中。
二、实验材料果蝇的三龄幼虫三、实验器材双目解剖镜，生物显微镜，解剖针，载玻片，盖玻片，滤纸条，废物缸，托盘等。
四、实验试剂生理盐水，盐酸，蒸馏水，改良苯酚品红染色液等。
五、实验步骤1.剥离唾腺：在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。
每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。
由于果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持解剖针按压住虫体前端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。
剔除脂肪体并弃除无关物质。
2.解离：加一滴45%乙酸溶液于腺体上，作用5-7s。
用滤纸吸干溶液。
在唾腺组织上滴一滴1mol/lLHCl，解离30-40s，以松软组织，利于染色体的分散。
3.吸去 HCl，用水冲洗2-3次.4.染色：滴加改良苯酚品红染液染色30min,染色时间不可过长，否则背景也着色。
果蝇唾腺染色体的制备与观察
实验方法
把载玻片置于解剖镜下。载玻片上滴水一滴， 取三龄幼虫放在其中，操作者两手各握一枚解 剖针，左手的解剖针压住幼虫后端１/３处， 固定幼虫。右手解剖针按住幼虫头部，用力向 右拉，把头部从身体拉开，唾腺随之而出，唾 腺是一对透明的棒状腺体
在载玻片上除去幼虫其他组织部分，还要把 唾腺周围的白色脂肪剥离干净，再滴上改良 苯酚品红染色。
4.横纹结构：每条染色体的染色线在不同的 区段螺旋化程度不一，出现一系列宽窄不 同、染色深浅不一或明暗相间的横纹。
5.Puff结构：幼虫 的不同发育期，浓 缩的染色质纤维会 成群解旋、松开， 形成泡状松散结构， 这种泡状结构称 Puff结构，亦称染 色体的疏松。
三、实验用品
实验材料 果蝇的三龄幼虫 用品 解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、 盖玻片、吸水纸等
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普通果蝇（2n=8）唾腺染色体的形态：各染色体 着丝点附近异染色质区相互结合形成染色很深的 染色中心，第Ⅱ、Ⅲ对染色体呈Ｖ形（中着丝 粒），各有两臂，Ｘ染色体呈棒状，第Ⅳ对染色 体呈粒状，观察时可见五条臂由染色中心向外蜿 蜒伸展。
果蝇唾腺染色体的特点：
1.巨大染色体：这种染色体比普通染色体大 得多，宽约5μm，长约400μm，相当于普通 染色体的100—150倍，因而又称为巨大染色 体。
果蝇唾腺染色体的制 备与观察
一、实验目的
练习取出果蝇幼虫唾腺的技术和制作唾腺 染色体标本的方法；������
了解体细胞染色体联会现象，观察果蝇唾 腺染色体的形态特征，并根据唾腺染色体 上横纹的形态和排列，识别不同的染色体 识别染色体结构变异的细胞学表现。 练习绘制多线染色体图Βιβλιοθήκη 二、实验原理
果蝇唾液腺染色体观察实验报告
果蝇唾液腺染色体观察实验报告果蝇（Drosophila melanogaster）是一种常见的模式生物，在遗传学研究中有着重要的应用价值。
果蝇唾液腺染色体观察实验是一种常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化，为遗传学研究提供重要的数据支持。
本实验旨在通过对果蝇唾液腺细胞进行染色体观察，掌握染色体的基本结构和形态特征，为今后的遗传学研究奠定基础。
实验材料和方法。
1. 实验材料，成年果蝇、盐酸乙醇、醋酸乙酯、苏木精、酒精、冰醋酸、苏木素、甲醛、石蜡等。
2. 实验方法：（1）取一只成年果蝇，用镊子夹住果蝇的头部，将果蝇的身体用另一只镊子拔去。
（2）将果蝇头部置于盐酸乙醇中，浸泡5分钟，然后用镊子将头部转移到醋酸乙酯中，浸泡5分钟。
（3）将处理后的果蝇头部转移到苏木精中，浸泡5分钟，然后用酒精逐级脱水，最后转移到冰醋酸中浸泡5分钟。
（4）将果蝇头部转移到甲醛中，固定30分钟，然后用苏木素染色，再经过酒精逐级脱水，最后转移到石蜡中浸泡。
（5）将处理后的果蝇头部置于石蜡中，浸泡30分钟，然后取出制作切片，用显微镜观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构。
实验结果和分析。
经过实验操作，观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以看到染色体呈现出条状的形态，其中可以清晰地看到染色体的着丝粒和染色单体。
染色体的数量在观察的过程中也得到了初步的统计，一般情况下，果蝇唾液腺细胞的染色体数量为8条。
结论。
通过本次实验，我们成功观察了果蝇唾液腺细胞的染色体结构，了解了染色体的基本形态特征和数量变化。
这为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
总结。
果蝇唾液腺染色体观察实验是遗传学研究中常用的实验方法，通过观察果蝇唾液腺细胞的染色体结构，可以了解染色体的形态和数量变化。
本次实验的成功进行，为今后的遗传学研究提供了重要的数据支持，也为我们进一步深入了解果蝇的遗传特性奠定了基础。
果蝇唾液腺染色体标本的制备与观察
果蝇唾液腺染色体标本的制备与观察一.实验目的通过实验掌握果蝇唾腺染色体的制片方法，了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点并练习解剖果蝇幼虫的技术。
二.实验原理唾腺染色体是一类存在于双翅目昆虫的幼虫唾液腺内的巨大染色体。
果蝇的唾腺染色体是典型的巨大染色体，它的巨大性的成因是核内有丝分裂造成的。
由于其染色体DNA经过多次复制（可达210～215次），但并未发生细胞核分裂，同时唾腺细胞中的染色体总是处在配对状态即体细胞联会，重复复制后的染色体聚集在一起，所以在显微镜下看到唾腺染色体要比一般的染色体大得多，又称多线染色体。
三.实验用品1.实验材料：普通果蝇的三龄幼虫、生理盐水2.实验器材和试剂：双筒解剖镜、显微镜、解剖针、改良苯酚品红溶液、HCI四.实验方法和步骤1. 幼虫的培养为了在解剖镜下便于操作，使用的幼虫应发育充分而且个体较大。
在实验中，人们通常采用两个措施控制幼虫的生长。
A.良好的培养基提供了果蝇生长发育的必需营养，因此在培养瓶内放置的亲本不易过多，否则将产生过多的卵而造成养分不足。
B.培养果蝇的环境温度应比正常培养时略低一些，一般可控制在16～20℃范围内，低温下生长的果蝇个体较大。
果蝇属于完全变态的昆虫，成虫交尾后将卵产在培养基内。
在适宜的温度下，卵发育为幼虫并经过一、二龄幼虫的发育后，三龄幼虫要爬到瓶壁上化蛹，为了能够在实验时获得较多的幼虫，可以分批将亲本放入培养瓶。
实验时从培养瓶的瓶壁上挑选那些发育良好的、个体较大的幼虫。
2. 剖取唾腺用解剖针从培养瓶内挑取1只三龄幼虫置于载片上，并滴加1滴生理盐水。
将载片放在载物台上，用解剖镜进行观察。
首先将幼虫的头尾分清，果蝇的头部有一黑点（口器），头部不断作伸缩状。
解剖时，双手各持一个解剖针，一支针先压在幼虫身体的前1/3处，另一支针压住果蝇头部并向前轻轻移动，即可将头部与身体拉开，仔细观察可看见一对透明做白的囊状体即为唾腺。
在唾腺前端各伸出一条细管在前面汇合成一总管。
果蝇唾腺染色体标本的制备与观察
果蝇唾腺染色体标本的制备与观察摘要：多线染色体广泛存在于双翅目、弹尾目的消化道及消化腺细胞中。
为遗传学，尤其是果蝇研究带来不少便利。
不论在经典细胞遗传学时代，还是当今的基因组时代，多线染色体都对遗传学研究有着重要的意义。
本次实验中，我们使用果蝇三龄幼虫唾液腺的染色体为材料制备、观察。
分辨了果蝇的不同染色体，练习了果蝇唾腺染色体标本的制备与观察。
染色体研究通常面临两个困难：一是染色体很小；一是初级少数动植物，如玉米祖先期的染色体上具有染色体里这样的结构可以作为识别或定位的标志外，大多数生物的染色体都没有标志。
而作为遗传学研究的模式生物黑腹果蝇，有丝分裂中期的染色体格外小。
多线染色体就是在这样的背景下被重新发现的。
多线染色体最早在要闻幼虫的唾液腺中发现。
广泛存在于双翅目、弹尾目的消化道及消化腺细胞中。
这些戏胞发育到一定阶段后，停止在间期，，但紧密配对的同源染色体不断复制。
，而复制后产生的染色体彼此不分开而形成。
少数植物中也发现有多线染色体，但没有昆虫体内的大。
多线染色体为遗传学，尤其是果蝇研究带来不少便利。
一个重要进展是Pardue等1907建立了双翅目昆虫多县染色体的原位杂交方法。
有了这种方发，确定一条RNA或DNA序列在染色体上的位置就变得非常简单。
不论在经典细胞遗传学时代，还是当今的基因组时代，多线染色体都对遗传学研究有着重要的意义。
在本次实验中，我们使用果蝇三龄幼虫唾液腺的染色体为材料制备、观察。
1.实验步骤1.1试验材料显微镜，双筒体式显微镜，解剖针两只，小毛笔一只，眼科镊，载玻片，盖玻片，滤纸片，香柏油，镜头纸，果蝇三龄幼虫，卡宝品红染液，盐酸1mol/L，蒸馏水，生理盐水。
1.2试验方法1.2.1三龄幼虫的饲养培养基富含营养；虫口密度要小；低温培养。
1.2.2剥去唾液腺选取果蝇三龄幼虫放在载片上，加一滴0.7％生理盐求，幼虫以体型大、虫龄长的为好。
将载片置双筒解剖镜下。
解剖针不宜过于尖锐，避免用力时刺破头部，拉不出唾腺，反而不便第二次拉取了。
遗传实验报告果蝇唾腺染色体观察
遗传实验报告果蝇唾腺染色体观察【实验目的】1.练习解剖果蝇幼虫的技术2.掌握果蝇唾腺染色体的制片方法3.了解果蝇唾腺染色体的形态结构特点【实验原理】果蝇为双翅目完全变态的昆虫，幼虫期分三龄。
其幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的多线染色体。
双翅目昆虫的整个消化管细胞发育至一定阶段后就停止有丝分裂，终止在分裂间期。
但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制而并不分开。
经多次复制后，形成约1000~4000拷贝的染色体丝，比普通中期相染色体大得多（约100~500倍），因此又称为多线染色体。
黑腹果蝇染色体数2n=8，存在体联会。
各染色体的着丝粒互相靠拢形成染色中心，由染色体中心向外伸出5条很长的染色体臂和一条极短的染色体。
（如右图）染色体Ⅰ为端着丝粒染色体，所以它的一端在染色中心上，另一端游离；Ⅱ、Ⅲ染色体为中着丝粒染色体，他们从染色中心呈V字形向外伸展，所以分别能看到2L、2R、3L和3R 4条长而宽的“带状物”；点状的第Ⅳ染色体很短小，为端着丝粒。
因此可以见到5条很长的和一条仅靠染色中心的短小的染色体。
在雄性幼虫中，唾腺染色体上不见Y染色体，他捕鱼X染色体联会，而且其着丝粒及其附近的异染色质参与染色中心的形成。
这可能是雄性幼虫唾腺染色体中的X染色体比其他几对染色体相对狭窄一些的缘故。
果蝇唾腺染色体特点：巨大，是多线染色体；有丝分裂停在间期，DNA不断复制，着丝点不分开；同源染色体紧密配对—体细胞联会，染色体呈单倍数。
整个唾腺染色体上分布着染色深浅不同、粗细各异的横纹，这意味着基因的排列。
这些横纹的宽窄、疏密程度以及排列顺序和数目都具有物种的特异性。
黑腹果蝇的多线染色体具有大约5000条横纹。
染色体各条臂的端部，即远离染色中心的游离端恒定的横纹特征，是准确识别各对染色体的重要依据。
在果蝇的特定发育时期，横纹会出现不连续的膨胀，称为疏松区（puff），目前认为这是该部分基因被激活的标志。
果蝇唾液腺染色体制片与观察
三、实验材料
野生果蝇
四、实验步骤
1、剥离果蝇幼虫的唾液腺
取一洁净的载玻片，滴上1滴0.75%生理盐水。在瓶壁 上挑选肥大的充分发育的三龄幼虫放在的生理盐水中，唾 液腺位于幼虫食道的两侧，长度约占身体总长的1/3—— 1/4左右。
解剖时把载玻片放在解剖镜或放大镜下,一手用解剖针压住头部 (外型似一个黑色小点)，压住的地方越小越好，同时，用镊子夹住幼 虫身体1/2处， 轻轻地将幼虫的头部自身体拉开。唾液腺随同内脏一 起拉出。如果头部拉断,腺体没有拉出,可以用解剖针从镊子附近的腹 部缓缓地向头端挤压,也可压出唾液腺。然后在镜下细心分离，理出双 叉形半透明的囊状腺体即为唾液腺，在生理盐水中无论怎样触动它都 不会发生形状改变。
同源染色体的两条臂紧密结合，自由伸展。因 此唾液腺细胞染色体数看不出2n的染色体数， 只能观察到从染色中心向空间伸展的染色体臂。 与其它细胞染色体相比的另一个特点是，唾液 腺染色体上有深浅不同、宽窄不一的带纹，这 些带纹的数目和位置是恒定的，代表着种的特 征和一些基因的位置。
由于这些带纹的存在，染色体上发生缺失、重 复、倒位、易位等很容易在唾液腺染色体上识 别出来。
在显微镜下观察，由单层细胞构成，细胞形状不规则，细胞轮廓 清晰，细胞大，细胞核也大，甚至可以看清细胞核是由染色体卷缩在 一起形成的。唾液腺拉出后，剔除腺体周围乳白色的脂肪组织和身体 的残留部分，只留唾液腺在载玻片上。
2、解离 用滤纸条吸净唾液腺周围的其它物质，然后将唾 液腺放入1N HCl，解离2—3分钟，以松软组织利于 细胞破裂，使染色体散开。 3、水洗 解离后的唾液腺用蒸馏水洗3—4次（或0.4%的 生理盐水），水洗时要注意不要把唾液腺弄丢，水洗 要彻底，目的是洗去盐酸，以免影响染色效果。另外 水洗过程也是细胞低渗过程，使唾液腺细胞膨胀。
果蝇唾腺染色体的标本制备和观察
果蝇唾腺染色体的标本制备和观察摘要多线染色体存在于某些生物特定生命周期的某些细胞中。
本实验观察的多线染色体是果蝇唾腺染色体，在其染色体标本中可以观察到果蝇唾腺染色体形态巨大，由5条长染色体和1条短小的染色体组成，他们聚集在染色中心，横纹条带深浅不一，疏密各异，遍布每条多线染色体臂，有些地方有还胀泡出现。
由于多线染色体因其形态巨大，横纹明显，它常被作为基因定位的良好材料，并且广泛应用于细胞遗传学、发生遗传学、进化遗传学及分子遗传学的研究中。
关键词多线染色体果蝇唾腺染色体横纹胀泡1.引言染色体由DNA和蛋白质构成，作为DNA的载体，有着不可或缺的的作用，因此是科学家广泛研究的材料。
然而染色体的研究通常面临两个困难：一是染色体很小；二是除极少数动植物，如玉米粗线期的染色体上具有染色粒这样的结构可以作为识别或定位的标志外，大多数生物的染色体都没有标志。
而多线染色体的染色体足够大，染色体上的识别标记足够多，这将对遗传学研究将提供不少的便利。
本次实验观察的多线染色体有如下特征：①果蝇唾腺染色体是一种缆状的巨大染色体。
由于果蝇幼虫的唾腺细胞发育至一定阶段就停止有丝分裂，终止在间期，但唾液腺细胞核的染色体仍不断地进行自我复制，但并未发生细胞核分裂，复制后的子染色体彼此不分开，形成了多线染色体，对于黑腹果蝇唾腺染色质的复制可达9次之多，单条染色体臂可达275μm，约为普通中期染色体的150倍。
②果蝇唾腺染色体由5条长染色体和1条短小的染色体组成，他们聚集在染色中心。
唾腺染色体由于体联会的原因只有二倍体的单元数，第Ⅰ染色体（X染色体）为端着丝粒，所以染色体的一端在染色中心上，另一端游离，第Ⅱ、Ⅲ染色体均为中着丝粒，它们从染色体中心呈V字形向外伸展，所以分别能看到2L(left arm)、2R( right arm) 、3L和3R4条长臂；点状的第Ⅳ染色体很短小，为端着丝粒。
因此，可以见到5条很长的和一条紧靠染色体中心的短小的染色体。
果蝇唾腺染色体的制片与观察
果蝇唾腺染色体的制片与观察果蝇唾腺染色体的制片与观察一、实验目的1、练习果蝇幼虫唾腺分离技术及唾腺染色体的制片方法；2、观察果蝇的唾腺染色体。
二、实验原理1、唾腺染色体：唾腺染色体是双翅类昆虫唾腺细胞的间期核中所看到的巨型染色体。
唾腺染色体的显著特征是：（1）形状为带状，宽达5微米，长达2000微米它相当于普通染色体的100～200倍；（2）核不分裂，由于染色体不断复制，形成了多线性染色体，宽度增加，同时长度也增加，成为巨型染色体；（3）带的全长几乎都有明显的嗜碱性的横纹，横纹的宽度有大有小，密度有疏有密，但是它的数目，位置等等对于同源染色体来说却都是同样的。
唾腺染色体的DNA含量达4，000—8，000c。
横纹被认为是染色小粒横向排列而成的。
横纹是详细研究染色体的部分缺失、倒位、重复、反复、易位等现象的标记；（4）由于2条同源体细胞染色体联会，在黑腹果蝇（2n= 8）中，V形的第二染色体和第三染色体各有两条臂，又各条染色体在异染色质多的着丝粒附近互相靠拢，与核仁一起在核的中央形成一个染色中心。
唾腺染色体的一条或几条横纹常显著膨起，这部分称为Bal- biani 环。
一般把多线性的巨大染色体中的这种膨大起称为疏松结构。
许多双翅类以及二、三种脉翅类昆虫的食道、肠、马氏管和神经细胞中，以及在植物界的Rhinanthus（胡麻科）的胚盘细胞、虞美人草的反足细胞等都能看到具有这样特征的染色体（巨大染色体或多线染色体）。
果蝇唾液腺：2、果蝇三龄幼虫的唾腺发育到一定阶段后，细胞的有丝分裂停留在间期，构成一个永久间期系统。
唾腺细胞数目不增加，但体积增大，其中每条染色体的常染色质区的核蛋白纤维（染色质纤维）不断复制，多则可达2的10次方至15次方次复制，其复制产物不分开，成千上万条染色质纤维平行而精巧地排列形成一大束宽而长的带状物，称为多线染色体。
由于细胞分裂停止在间期，核物质螺旋化程度低而充分伸展，这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约2000um，是其体细胞中期染色体长度的100—200倍。
实验六果蝇唾液腺染色体的观察及制备
实验六果蝇唾液腺染⾊体的观察及制备实验五果蝇唾液腺染⾊体的观察及制备⼀．⽬的1．了解果蝇唾液腺染⾊体的形态学及遗传学特征。
2．习分离果蝇幼⾍唾液腺的技术。
3．掌握唾液腺染⾊体制⽚⽅法。
⼆、原理蝇、摇蚊幼⾍唾液腺细胞中的巨⼤染⾊体。
双翅⽬昆⾍的唾液腺细胞发育到⼀定阶段之后就不再进⾏有丝分裂，⽽永久停留在分裂间期。
但随着幼⾍的⽣长，唾液腺染⾊体仍不断地进⾏⾃我复制⽽且不分开，经过许多次的复制形成约1 000—4 000拷贝的染⾊体丝，合起来直径达5µm，长度达400µm，⽐普通细胞中期染⾊体约⼤100～150倍，所以⼜称为多线染⾊体（polytene chromosome）或巨⼤染⾊体（giant chromosome）。
唾液腺染⾊体的另⼀特点是体细胞中同源染⾊体处于紧密配对状态，这种状态称为“体细胞联会”。
在以后不断的复制中仍不分开，由此成千上万条核蛋⽩纤维丝唾液腺染⾊体（salivary gland chromosome）是⼀类存在于双翅⽬昆⾍，如果结合在⼀起，紧密盘绕。
所以细胞中染⾊体只呈单倍数。
⿊腹果蝇的染⾊体数⽬2n=8其中第Ⅱ、第Ⅲ染⾊体为中部着丝粒染⾊体，第Ⅳ染⾊体和第IX染⾊体为端着丝粒染⾊体。
唾液腺染⾊体形成时，染⾊体着丝粒和近着丝粒的异染⾊质区聚于⼀起形成⼀个染⾊中⼼（chromo-center），所以在光学显微镜下可见从染⾊中⼼处伸出6条配对的染⾊体臂，其中5条为长臂，l条为紧靠染⾊中⼼的很短的臂。
唾液腺染⾊体经染⾊后，呈现深浅不同，疏密各异的横纹（band）。
这些横纹的数⽬，位置，宽窄及排列顺序都具有物种的特异性。
研究认为这些横纹与染⾊体的基因是有⼀定关系的。
通过⼀定的实验⽅法使果蝇唾液腺染⾊体各臂分散开，并且使带纹、膨突等特征不受杂质影响清晰地显⽰出来，是进⾏果蝇遗传学研究的很重要的⼀个环节．果蝇唾液腺染⾊体在不同种间的共同点是染⾊体的着丝点位于⼀个染⾊区域，但不同的种类往往其染⾊体臂数⽬不同．每条染⾊体臂上分布着染⾊深浅不同、粗细各异的磺纹(band)，这些横纹的宽窄疏密程度以及排列顺序和数⽬⼜都有种的特异性和种内的差异．由此，果蝇唾液腺染⾊体近⼏⼗年来，已⼴泛⽤于种内系统发⽣和种间亲缘关系的研究中，因为种间及种内不同品系和近缘种中的遗传差异经常反映在唾液腺染⾊体的不联会、形成泡(puff)、缢虞(constriction)和间带区的伸缩性以及顶体(telomere)的形态等多⽅⾯的差异，⽽特别重要的是研究它的基因序列的差异(观察是否产⽣了例位以及染⾊体的断裂、融合和重排)．因此，⽆论从细胞遗传学的⾓度研究基因与突变性状之间的联系，还是从进化遗传遗传学⽅⾯研究染⾊体的系统发⽣，探讨种间以及近缘种间的遗传差异和⽣殖隔离的机制等，唾液腺染⾊体的分析研究都是⼗分重要的．从其横纹分布特征可对物种的进化特征进⾏⽐较分析，⽽⼀旦染⾊体上发⽣了缺失，重复，倒位。
果蝇唾液腺染色体的制片与观察实验报告
果蝇唾液腺染色体的制片与观察张茜111070094一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、掌握唾液腺染色体的制片技术3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验原理1、双翅目昆虫（果蝇）幼虫期的唾液腺细胞很大，其中的染色体称唾液腺染色体，相当于一般普通染色体的100－150倍，又称巨大染色体。
2、在幼虫发育过程中，唾液腺染色体仍进行复制，但细胞只生长不分裂，从而产生多线染色体。
多线染色体经染色后，出现深浅不一、宽窄不同的横纹，这些横纹的数目和位置是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征。
如果染色体缺失、重复、倒位、易位等结构变异时，很容易在唾腺染色体上识别出来。
3、多线染色体的特征：a 巨大；b体细胞配对，所以染色体只有半数（n=4）；c 各染色体的异染色质多份额着丝粒部分相互靠拢形成染色中心；d 横纹有深浅、疏密的不同，各自相应排列，这意味着基因的排列。
三、实验材料和用品实验材料：黑腹果蝇的三龄幼虫实验用品：显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、滤纸。
生理盐水、1％醋酸洋红。
四、实验步骤1、载玻片置于显微镜下，上面滴加一滴生理盐水，放上果蝇幼虫（有一钝尾和带黑色口器的尖头，可根据其在盐水中爬行方向确定头部），两手各拿一枚解剖针，左手解剖针按住幼虫的后端1/3, 右手解剖针按住头部(尽量靠近口器)用力后拉，把头部从身体拉出，唾液腺随之而出。
（一对双叉形透明的囊状腺体）。
2、除去幼虫其他组织部分，把唾液腺周围脂肪组织（不透明）剥离干净，然后将多余生理盐水吸走，滴一滴醋酸洋红在载玻片上。
3、染色10 分钟，盖上盖玻片，用滤纸轻压一下吸去多余的染色液，然后平放在桌子上，用大拇指适当均匀用力压住，并横向揉几次（勿使盖玻片移动，用力和揉动是一个方向，不能来回揉！）。
4、显微镜观察，先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，再高倍镜观察。
用显微镜可以看到四对染色体，第一对染色体（X-）组成一个长条，第二和第三对各自组成了具有左右两臂的染色体对，它们都以中部的着丝区聚集，而第四对染色体很小，分布在着丝区呈点状或盘状。
果蝇唾液腺染色体的观察
果蝇唾液腺染色体的观察一、实验目的1)练习剖取果蝇三龄幼虫唾液腺的方法。
2)掌握制作果蝇唾液腺染色体标本的技术3)观察果蝇唾液腺染色体的形态特征。
二、实验原理1）果蝇三龄幼虫的唾液腺细胞处于永久早期，染色体解旋呈伸展状态．在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂。
复制后的染色单体DNA不分开，这种现象叫做核内有丝分裂，从而形成了多线染色体。
加之唾液腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，而使其比一般体细胞中的染色体粗1000—2000倍，长100－200倍。
2）唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，所以左手持解剖针按压住虫体前端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。
如图。
3）由于在唾液腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染中心和同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的5条染色体臂。
在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称做明带、暗带的横纹，这些横纹的位置，宽窄、数目都具有物种的特异性。
不同物种，不同染色体的不同部位形态位置是固定的。
因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。
在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的解旋、膨大形成的疏松区和巴尔比尼氏环，其富含转录出来的RNA，因此不着色，是基因活动的区域。
在个体发育的不同阶段，疏松区或巴尔比尼氏环在染色体上出现的部位不同，据此研究基因的表达，开展各种染色体变异的研究等等。
三、器具和生物实验生物：果蝇的三龄幼虫；器具：双筒解剖镜、显微镜、镊子、解剖针，载玻片、盖玻片实验试剂：醋酸洋红染液、蒸馏水、lNHCI。
四、实验步骤1）准备发育充足、肥大的三龄幼虫（选择在低温下（16°C-18°C培养下，充分发育但尚未化蛹但活动十分活跃的幼虫）；2）剥离唾腺：在一干净的载玻片上滴一滴蒸馏水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，置于载玻片上。
果蝇唾液腺染色体的制片与观察
果蝇唾液腺染色体的制片与观察一、实验目的学会果蝇幼虫的解剖技术学习唾腺染色体的染色制片方法观察唾腺染色体了解染色体横纹的特点二、实验原理黑腹果蝇幼虫期的唾腺细胞核非常大，唾腺染色体比其它细胞染色体大200多倍并且总是处于前期状态。
这是由于染色体复制而分不开，纵向并列形成像电缆那样的巨大染色体，这样的染色体称为多线染色体，染色体上的染色粒排列在成横带在染色体的部位是一定的。
从唾腺染色体的制片中可以看到五条长臂，好似从一共同的中心发射出来的，这个中心叫做染色中心。
它是由于所有染色体在刚一接近其纺锤丝附着点时，即被相互吸引及紧密结合而成，这五条臂分别称为X、2L、2R（第二染色体的左右臂），3L及3R（第三染色体的左右臂），还有一小段用4来表示（第四染色体），每一条臂都含有二条紧密聚合的同源染色体，一条是母本的，来自卵核，一条是父本的，来自精子。
在雄体的唾腺中，Y染色体大大的萎缩，X染色体则呈现不配对而成细长的一条。
因为，每一条臂都含有二条紧密聚合的同源染色体，所以，当它们有相同的构造时，没有办法从两条紧密配对的双股的染色体复合体来彼此区分它们。
但两条同源染色体之间有差别时，则很容易看出来。
例如，当一条染色体缺失一个片段时，它的同源染色体，在这一段不能配对，就会拱起来，形成了一弧状结构，此外重复、倒位、易位等染色体畸变也可以看到。
所以，果蝇唾腺染色体是研究染色体畸变的好材料，制备唾腺染色体标本，可以用果蝇3令幼虫，越肥越好，（温度在15℃左右，能使幼虫长得肥而大），果蝇的幼虫呈半透明状，有黑点的一端是头部，黑点是它的神经节，唾腺在神经节下面，呈两个半透明的棒状物，中间有一个细丝相连。
三、 实验材料及器材解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸、醋酸洋红、85%的生理盐水、1NHCl 的盐酸，以及果蝇幼虫（3令的越肥越好的果蝇幼虫）。
四、 实验步骤1、从果蝇的培养瓶中的找出一只又大又肥的果蝇幼虫，用解剖针将其挑出放在载玻片上，滴两滴85%的生理盐水在果蝇的幼虫上。
2. 果蝇唾腺染色体的制备与观察
实验果蝇唾腺染色体的制备与观察一、实验目的1. 练习分离果蝇幼虫唾腺的技术，学习唾腺染色体的制片方法2. 观察了解果蝇唾腺染色体的形态学及遗传学特征二、实验原理1．果蝇是双翅目昆虫，幼虫期具有很大的唾腺细胞，其中的染色体是巨大的唾液腺染色体；2．唾液腺染色体不断地进行自我复制而不分开，经过许多次的复制形成约1000～4000拷贝的染色体丝，合起来达5mm宽，400mm长，比普通中期相染色体大得多（约100～150倍），所以又称为多线染色体；3．唾液腺染色体具有许多重要特征，为遗传学研究的许多方面，如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料。
三、实验材料与器具•三龄幼虫•0.9%生理盐水•改良苯酚品红 1N盐酸•解剖镜解剖针吸水纸四、实验步骤(1)剥离唾腺在一干净的载玻片上滴一滴生理盐水，选择行动迟缓、肥大、爬在瓶壁上即将化蛹的三龄幼虫，或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。
每只手各持一个解剖针，在解剖镜下进行操作。
果蝇的唾腺位于幼虫体前1/3-1/4处，左手持解剖针按压住虫体后端三分之一的部位，固定幼虫，右手持解剖针扎住幼虫头部口器部位，适当用力向右拉唾腺腺体随之而出。
唾腺是一对透明的棒状腺体，外有白色的脂肪组织（不透明）。
去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净。
(2)染色：吸去生理盐水，注意操作时要边观察边吸湿，最好用解剖针轻压，防止连同唾腺一起吸走；滴加胭脂红染色液，染色20-30min(3)压片：染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。
将片子放在实验台上，用大拇指均匀用力压片。
（注意不要使盖片移动。
）(4)观察：1、将制片置低倍镜下找到分散好的标本，移至视野中心，然后转到高倍镜下观察。
2、对分散良好、染色体臂充分伸展的片子，应仔细观察染色体的横纹数量、形状和排列顺序，对照模式照片辨认出不同的染色体臂五、注意事项1. 一定加生理盐水，否则唾腺易干。
2. 将脂肪组织清除干净3. 水不可太多，否则幼虫会漂浮而且活跃4. 染色时间不可过长，否则背景也着色5. 压片时要揉，用力要均匀6. 染色完以后，将旧的染色液吸去，加新的染色液，再压片7. 吸水时勿将唾腺一起吸走六、实验结果七、分析讨论1.请画一个有代表性的果蝇唾腺染色体图。
果蝇唾液腺染色体装片 的制作与观察
果蝇唾液腺染色体的观察一．实验目的1.学会果蝇幼虫解剖技术，唾液腺分离的方法，学习唾腺染色体的制片步骤2.观察果蝇唾腺巨大染色体的结构，了解染色体横纹的特点3.了解果蝇唾腺染色体在遗传学研究中的意义二．实验原理本世纪初，D. Kastoffs用压片法首先在D. melanogaster 果蝇幼虫的唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体——唾液腺染色体（salivary gland chromosome）。
事实上，双翅目昆虫（如摇蚊、果蝇等）的幼虫期都具有很大的唾腺细胞，其中的染色体就是巨大的唾液腺染色体。
这些巨大的唾液腺染色体具有许多重要特征，为遗传学研究的许多方面，如染色体结构、化学组成、基因差别表达等提供了独特的研究材料。
双翅目昆虫的整个消化道细胞发育到一定阶段之后就不再进行有丝分裂，而停止在分裂间期。
但随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的增大，细胞核中的染色体，尤其是唾液腺染色体仍不断地进行自我复制而不分开，经过许多次的复制形成约1000～4000拷贝的染色体丝，合起来达5m宽，400m长，比普通中期相染色体大得多（约100～150倍），所以又称为多线染色体（polytene chromosome）和巨大染色体（giant chromosome）。
唾液腺染色体形成的最初，其同源染色体即处于紧密配对状态，这种状态称为“体细胞联会”。
在以后不断的复制中仍不分开，由此成千上万条核蛋白纤维丝合在一起，紧密盘绕。
所以配对的染色体只呈现单倍数。
黑腹果蝇的染色体数为2n=2×4，其中第II、第III染色体为中部着丝粒染色体，第IV和第I（X染色体）染色体为端着丝粒染色体（图1）。
而唾液腺染色体形成时，染色体着丝粒和近着丝粒的异染色质区聚于一起表成一染色中心（chromocenter），所以在光学显微镜下可见从染色体中心处伸出6条配对的染色体臂，其5条为长臂，1条为紧靠染色中心的很短的臂（图2,图3）。
果蝇唾腺染色体的标本制备和观察
果蝇唾腺染色体的标本制备和观察果蝇(Drosophila melanogaster)是生物学研究中常见的模式生物之一，其唾腺染色体是生物学中经常使用的标本之一。
本文将介绍如何制备果蝇唾腺染色体标本，并展示如何观察这些标本。
制备标本材料制备果蝇唾腺染色体标本需要的材料如下：•果蝇成虫•酒精•醋酸•乙醇•0.5% 的乙酸-洋红溶液•1% 的氧化铬酸钾溶液•100% 的甘油•盖片•显微镜步骤1.将成虫放入酒精中，浸泡5分钟至失去活性。
2.用镊子将成虫头部部分取下，然后将其剪开，将唾液腺取出。
3.将唾液腺置于醋酸中浸泡2分钟，然后转移到乙醇中浸泡2分钟，最后放入1%的氧化铬酸钾溶液中浸泡1-2分钟。
4.从氧化铬酸钾溶液中将唾液腺转移到100%的甘油中浸泡1-2分钟，以使其变色，然后将其取出，并放入盖片上。
5.加入0.5%的乙酸-洋红溶液，然后用另一个盖片覆盖，压扁唾液腺。
6.将盖片放入显微镜，用40倍或100倍放大倍数观察。
观察标本染色体结构果蝇唾腺染色体呈现为极细线状，可根据其结构分为两类：•染色体较长的一端为钩状，称为钩端。
•另一端较短，称为非钩端。
染色体数量成虫染色体数目为8条，如下：•一对#1染色体•一对#2染色体•一对#3染色体•两对#4染色体染色体组成果蝇唾腺染色体由DNA和蛋白质组成，其中蛋白质主要为组蛋白和非组蛋白。
通过以上步骤，我们可以轻松制备果蝇唾腺染色体标本，并通过显微镜观察其结构和数量。
这对于生物学研究和遗传学研究具有重要意义。
遗传学实验--果蝇唾腺染色体的压片及其观察
果蝇唾腺染色体的压片及其观察一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、学会制作唾腺染色体压片3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验材料黑腹果蝇的三龄幼虫，活跃的，雌性幼虫。
盖玻片、载玻片、解剖针、解剖镜、45%醋酸溶液、卡宝—品红染液、盐酸、乳酸醋酸溶液三、实验原理唾腺染色体的特点：大、粗。
唾腺细胞是一个处于间期的细胞，染色体处于一个伸展的状态，所以特别长，因为这个唾腺细胞是一个多倍体的细胞，每条染色体的话有1000到4000条核蛋白纤维丝（包括DNA和蛋白质）。
唾腺染色体的所有的着丝粒聚在一起形成了一个染色中心，伸开五条臂。
X染色体体联会在一起。
果蝇染色体分区：果蝇染色体一共分为120个区，从端部开始1-20为x染色体，21-40在第二染色体的左臂，61-80在第三染色体的左臂，101—102位于点状染色体。
右臂是从基部开始分区，41-60在第二染色体的右臂， 81-100位于第三染色体的右臂。
每一个分区里边又分成段这个段，用A、B、C、D来表示。
四、实验步骤唾液腺制片：1、取一张载玻片，擦干净表面的酒精，放在解剖镜的载物台上。
2、打开解剖镜，使用上光源。
并在载玻片上滴一滴生理盐水。
3、用解剖针取一只黑腹果蝇的三龄幼虫。
4、用一支解剖针固定幼虫头部，另外一支解剖针压入口沟的位置，将其拉断。
找到口沟附近的一对透明的唾液腺，将唾液腺留在中间，用吸水纸将其他的部分擦去。
5、加入45%的醋酸溶液固定，时间为 5—7秒。
让唾液腺离开原来的位置，时间到了之后将多余的液体吸掉。
6、加一滴盐酸起软化作用，再加一滴蒸馏水洗去多余的盐酸，时间大概1—2秒。
让唾液腺离开原来的位置。
7、滴加染液，染色三十分钟。
8、重新做一张制片9、吸掉多余的染液，加一滴乳酸醋酸溶液，将唾液腺充分的洗涤。
吸去多余的溶液。
10、盖上盖玻片，用两层滤纸，中间打折压住盖玻片手点住盖玻片的两个角轻轻的按抚，吸去多余的溶液。
11、压片显微镜观察：先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，再高倍镜观察。
果蝇唾液腺染色体制片和观察
实验报告课程名称遗传学实验实验名称果蝇唾液腺染色体制片和观察一、实验原理果蝇唾腺染色体是永久间期染色体，只发生DNA复制，不发生有丝分裂。
在幼虫唾腺细胞内，每条染色体进行了10次左右的复制，形成了约210=1024条染色体拷贝，再结合同源染色体的配对，共用约2048条同源染色体拷贝进行体细胞联会，形成比正常有丝分裂中期的染色体大200倍的、巨大的多线染色体。
这些染色体的着丝点聚集在一起，形成染色中心，同源染色体的两臂向外伸展。
经过染色，唾腺染色体的显示出独具本染色体特色的带和间带模式。
这个模式是恒定的，可用用于基因的定位，如果发生染色体的结构变异，则可以通过模式的改变而发现出来。
不同的染色体，其端部不同，可以用于鉴别染色体。
在观察唾腺染色体时，会发现膨胀泡结构，这是强烈的基因转录迹象。
二、实验结果图一：果蝇幼虫解剖针分离后效果图图二：剥离的腺体一共分离了3条果蝇幼虫才分离出较清晰的唾液腺体，在分离出带腺管的2侧腺体时，上面还有其他东西，因为想剥离的干净一点，所以没急着拍照，结果分离到一半时，一条腺体丢失，所以照片仅显示剥离中期时剩的一条腺体。
图三：唾腺染色体（借用）图四：唾腺染色体——图片放大（借用）带与间带、染色中心、膨胀泡、3R端部（僧帽）特点如上图标示。
三、总结反思从挑取果蝇幼虫，到幼虫的头身分离和剥离腺体，再到染色，这些操作的较为顺畅，并没有出现大的失误。
虽然刚开始分离的两条幼虫因为手法生疏，并没有分离出完整的腺体，但是第三次尝试时就分离出带腺管的2侧腺体，剥离后还剩一条较为完整的腺体。
染色时操作也较为小心，并未让腺体随水流被滤纸吸走。
就剥离腺体这个操作而言，我觉得这是一个需要耐心、眼力和方向感的事情，可以在剥离的时候将载玻片放在显微镜下，同时2根解剖针也进入显微镜的视野内的两侧，用解剖针判断该划掉哪个方向的一部分，一点点去掉不要的东西，最后就可以留下需要的腺体了。
但是操作一定要细心，腺体特别小，划的时候如果一不小心粘到解剖针上也弄不下来，那条腺体也就没用了。
果蝇唾腺染色体的标本制备和观实验报告
果蝇唾腺染色体的标本制备和观实验报告
实验目的：
通过制备果蝇唾腺染色体标本，观察果蝇的染色体结构，了解染色体的基本性质和遗
传学规律。
实验材料：
果蝇幼虫、0.5% KCl溶液、氯仿、乙醇、木棒、荧光显微镜。
实验步骤：
1、将果蝇幼虫放入酒精中，使其身体僵硬；
2、用木棒将其身体对称裂开，取出唾腺进行制片；
3、将唾腺放入0.5% KCl溶液中，加热至65℃，使细胞膜破裂；
4、倒入等量的氯仿，轻轻摇匀，放置5-10分钟；
5、离心，移去上层液体，加入冰醋酸铅，固定标本；
6、取出标本，放入70%、95%和绝对乙醇中，依次脱水；
7、将脱水后的标本放在载玻片上，滴上染色液，加热至70℃，并静置5分钟；
8、冲洗并抽干，加入透明胶进行封片；
9、通过荧光显微镜观察唾腺染色体的结构。
实验结果：
在进行染色体标本制备后，通过荧光显微镜观察，果蝇唾腺染色体呈现出沿着中心轴
对称排列、长度相等的形态。
每个染色体被分为两个亚单元，其中有着明显的染色体节间。
每个亚单元又被分成数个不同长度的染色体节，节与节之间也有着清晰可见的连接。
实验结论：
染色体是生物遗传信息的主要携带者，表现出其特定的形态和结构。
通过制备果蝇唾
腺染色体标本，观察了果蝇染色体的基本结构和形态，了解了染色体的基本性质和遗传学
规律。
对于研究生物遗传学以及进行基因工程，染色体的结构和功能有着重要的意义。
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实验五果蝇唾液腺染色体的观察及制备一.目的
1.了解果蝇唾液腺染色体的形态学及遗传学特征。
2.习分离果蝇幼虫唾液腺的技术。
3.掌握唾液腺染色体制片方法。
二、原理
蝇、摇蚊幼虫唾液腺细胞中的巨大染色体。
双翅目昆虫的唾液腺细胞发育到一定阶段之后就不再进行有丝分裂,而永久停留在分裂间期。
但随着幼虫的生长,唾液腺染色体仍不断地进行自我复制而且不分开,经过许多次的复制形成约 1 000— 4 000拷贝的染色体丝,合起来直径达5μm ,长度达400μm ,比普通细胞中期染色体约大 100~150倍,所以又称为多线染色体(polytene chromosome或巨大染色体 (giant chromosome。
唾液腺染色体的另一特点是体细胞中同源染色体处于紧密配对状态,这种状态称为“体细胞联会”。
在以后不断的复制中仍不分开,由此成千上万条核蛋白纤维丝唾液腺染色体(salivary gland chromosome是一类存在于双翅目昆虫,如果结合在一起,紧密盘绕。
所以细胞中染色体只呈单倍数。
黑腹果蝇的染色体数目 2n=8其中第Ⅱ、第Ⅲ染色体为中部着丝粒染色体,第Ⅳ染色体和第 IX 染色体为端着丝粒染色体。
唾液腺染色体形成时,染色体着丝粒和近着丝
粒的异染色质区聚于一起形成一个染色中心
(chromo-center ,所以在光学显微镜下可见从染色中心处伸出 6条配对的染色体臂,其中 5条为长臂, l 条为紧靠染色中心的很短的臂。
唾液腺染色体经染色后,呈现深浅不同,疏密各异的横纹 (band 。
这些横纹的数目,位置,宽窄及排列顺序都具有物种的特异性。
研究认为这些横纹与染色体的基因是有一定关系的。
通过一定的实验方法使果蝇唾液腺染色体各臂分散开, 并且使带纹、膨突等特征不受杂质影响清晰地显示出来, 是进行果蝇遗传学研究的很重要的
一个环节.果蝇唾液腺染色体在不同种间的共同点是染色体的着丝点位于一个染色区域,但不同的种类往往其染色体臂数目不同.每条染色体臂上分布着染色深浅不同、粗细各异的磺纹 (band, 这些横纹的宽窄疏密程度以及排列顺序和数目又都有种的特异性和种内的差异. 由此, 果蝇唾液腺染色体近几十年来, 已广泛用于种内系统发生和种间亲缘关系的研究中, 因为种间及种内不同品系和近缘种中的遗传差异经常反映在唾液腺染色体的不联会、形成泡 (puff、缢虞 (constriction和间带区的伸缩性以及顶体 (telomere的形态等多方面的差异,而特别重要的是研究它的基因序列的差异 (观察是否产生了例位以及染色体的断裂、融合和重排 . 因此,无论从细胞遗传学的角度研究基因与突变性状之间的联系,还是从
进化遗传遗传学方面研究染色体的系统发生,探讨种间以及近缘种间的遗传差异和生殖隔离的机制等,唾液腺染色体的分析研究都是十分重要的.从其横纹分布特征可对物种的进化特征进行比较分析,而一旦染色体上发生了缺失,重复, 倒位。
易位等结构变化,也可较容易地在唾液腺染色体上观察识别出来。
三、仪器设备及材料,试济
仪器设备:解剖镜,显微镜,恒温培养箱,镊子,解剖针, 载玻片及盖玻片,吸水纸
解剖镜,显微镜,恒温培养箱,镊子,解剖针,载玻片及盖玻片。
材料 :黑腹果蝇(Drosophila melanogaster 三龄幼虫试剂:醋酸洋红液,蒸溜水,浓盐酸
五、实验步骤
1.材料准备发育充足、肥大的三龄幼虫,唾液腺和唾液腺细胞发育良好。
利用这样的唾液腺细胞才能制备出理想的染色玻片标本。
因此要求培养基营养丰富,含水量较高。
比较松软,发酵良好。
2.剥离唾腺在一干净载玻片上滴一滴生理盐水,选择行动迟缓、肥大、爬在管壁上即将化蛹的三龄幼虫,或者选择经低温处理的果蝇三龄幼虫置于载玻片上。
如果分不清头尾着可以从它爬行的时候确认其头尾,由于果蝇的唾液腺位于幼
虫体前 1/3-1/4处,所以在解剖镜下左手持解剖针按压住幼虫后端 1/3处。
固定幼虫,右手持解剖针扎住幼虫头部口器处,适当用力向后拉,把头部与身体拉开,唾液
腺腺体随之而出。
把载玻片移到显微镜下查找唾液腺。
果蝇的唾液腺是位于口器后端神经节两侧的一对透明而微白的类似香蕉形的长形小囊,由单层细胞构成。
细胞大,细胞核大, 细胞轮廓清晰。
用解剖针先将含有腺体的一团组织与其它组织分开.然后再将腺体与脂肪等组织分开.得到透明的香蕉状的唾液腺。
3. 低渗处理:将唾液腺放于低浓度的 Nacl 溶液中处理 10-15min, 以使细胞充分
吸水而容易弄破。
4. 解离将唾液腺在载玻片上滴一滴 lmol /L HCI,让唾液腺在 lmol /L HCI中解离 2-3分钟,以松软组织,利于染色体分散。
5. 染色解离后的腺体可用水冲洗 2--3次后滴 2滴品红染液染色 20分钟 (解剖和染色过程勿使腺体于燥。
在酒精灯上加热以增强染色效果。
可以不经解离一步而直接染色,也可以在将幼虫头部与身体拉开后马上加染液染色,然后慢慢剖离腺体.
6.滴片当腺体被染成红色后,用滤纸擦去染液周围一圈的黑色沉淀物,再用蒸馏水冲洗 2— 3次,然后加上盖玻片, 在盖玻片上方再植盖一层滤纸,用镊子在盖玻片,轻轻敲击几下。
再用拇指按住盖玻片用力下压,把腺体细胞压破,把染色体压散开.压
片时放载玻片的桌面要干,不要使盖片滑动。
制好的玻片标本用蜡封住盖玻片四周以防干燥。
经低温冷冻处理的材料经解离,染色.加盖片后不必敲击.镜检即可看到
分散良好的染色体。
7.观察将制好的片子先用低倍显微镜观察。
找到好的染色体于视野中心,再用高倍镜观察之。
如果制片理想,可做成永久制片。
8.摄影仔细观察的唾液腺染色体的形态结构并摄像。
五.实验结果
在显微镜下我们看到的结果如下
六思考与讨论
1. 何谓先染色体
多线染色体上用原位分子杂交法进行基因定位，并就其结构与功能之间的关系进行系统研究，因此是细胞学和遗传学研究的有用材料。
核内 DNA 多次复制产生的子染色体平行排列, 且体细胞内同源染色体配对, 紧密结合在一起, 从而阻止了染色体纤维进一步聚缩, 形成体积很大的由多条染色体组成的结构叫多线染色体。
多线化的细胞处于永久间期, 体积也相应增大, 它存在于双翅目昆虫的幼虫组织内 , 如唾液腺、气管等。
2.如何区别你看到的就是唾腺染色体？答：（1）由于在唾液腺细胞中 8 条染色体之间以着丝粒互相连结在一起形成染色盘或异染中心和同源染色体之间的假联会，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色盘和以染色盘为中心向外辐射出的 5 条染色体臂。
(2在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称做明带、暗带的横纹，这些横纹的位置，宽窄、数目都具有物种的特异性。
不同物种，不同染色体的不同部位形态位置是固定的。
因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。
(3在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的解旋、膨大形成的疏松区和巴尔比尼氏环，其富含转录出来的 RNA，因此不着色（4）. 唾液腺细胞处于永久早期，染色体解旋
呈伸展状态．在幼虫发育过程中细胞核中的 DNA 多次复制，但细胞、细胞核不分裂。
复制后的染色单体 DNA 不分开，从而形成了多线染色体（5）每一臂上所有的每一臂上所有的横纹的大小和位置是恒定的，即具有种的特征。
横纹的大小和位置是恒定的，即具有种的特征。
3.在昆虫学中，二龄幼虫，三龄幼虫有何生物学意义？答：果蝇是完全变态发育的生物之一，二龄幼虫，三龄幼虫是其变态发育的重要特点。
从初生卵发育至新羽化的成虫为一个完整的发育周期，在25℃，60％相对湿度条件下，大约为 10 天。
通过控制养殖的温度，可以加速和减缓果蝇的发育。
果蝇个体很小，幼虫在三龄时达到最大，约 2 毫米，成年果蝇也仅为 2－3 毫米。
新羽化的雌性成虫大约 8 小时之后即可进行交配，交配之后大约40 小时开始产卵，第 4-5 天出现产卵高峰。
性成熟雌性果蝇生殖能力很强，产卵初期每天可达 50～70 枚，累计产卵可达上千枚。
黑腹果蝇是最普遍应用于遗传学的果蝇，也是奠定经典遗传学基础的重要模式生物之一，对其染色体组成和表型、基因编码和定位的认识，是其它生物无法比拟的。
基于清晰的遗传背景和便捷的遗传操作，果蝇在发育生物学、生物化学、分子生物学等领域也都占据了不可替代的位置。
随着神经科学的兴起，许多遗传操作在该领域不断发展和成熟，为在果蝇中进行神经科学的研究打下了坚实的基础。
总之，果蝇在近一个世纪以来的生物学舞台上占有举足轻重的地位，在各
个领域的广泛应用使其成为一种理想的模式生物，不论在已往、现在和将来都将为人类探索生命科学的真谛做出不可磨灭的贡献。