交叉配血知识

有的标本延迟离心
原有凝集会变为既不凝也不溶血,难以发现ABO血型 的不配合。（多发生在O型人的血清抗体与A型、B 型或AB型红细胞反应的试验中,发生率为2%-3%.发 生机制是反应强的抗A、抗B和抗原强度强的A、B抗 原作用,补体C1在有Ca2+存在的条件下,固定到红细 胞膜上,妨碍了红细胞的凝集,进一步可能引起溶血） 解决的方法： A:血清与红细胞混合后立即离心。 B:用血浆或灭活的血清做试验 C:用EDTA盐水配制红细胞悬液, D:稀释血清
（1）技术和管理错误 器材不洁 —— 假阳 试剂污染或不足 —— 假阳 标本和试剂搞错 —— 假阳 、假阴 离心过度或不足 —— 假阳 、假阴 结果记录或判断错误 —— 假阳 、假阴 漏加试剂 —— 假阴 阳性反应产生溶血现象未能识别——假阴
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（2）标准血清效价太低、亲和力不强。如抗A血清效价不高， 可将A亚型误定为O型，AB型误定为B型。 （3）红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应 不明显，误判为阴性反应。 （4）血清异常 华通胶或血清蛋白异常引起串钱状形成，影响 反定性结果 （5）红细胞致敏 在含高蛋白介质试剂中可发生凝集，产生假 阳性 （6）近期曾异型输血，病人血液标本成为不同型别的红细胞 混合物，定型时显示“混合外观凝集”现象。 （7）疾病因素导致抗原减弱 某些白血病病人ABO血型抗原 可受到抑制，检出困难。 （8）红细胞多凝集现象 RBC因遗传或获得性的表面异常，发 生多凝集现象。
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加样时先加血清再加红细胞，以避免漏加； 抗体和抗原的比例一般为2：1。
必须要做正反定型实验才能确定血型。
正定型试验有条件可加做抗AB（检测弱A、弱B ）
反定型一定要加做O细胞,（发现不规则抗体）
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5.正反定型结果不一致
原因：技术、受检红细胞或血清本身
RBC表面有丰富唾液酸，在中性环境中带负电荷，互 相分离。可通过缩短细胞间距，以及在致敏细胞上的 抗体之间搭桥使RBC凝集。 凝集一般为二个步骤
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抗体吸附于RBC抗原上成为致敏状态
致敏RBC凝集形成块状
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一 一
二 二
标本的采集及要求 血型 不规则抗体的筛选 交叉配血
（14）药物等因素 药物、右旋糖酐等静脉注射某些造影剂可引 起红细胞聚集而类似凝集。 （15）年龄因素 如新生儿、老年人等。
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（9） 获得性类B 由于G-杆菌作用，RBC可获得“类B”活性 （10）异常血浆蛋白 病人血浆中异常的白蛋白、球蛋白比例异 常和高浓度的FIB等能导致缗钱状形成，造成假凝集现象 （11）近期内进行大量的血浆置换治疗，影响抗体效价，造成反 定型困难。
（12）不规则抗体的产生 受检者血浆中，含有ABO血型抗体以 外的不规则抗体，如自身抗I，与试剂A、B细胞上的相应抗原起 反应。 （13）低丙种球蛋白血症 可能会因免疫球蛋白水平全面下降使 血清定型时不见凝集或仅见弱凝集反应。
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2. 离心力的标准
不同规格离心机，力矩不同，统一离心转速，但 没有统一离心力。 离心转速换算公式： RCF = 1.118 × 10-5 × (rpm) 2× R (cm)
3. 离心后结果观察注意事项
将试管成30-45℃角拿在手上，细胞扣朝上，手腕 轻轻用力，用液体去冲细胞扣。
P 部分溶血 H H 完全溶血 W 混合外观 2018/10/17
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4.盐水试验
多采用立即离心法 正确的操作是：RBC悬液加到血清后立即离心并观察结果
反应时间过长而延误离心对ABO血型系统的抗体检出影响 室温2分钟后离心 室温5分钟后离心 可能使3+～4+的凝集减弱为0+ ～ 1+,并有溶血 原有凝集可能消失,并有溶血
洗涤
洗涤目的: 去除RBC表面物质
①少量的血浆蛋白 ②已溶解红细胞的基质（有竞争抗体的作用） ③抗凝剂（有抗补体的作用）
至少要用大量生理盐水洗一次
浓度 2%：一般用于抗体效价的测定 5%：一般用于血型鉴定、配血试验、抗球蛋白试验 等大多数血型血清学试验 10%：一般用于测定抗体的亲和力试验
细胞成细沙状沿试管壁流下
+ 细胞成块状或成齿状沿试管壁流下
切不可用力使劲摇试管，那样凝集颗粒会被摇散， 弱凝集则会误判为阴性。
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常用的记录符号及所示的凝集强度 4 + 3 + 2 + 1 W + + O 一个大的凝集块,背景透明,无游离细胞
数个大凝集块,背景透明,无游离细胞 许多小凝集块,肉眼可见,大小均匀,背景基本透明,有游离 细胞 很小的凝集块,肉眼可见,背景不透明,游离细胞较多,需要 微小凝集块 ,肉眼很难看清,背景混浊,要用显微镜观察 用显微镜观察 无凝集,无溶血,全部是游离细胞,要用显微镜观察
2.使用右旋糖酐、pvp等：
治疗前抽取标本备用,防止RBC缗钱状凝集的干扰
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3.24小时内输了12u血后：
可输注未经交叉配血的ABO、RH同型的血液,因为 原始交叉配血用的血清已不能代表患者血清的情况。
4.防止血样的稀释和溶血的产生：
溶血标本一般不使用,因为血清中游离血红蛋白可掩 盖在输血前实验中抗体反映引起的溶血
5.标本标识：唯一性标识无误、与输血申请单一致
6.使用血浆标本：应排除纤维蛋白原的干扰 7.输血后标本保存：2-8℃,至少一周。
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血型
1. 红细胞悬液的配制 2. 离心力的标准 3. 离心后结果观察 4. 盐水试验 5. 正反定型结果不一致原因及处理
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1.红细胞悬液的配制
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标本的采集与要求
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1.标本要新鲜:
标本要具有代表性， 能代表患者目前状况
前三个月内输血或妊娠:配血试验标本抽取<48h,
避免因回忆反应产生的抗体漏检。 新近的输血或妊娠：可引起意外抗体迅速出现,如 果对病人的输血史或人身史不明,使用的标本必须是 输血前48h内抽取的。 血量约为5ml 。