药品洁净实验室微生物控制和监测分析
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境要求。 。
空气悬浮粒子标准
洁净度级别
A级(1) B级 C级 D级
悬浮粒子最大允许数/立方米
静态
≥0.5μm ≥5.0μm(2)
3520
20
动态(3)
≥0.5μm ≥5.0μm
3520
20
3520
29
352000
2900
352000
2900
29000
29000
不作规定 不作规定
环境的要求 ISO14644-1:2010 洁净度等级及悬浮粒子要求
ISO等级序数 （N）
1 2 3 4 5 6 7 8 9
0.1μm
10 100 1000 10000 100000
0.2μm
2 24 237 2370 23700 237000
0.3μm
10 102 1020 10200 102000
0.5μm
4 35 352 3520 35200 352000
1μm
药品洁净实验室微生物控制和监测
概述
《2015版药典》参考国家及国外标准制定了统一的标准 参考标准 ⒈ USP(35)〈1116〉药品无菌操作环境的微生物控制和监测指导原则 ⒉ ISO 14644 洁净室及相关受控环境附录无菌药品生产质量管理规范 ⒊ GB/T16292-2010 医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游和沉降菌的测试方法
监测方法
悬浮粒子、沉降菌、浮游菌、表面菌的测试方法 GB/T 16292-2010医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法； GB/T 16294-2010医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法； GB/T 16293-2010医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法。
药品洁净实验室监测项目及频次（参考）
30-65%
10-20h-1
人员
从事药品洁净实验室微生物监测和控制的人员应符合现行《中国药典 》附录中“药品微生物实验室指导原则”的相关要求。
参数确认
初次使用的洁净实验室应进行参数确认，物理参数的测试应当在微生物监测 方案实施之前进行。为 确保操作顺畅，保证设备系统的运行能力和可靠性 。 确认主要的物理参数过滤系统完整性，空气流速，气流组织、换气次数、压 差、温度和相对湿度等。 空气悬浮粒子和微生物 当人员流动、超净工作台等重大设备运转、空气调节系统等重大变化时应重 新进行参数测试。 测试结果不能作为最终判断依据，应进行综合分析判断。
胰酪大豆胨琼脂（TSA），培养温度为30℃-35℃，时间不少于2天。 沙氏葡萄糖琼脂(SDA)，培养温度为20℃-25℃，时间不少于5天。如需要可 以延长至7天。 稀释剂 0.9%无菌氯化钠溶液、pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 胰酪大豆胨肉汤（TSB）或其他适宜的稀释剂。
A级
1
1
1
1
B级
10
5
5
5
C级
100
50
25
－
D级
200
100
50
－
注：① 表中各数值均为平均值。 ②单个 沉降碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用多 个沉降碟连续进行监测并累积计数。
环境的要求
ISO14644-1:2010 洁净度等级及悬浮粒子要求
洁净度 级别
过滤完整 性
气流组织
5
单向流
监测周期
空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌的采样点、数量、位置、次数、采样量 、最少平皿数及采样注意事项参见国家标准； GB/T 16292-2010 GB/T 16293-2010 GB/T 16294-2010
洁净室环境 检测
培养基 胰酪大豆胨琼脂（TSA） 细菌、酵母菌和霉菌的生长必要时可加入添 加剂消除和减少消毒剂和抗生素的作用。， 沙氏葡萄糖琼脂(SDA)或玫瑰红钠琼脂培养基酵母菌和霉菌的监测。 通常，不监控厌氧菌，因为这些微生物在环境中不能生存。如需要应对 微需氧和低氧环境下生长的微生物进行监测。 用于环境微生物监测的培养基须特别防护。 双层包装和终端灭菌，否则使用前应进行100%的预培养以防止外来的污 染物带到环境中及避免出现假阳性结果。
5μm
8 83 832 8320 83200 832000
29 293 2930 29300 293000
GMP对洁净环境微生物监测动态标准
中国（2010）、欧盟、WHO
洁净度级别 浮游菌 cfu/m3
沉降菌 （90mm）
cfu /4小时
表面微生物
接触碟 （55mm）
cfu /碟
5指手套 cfu /手套
受控区域 隔离系统
洁净度级别 内部
采样频次 每次实验
相邻外部
每月一次
微生物洁净实 无菌检查（以A/B级或 每次实验
验室
A/C级为例）
微生物限度检查以A/C 每周一次
级为例）
C级
每季度一次
D级
每半年一次
监测项目 空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面 微生物（手套） 空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面 微生物 空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面 微生物（手套及操作服） 空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面 微生物（手套及操作服） 空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面 微生物 空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面 微生物
概述
悬浮粒子数和微生物数控制适用洁净级别控制的实验室。
浮游菌和沉降菌、工作台面和墙壁、表面微生物检测，控制和监测洁 净室微生物污染状况确保药品质量安全及检测结果的准确性。
单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区） 悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行 监测。
GB/T16292-2010 医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌
的测试方法
- 2010版中国药典
检验环境
国际要求:制药洁净环境分级为A级、B级、C级、D级。 A（百级）、B（千级）、C（万级）、D（十万级） 2015版药典对药品检验环境的要求 无菌检查 在无菌的环境单向流空气区域内或隔离系统中进行，符合无菌检
查的环境要求。 微生物限度检查 在无菌的环境单向流空气区域内进行，符合微生物检查的环
洁净室 检测
以下情况及时调整检测频率 ⒈连续超过纠偏限和警戒限。 ⒉关键区域内发现有污染存在。 ⒊空气净化系统进行任何重大的维修。 ⒋消毒规程改变。 ⒌设备有重大维修。 ⒍洁净室（区）结构或区域分布有重大变动。 ⒎引起微生物污染的事故。 ⒏日常操作记录反映出倾向性的数据。
2010版 GMP
采样及监测
12个月
检漏试验、 监测周期
来自百度文库
24个月
空气流速
＞.2m/s 0.2-0.5 监测周期 12个月
6
非单向流
-
-
7
非单向流
-
-
8
非单向流
-
-
物理参数 换气次数
压差
温度 相对湿度
洁净区与非洁净 区之间压差不小 于10Pa;
70-160h-1 30-70h-1
不同级别洁净区 之间的压差不小 于5Pa
监测周期 12个月
空气悬浮粒子标准
洁净度级别
A级(1) B级 C级 D级
悬浮粒子最大允许数/立方米
静态
≥0.5μm ≥5.0μm(2)
3520
20
动态(3)
≥0.5μm ≥5.0μm
3520
20
3520
29
352000
2900
352000
2900
29000
29000
不作规定 不作规定
环境的要求 ISO14644-1:2010 洁净度等级及悬浮粒子要求
ISO等级序数 （N）
1 2 3 4 5 6 7 8 9
0.1μm
10 100 1000 10000 100000
0.2μm
2 24 237 2370 23700 237000
0.3μm
10 102 1020 10200 102000
0.5μm
4 35 352 3520 35200 352000
1μm
药品洁净实验室微生物控制和监测
概述
《2015版药典》参考国家及国外标准制定了统一的标准 参考标准 ⒈ USP(35)〈1116〉药品无菌操作环境的微生物控制和监测指导原则 ⒉ ISO 14644 洁净室及相关受控环境附录无菌药品生产质量管理规范 ⒊ GB/T16292-2010 医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游和沉降菌的测试方法
监测方法
悬浮粒子、沉降菌、浮游菌、表面菌的测试方法 GB/T 16292-2010医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法； GB/T 16294-2010医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法； GB/T 16293-2010医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法。
药品洁净实验室监测项目及频次（参考）
30-65%
10-20h-1
人员
从事药品洁净实验室微生物监测和控制的人员应符合现行《中国药典 》附录中“药品微生物实验室指导原则”的相关要求。
参数确认
初次使用的洁净实验室应进行参数确认，物理参数的测试应当在微生物监测 方案实施之前进行。为 确保操作顺畅，保证设备系统的运行能力和可靠性 。 确认主要的物理参数过滤系统完整性，空气流速，气流组织、换气次数、压 差、温度和相对湿度等。 空气悬浮粒子和微生物 当人员流动、超净工作台等重大设备运转、空气调节系统等重大变化时应重 新进行参数测试。 测试结果不能作为最终判断依据，应进行综合分析判断。
胰酪大豆胨琼脂（TSA），培养温度为30℃-35℃，时间不少于2天。 沙氏葡萄糖琼脂(SDA)，培养温度为20℃-25℃，时间不少于5天。如需要可 以延长至7天。 稀释剂 0.9%无菌氯化钠溶液、pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 胰酪大豆胨肉汤（TSB）或其他适宜的稀释剂。
A级
1
1
1
1
B级
10
5
5
5
C级
100
50
25
－
D级
200
100
50
－
注：① 表中各数值均为平均值。 ②单个 沉降碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用多 个沉降碟连续进行监测并累积计数。
环境的要求
ISO14644-1:2010 洁净度等级及悬浮粒子要求
洁净度 级别
过滤完整 性
气流组织
5
单向流
监测周期
空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌的采样点、数量、位置、次数、采样量 、最少平皿数及采样注意事项参见国家标准； GB/T 16292-2010 GB/T 16293-2010 GB/T 16294-2010
洁净室环境 检测
培养基 胰酪大豆胨琼脂（TSA） 细菌、酵母菌和霉菌的生长必要时可加入添 加剂消除和减少消毒剂和抗生素的作用。， 沙氏葡萄糖琼脂(SDA)或玫瑰红钠琼脂培养基酵母菌和霉菌的监测。 通常，不监控厌氧菌，因为这些微生物在环境中不能生存。如需要应对 微需氧和低氧环境下生长的微生物进行监测。 用于环境微生物监测的培养基须特别防护。 双层包装和终端灭菌，否则使用前应进行100%的预培养以防止外来的污 染物带到环境中及避免出现假阳性结果。
5μm
8 83 832 8320 83200 832000
29 293 2930 29300 293000
GMP对洁净环境微生物监测动态标准
中国（2010）、欧盟、WHO
洁净度级别 浮游菌 cfu/m3
沉降菌 （90mm）
cfu /4小时
表面微生物
接触碟 （55mm）
cfu /碟
5指手套 cfu /手套
受控区域 隔离系统
洁净度级别 内部
采样频次 每次实验
相邻外部
每月一次
微生物洁净实 无菌检查（以A/B级或 每次实验
验室
A/C级为例）
微生物限度检查以A/C 每周一次
级为例）
C级
每季度一次
D级
每半年一次
监测项目 空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面 微生物（手套） 空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面 微生物 空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面 微生物（手套及操作服） 空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面 微生物（手套及操作服） 空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面 微生物 空气悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面 微生物
概述
悬浮粒子数和微生物数控制适用洁净级别控制的实验室。
浮游菌和沉降菌、工作台面和墙壁、表面微生物检测，控制和监测洁 净室微生物污染状况确保药品质量安全及检测结果的准确性。
单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区） 悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行 监测。
GB/T16292-2010 医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌
的测试方法
- 2010版中国药典
检验环境
国际要求:制药洁净环境分级为A级、B级、C级、D级。 A（百级）、B（千级）、C（万级）、D（十万级） 2015版药典对药品检验环境的要求 无菌检查 在无菌的环境单向流空气区域内或隔离系统中进行，符合无菌检
查的环境要求。 微生物限度检查 在无菌的环境单向流空气区域内进行，符合微生物检查的环
洁净室 检测
以下情况及时调整检测频率 ⒈连续超过纠偏限和警戒限。 ⒉关键区域内发现有污染存在。 ⒊空气净化系统进行任何重大的维修。 ⒋消毒规程改变。 ⒌设备有重大维修。 ⒍洁净室（区）结构或区域分布有重大变动。 ⒎引起微生物污染的事故。 ⒏日常操作记录反映出倾向性的数据。
2010版 GMP
采样及监测
12个月
检漏试验、 监测周期
来自百度文库
24个月
空气流速
＞.2m/s 0.2-0.5 监测周期 12个月
6
非单向流
-
-
7
非单向流
-
-
8
非单向流
-
-
物理参数 换气次数
压差
温度 相对湿度
洁净区与非洁净 区之间压差不小 于10Pa;
70-160h-1 30-70h-1
不同级别洁净区 之间的压差不小 于5Pa
监测周期 12个月