木薯粉酒精发酵实验报告详细篇
实验报告
一、实验目的
掌握木薯分酒精发酵的基本过程与主要参数的测定方法。
熟悉基本仪器的工作原理和使用方法
二、实验原理
酒精发酵是在厌氧条件下，己糖分解为乙醇并释放出二氧化碳。酒精发酵的类型有3种：即通过EMP途径的酵母菌酒精发酵、通过HMP途径的细菌酒精发酵和通过ED途径的细菌酒精发酵酵母菌通过EMP途径分解己糖生成丙酮酸，在厌氧条件和微酸性下，丙酮酸则继续分解为乙醇。
淀粉类原料的酒精发酵主要有先糖化后发酵工艺和边糖化变发酵工艺（即同步糖化发酵工艺）2种，前者发酵时间长、酒精浓度低；后者发酵时间短，酒精浓度高，而且由于没有终产物抑制，糖化酶用量也较少，因此该工艺是酒精发酵研究的重要方向之一。本实验即采用的是同步糖化发酵工艺。
液化酶即ɑ-淀粉酶，可将淀粉液化成糊精及少量麦芽糖和葡萄糖。
糖化酶是一种淀粉外切酶，能把淀粉从非还原性未端水解a-1.4葡萄糖苷键产生葡萄糖，也能缓慢水解a-1.6葡萄糖苷键，转化为葡萄糖。同时也能水解糊精，糖原的非还原末端释放β-D-葡萄糖。
三、实验材料
1、菌种
酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）GGSF16
2、培养基
斜面菌种保藏培养基：葡萄糖20g/L,酵母浸膏10g/L，蛋白胨20g/L，琼脂20g/L，加水溶解，自然pH，于121℃下蒸汽灭菌30min。
一级种子培养基：葡萄糖20g/L,酵母浸膏10g/L，蛋白胨20g/L，自然pH，于121℃下蒸汽灭菌30min。
二级种子培养基：葡萄糖20g/L,酵母浸膏10g/L，蛋白胨20g/L，pH值自然，于121℃下蒸汽灭菌30min。
发酵培养基：量取初始全渣总糖浓度291.48g/L和滤液总糖浓度295.57g/L 的木薯粉浆液ml，接种前加入用过滤膜过滤的尿素溶液，添加量为3.0g/L。3、主要仪器
标准筛40目、立式压力蒸汽灭菌器、低速台式大容量离心机、全温度恒温调速摇瓶柜、台式冷冻离心机、生物传感分析仪SBA-40C、分光光度计、酸度计、漩涡混合器、Motic数码生物镜、灭菌锅、3000ml三角瓶2个、500ml三角瓶11个、万用电炉、0.5-10ul移液枪、100-1000ul移液枪、1000-5000ul移液枪、酸式滴定管25ml。
4、溶液及试剂
菲林甲液（CuSO4·5H2O）：称取69.3g CuSO4·5H2O，加入蒸馏水定容至1000ml；
菲林乙液：（C4O6H4KNa）：称取346.0g C4O6H4KNa和100.0gNaOH，加入蒸馏水定容至1000ml；
2.5g/L的标准葡萄糖溶液：称取在102℃左右条件下，烘烤4h的葡萄糖2.5g （精确至0.0002g）加入蒸馏水定容至1000ml，12h之后可以使用；
2mol/L HCl溶液：浓盐酸5.6mL，定容至100mL容量瓶中；
质量分数为20%的HCl溶液：浓盐酸514mL，加入蒸馏水定容至1000mL 容量瓶中；
200g/LNaOH溶液：称取200g氢氧化钠，加入蒸馏水定容于1000mL容量瓶中；
2mol/L NaOH溶液：称取8g氢氧化钠，加入蒸馏水定容于100mL容量瓶中；
3g/L尿素：称取3g尿素，加入蒸馏水定容于1000mL容量瓶中；
2%二水合柠檬酸钠次甲基蓝溶液：用电子分析天平准确称取次甲基蓝和二水合柠檬酸三钠分别为10mg和2g，用蒸馏水溶解并定容至100ml。
四、实验步骤
称取过40目筛或80目筛干燥的木薯粉1453g，以料水比1：2的比例加入2906g60℃的蒸馏水，按10U/g木薯粉的量加入40000U/ml液化酶400uL，搅拌混匀后于60℃下保温30min并不停搅拌。转入灭菌锅中迅速升温到95℃，保温液化1h，期间不停搅拌，尽量不要让木薯粉浓醪中的固体颗粒粘连于容器壁上。然后降温至50-60℃，取10ml全渣液备用测总糖，将液化后的全渣液过滤，制的滤液测总糖。根据测得滤液的总糖浓度调滤液的总糖浓度至270g/L，于121℃下灭菌30min，然后冷却至33℃左右。按250U/g木薯粉的量加入100000U的糖化酶。按接种量为10％接种酿酒酵母GGSF16至液化糖化后的醪液中，同时加入3g/L尿素，分别取样10mL置于两个三角瓶中用于测定初总糖和初还原糖。余下的分装到10三角瓶，每瓶约300ml，分别接上发酵栓，并于33℃发酵，转速为160r/min，摇床培养72h，期间每隔6h取样分析。发酵结束后，测定细胞数、OD值、总糖含量、还原糖含量、酒精度、葡萄糖含量。木
薯粉酒精发酵工艺流程图如下
图4-1木薯粉酒精发酵工艺流程图
Fig.4-1 the process flow diagram of cassawa starch ethanol fermentation
五、实验检测方法
1、测总糖
(1)原理
本次试验采用的测总糖的方法是斐林试剂法，因此直接滴定前需要在试样加入盐酸并在加热条件下使试样中非还原糖部分酸解为还原性糖。菲林试剂是由甲、乙两种溶液组成。甲液含质量分数为0.05 g/mL的硫酸铜和次甲基蓝(氧化还原指示剂)；乙液含质量分数为0.1 g/mL的氢氧化钠，酒石酸钠。
将一定量的碱性酒石酸铜甲液和乙液等体积混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀所生成的氢氧化铜沉淀与酒石酸钠反应，生成可溶性的酒石酸钾钠铜。
在加热条件下，用样液滴定，样液中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，酒石酸钾钠铜被还原糖还原，产生红色氧化亚铜沉淀，还原糖则被氧化和降解。反应生成的氧化亚铜沉淀。
滴定时以亚甲基蓝为氧化－还原指示剂。因为亚甲基蓝氧化能力比二价铜弱，待二价铜离子全部被还原后，稍过量的还原糖可使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型的亚甲基蓝，即达滴定终点。根据样液量可计算出还原糖含量。
(2)步骤
试样制备
称取10mL过滤液试样于250mL三角瓶中，加70mL蒸馏水和20mL质量分数为20%的HCl溶液，沸水浴中水解60min，冰水迅速冷却，以200g/L的NaOH 溶液中和到微酸性pH为5-6之间，加入蒸馏水定容到250mL，振荡摇匀，倒入
离心管中，以4000r/min的转速离心10min，取滤液备用。
②斐林试剂所消耗葡萄糖标准溶液的体积标定
A. 预备试验：吸取斐林甲液、乙液及标准葡萄糖液各5mL于250mL三角瓶，加20mL蒸馏水，摇匀，在电炉上加热，从沸腾开始计时约2min，加入亚甲基蓝溶液2滴，在沸腾状态下1min用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失为止。记录标准葡萄糖液消耗的总体积。
B. 正式试验：吸取斐林甲液、乙液及标准葡萄糖液各5mL于250mL三角瓶，加蒸馏水20mL，滴入少于预备试验1毫升的2.5g/L的标准葡萄糖溶液，置电炉上沸腾2min，滴入亚甲基蓝2滴，沸腾状态下1min以标准葡萄糖溶液滴定，至溶液蓝色刚好消失。记录标准葡萄糖液消耗的总体积，并做平行试验，使两次滴定结果之差在0.1mL之。
③试样总糖的测定
A.预备试验：吸取斐林甲液、乙液及待测液各5mL于250mL三角瓶，加20mL蒸馏水，摇匀，在电炉上加热沸腾，2min后加入亚甲基蓝溶液2滴，在沸腾状态下1min用标准葡萄糖液滴定至蓝色消失为止。记录标准葡萄糖液消耗的总体积。
B.正式试验：吸取斐林甲液、乙液及待测液各5mL于250mL三角瓶，加蒸馏水20mL，加入少于预备试验1毫升的2.5g/L标准葡萄糖溶液，置电炉上沸腾2min，滴入亚甲基兰2滴，沸腾状态下1min以标准葡萄糖溶液滴定，至溶液蓝色刚好消失为止。记录标准葡萄糖液消耗的总体积，并做平行试验，使两次滴定结果之差在0.1mL之。
(3)计算公式
总糖含量（以葡萄糖计，g/L）=（A-B）×0.0025×250×1
5×
1
10
式中：
A—标定10ml菲林试剂所消耗的标准葡萄糖溶液的体积，mL；
B—往10ml菲林试剂中加入5ml水解后试样消耗标准葡萄糖溶液的体积，mL；
5—定糖时，用移液管吸取5ml试样水解液的体积，mL；
2.5—实验前配制好的标准葡萄糖溶液的浓度，g/L；
250—试样水解液的定容体积，mL；
10—取木薯粉浆液化滤液的体积，mL
2、测还原糖
本实验仍然采用斐林试剂法测定过滤液中的还原糖，因此不需要对过滤液进行酸解，原理与计算方法如上
（1）试样的制备
称取糖化醪试样10mL加蒸馏水定容至250mL，振荡摇匀，倒入离心管中，以4000r/min的转速离心10min，取滤液备用。
（2）试样还原糖的测定
预备试验：同总糖的测定。
正式试验：同总糖的测定。
3、细胞数
(1)原理：
用血球计数板在在显微镜下直接技术是一种常用的微生物技术方法，本次试验采用的是三目生物显微镜，可以将显微镜观测到的细胞成像在电脑上，方便计
酵母菌酒精发酵实验报告
实验方案 酵母菌酒精发酵的条件研究 学院（部）：生物与化学工程学院 专业：生物工程 学生姓名：鑫 学号：11018150 班级：生物工程二班 指导教师：肖
一、实验目的 1、学会实验的设计和操作过程 2、找到酵母菌发酵时的最优条件 二、培养基和实验方法及材料的确定 1、玉米粉的糖化方法 玉米粉的糖化采用双酶法，其工艺流程如下 玉米粉→加水→液化→糖化→发酵→蒸馏→成品酒精 试验中，发酵培养按照三角瓶100ml培养。本次工做20组是要，共需发酵液20*100=2000ml。培养液按照100g玉米粉、300ml水。所以共需玉米粉700g。 液化：取１００ｇ玉米粉，加入３００ｍＬ的水，液化温度为９０℃，ｐＨ值为５．５，液化时间为３．５ｈ，液化酶的添加量为０．０３５ｇ／１００ ｇ玉米粉 糖化：糖化时的工艺条件为：糖化温度为５８℃，ｐＨ值为４．５，糖化时间为３．５ｈ，糖化酶的添加量为０．３ｇ／１００ｇ玉米粉。 2、活化培养基 本实验在进行实验时采用察氏(czapck)培养基的配制，配方如下表一： 表一 3、扩大培养基 扩大培养仍然用察氏(czapck)培养基，由于要用液体的，所 以将其中的琼脂配料去掉。 4、发酵培养基
糖化液稀释至l0%浓度，添加辅料（硫酸铵0.4%），pH5.5 灭菌 三、培养基的制备及酵母的活化 1、准备酵母母菌一支常温下存放一天，增加菌种的活力。在母菌存放期间制作各时期培养基 2、准备固体培养基（察氏培养基）50ml，做成8支试管斜面，扩大培养基800ml（做扩大培养时使用）。做成8个三角瓶，每瓶200ml。120℃灭菌30min。 3、发酵液的制备 （1）玉米粉的筛选 实验前准备粉碎后的玉米粉700g。 （2）玉米粉的液化 按照100g玉米粉、300ml水的配比对玉米粉进行液化，液化方案上文已经交代。在1000ml烧杯里，或者500ml烧杯分两次，水浴液化。 器材：烧杯500ml两个，玻璃棒一个，水浴锅一个，糖化酶0.225g 步骤：1、将糖化酶，玉米粉，水按照比例配置好在烧杯里。2、将配好的玉米液放于水浴锅中90℃液化3.5h。边液化边搅拌。 （3）玉米粉的糖化 将液化后的玉米液中按照0.3g/100ml加入液化液中。再在水浴锅中，58℃糖化3.5h。 （4）过滤 糖化后的糖化液有可能有没有彻底液化的玉米颗粒，会造成浑浊，这时需要对糖化液进行过滤操作。 操作步骤： 最后与以上培养基一起进行灭菌处理。灭菌时，清洗16支移液管，与培养基一起灭菌。 （5）活化步骤 器材：酒精灯，接种针，母菌，斜面培养基，消毒酒精。 步骤：1、将器材放于实验台上。对双手合桌面进行灭菌。对接种针进行灼烧灭菌。2、在酒精灯旁按照无菌操作步骤在酒精灯火焰旁取
木薯为原料的酒精酿造工艺
木薯为原料的酒精酿造 工艺 Company Document number：WUUT-WUUY-WBBGB-BWYTT-1982GT
以木薯为原料的酒精酿造工艺木薯具有良好的加工性能，也不与粮食作物争地，是一种有很大发展潜力的酒精生产再生资源，将其应用到发酵工业，具有广阔的发展前景。据相关资料显示广西的木薯产量较大，全国60%的木薯淀粉是由广西生产，广西对于生产木薯酒精具有独特的优势。以木薯为原料进行酒精发酵的工艺较成熟。本文简述了木薯原料预处理、液化、酶糖化、发酵酒精生产工艺。木薯是热带和亚热带广泛种植的粮食和经济作物，适应性很强，耐旱、耐瘠、耐水，对土地的质量要求不高，是可在任何土质中生长的作物。我国南方盛产木薯，产量高，淀粉含量高。木薯的块根淀粉含量达25%-30%左右，木薯干淀粉含量达70%左右，是被誉为“淀粉之王”。木薯已被世界公认是具有很大发展潜力、很有前途的酒精生产的可再生资源。近年来，随着木薯原料用于生产酒精渐渐收到人民的重视，国内外学者都致力于木薯生产酒精工艺的研究。下面就木薯原料预处理、液化、酶糖化、发酵酒精生产工艺这四个方面进行简单的介绍。 一、原料的预处理 原料在进行正式生产之前，必须预处理，以保证生产的正常进行和提高生产的效益，预处理包括除杂和粉碎两个工序。木薯在收获和干燥过程中，经常会惨夹进泥土、沙石、粗纤维，金属杂质等杂质，这些杂质如果没有在正式投入生产之前清除，将严重影响生产的正常进行。石块和金属杂质会使粉碎机的筛板磨损或损坏，造成生产的中断；机械设备运转部位，会因泥沙的存在而加速磨损，泥沙等杂质也会影响正常的发酵过程。所以用木薯原料生产酒精前，必须进行除杂，以保证生产的正常进行和提高生产的效益。 2、原料的粉碎木薯原料粉碎可以使原料的颗粒变小，原料的细胞组织部分破坏，淀粉颗粒部分外泄，增加原理的表面积，在进行水热处理时，加快原料的吸水速度，降低水
工业酒精的制备实验报告
工业酒精的制备 实验报告 学院：生物与化学工程学院班级：化工141 姓名： 学号： 实验日期：2017年6月20日
一、实验目的 1.熟悉精馏塔的结构和精馏流程，掌握精馏塔操作方法； 2.了解板式塔的结构，观察塔板上汽-液接触状况； 3.掌握精馏过程的基本操作及调节方法； 4.掌握测定塔顶、塔釜溶液浓度的实验方法； 5.掌握精馏塔全塔效率的测定方法； 6.掌握求取理论板数的方法。 二、应用背景 乙醇（ C2H5OH ），俗名酒精，是基本的工业原料之一，与酸碱并重，它作为再生能源尤为受人们的重视。乙醇有相当广泛的用途，除用作燃料、制造饮料和香精外，也是一种重要的有机化工原料，如用乙醇制造乙酸、乙醚等；乙醇又是一种有机溶剂，用于溶解树脂，制造涂料。 乙醇精馏是生产乙醇中极为关键的环节，是重要的化工单元。其工艺路线是否合理、技术装备性能之优劣、生产管理者及操作技术素质之高低，均影响乙醇的产量及品质。工业上用发酵法和乙烯水化法生产乙醇，但不管用何种方法生产乙醇，精馏都是其必不可少的单元操作。 三、合成方法 酒精的工业生产方法可分为发酵法和化学合成法两大类； （1）发酵法是利用淀粉质原料或糖质原料，在微生物的作用下生成酒精，根据原料的不同，又可分为： A.淀粉质原料发酵生产酒精这是我国当前生产酒精的主要方法，它是利用薯类、谷物及野生植物等含淀粉的原料，在微生物的作用下将淀粉水解为葡萄糖，再进一步发酵生成酒精。整个生产过程包括原料蒸煮、糖化剂制备、糖化、酒母制备、发酵及蒸馏等工序。 B.糖蜜原料发酵生产酒精直接利用糖蜜中的糖分，经过稀释并添加部分营养盐，借酒母的作用发酵生成酒精。 C.亚硫酸盐纸浆废液发酵生产酒精造纸原料经亚硫酸盐液蒸煮后，废液中含有六碳糖，这部分糖在酵母作用下可以发酵生成酒精，主要是工业酒精。 （2）化学合成法生产酒精是利用炼焦炭、裂解石油的废气为原料，经化学合成反应而制成酒精。生产方法又可分为间接水合法和直接水合法两种，目前工业上普遍采用后者。 A.间接水合法又称硫酸水合法，它的生产过程是将乙烯与硫酸经加成作用生成硫酸氢乙脂，再进行水解，生成乙醇和硫酸。此法的缺点是对设备腐蚀严
木薯酒精厂废水处理
木薯酒精污水处理工艺技术方案 投标书
前言 中国从九十年代开始使用木薯生产酒精，这几年木薯酒精已成为“主流”，但产生的废液主要借鉴玉米、小麦等酒精废液的处理技术。十多年来，木薯酒精废液处理取得了不少成绩，也走了不少的弯路。由于木薯酒精废液中木薯渣的特殊性，国内对于木薯酒精废液的处理投资大，成功率低，总体来说，处理效果并不理想。 我公司多年致力于木薯酒精废液处理的研究，在实验室进行了多次、多种小试实验，成功提出了对于木薯酒精废液处理的一些想法和建议，并将部分实验结果成功应用于工程实践，取得了较好的成果。 本方案在组合优化原有各段成功处理工艺的前提下，提出合理的处理工艺。首先对处理工艺的基本思路做如下介绍： 木薯经过发酵提取酒精后，排出废醪液进入污水处理系统。废醪液有以下特点： 1、泥砂含量大 会在后续的水处理构筑物中沉积，减小有效容积，降低构筑物的可利用容积；同时，对卧式螺旋离心机、水泵、换热器、管道也造成很大的磨损。 如果不去除，肯定会淤积在一级厌氧罐中，并且极难从厌氧罐中排出来。 2、木薯渣沉降速度快 木薯渣进入水处理构筑物内，会很快沉积在构筑物底部，靠单纯
的排泥和提高上流速度来排除构筑物内木薯渣，肯定会遇到重大问题。 并且，由于木薯渣特别容易沉淀，会造成带式压滤机、板框压滤机的脱水效果不好，损坏滤袋、滤布等。 3、木薯渣较难生物降解 通过反复试验，经过清洗烘干后的干木薯渣基本不能短时间产生沼气，而含木薯渣的废醪液能大量产气，其原因是木薯渣中夹带的高浓度有机废水在发生作用，废水中的COD Cr产生沼气。所以，想通过在构筑物内提高停留时间，让木薯渣自行降解，是不可行的。 4、造成反应器淤塞、混合困难、进水堵塞。 根据以上提出的木薯渣的特点，一旦木薯渣进入反应器内，会很难自动出来，会造成反应器有效容积逐步减小，泥水混合困难，进水压力增加，进水管堵塞，需要定期进行开罐、放空清理。 尽管，我们可以通过除渣机系统控制排出木薯渣的量（前提是要对泥砂、大块渣进行事先去除），但由于在外排木薯渣的同时，微生物也会大量外排，很难做成“高负荷”厌氧反应器。根据我们的工程经验，只可以控制负荷在６~８kgCOD/(m3.d)。 5、造成好氧池淤塞、曝气系统堵塞 颗粒较小的木薯渣容易随水流进入好氧系统，在好氧池内沉积，堵塞曝气系统。尤其是在停留曝气一段时间后，堵塞现象更加严重。 根据以上木薯酒精废水的特点及会造成的影响，我们对于新建系统有如下想法：
酒精发酵实验(修改后)
实验五酒精发酵系列实验 5.1 酒精酵母的培养 一、实验目的 1.了解酒精发酵的主要类型及其控制条件。 2.熟悉酒母的培养方法。 3.掌握酒精发酵的操作方法。 二、实验原理 在厌氧条件下，己糖分解为乙醇并放出二氧化碳的作用，称为酒精发酵作用。酒精发酵的类型有三种：1、通过EMP途径的酵母菌酒精发酵；2、通过HMP途径的细菌酒精发酵（即异型乳酸发酵）；3、通过ED途径的细菌酒精发酵。在工业酒精和各种酒类的生产中，酒精发酵作用主要是由酵母菌完成的，因此酵母菌的酒精发酵作用是它们的工艺基础。 酵母菌通过EMP途径分解己糖生成丙酮酸，在厌氧条件和微酸性条件下，丙酮酸继续分解为乙醇。但是如果在碱性条件或培养基中加有亚硫酸盐时，产物就主要是甘油，这也就是工业上的甘油发酵。因此，如果酵母菌要进行酒精发酵，就必须控制发酵液在微酸性条件。 三、实验器材 酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)菌种，培养基、蒸馏水、无菌水、铝锅、电炉、三角瓶、牛皮纸、棉绳、水浴锅、振荡器。 四、方法步骤 4.1 酒母的制备 4.1.1 培养基配方 红糖100g，硫酸铵2.0g，磷酸二氢钾1.0g，自来水1000ml，pH自然。配好后的发酵培养基分装入205ml三角瓶中，每瓶100ml，湿热灭菌20min。 4.1.2 酒母扩大培养 根据上诉配方配制培养基，按下述步骤，灭菌、接种、培养。 4.1.2.1 酒母扩大培养 4.1.3成熟酒母质量指标 要求细胞形态整齐、健壮、没有杂菌。酵母的细胞数为1亿/ml左右，出芽率在15～30%，酵母死亡率≤1%。 五、实验报告 记录实验结果。 六、思考题 1.如何培养酒母？酒母培养要点是什么？
木薯酒精产业的社会效益和经济效益分析
木薯酒精产业的社会效益和经济效益分析 1 前言 当矿物质能源日益枯竭的时候，人们把目光转向了可再生能源；当以粮食为主要原料的可再生能源影响国家粮食安全的时候，人们把目光转向以非粮的薯类原料制造酒精的王牌→木薯 2 以木薯为原料生产酒精的优势 生产酒精的原料主要有粮食类、薯类和糖蜜。其中用木薯生产酒精与其它作物相比，有着不可比拟的优势： （1）木薯是非粮食农产品，且对土质的要求低，耐旱、耐瘠薄，符合“不争粮，不争（食）油，不争糖，充分利用边际性土地（指基本不适合种植粮、棉、油等作物的土地）”的国家粮食发展战略，同时用于发展燃料乙醇也很符合当前国家生物质能源发展战略，有利于保障国家粮食安全和能源安全。 （2）用木薯生产酒精最具有经济性，详见下表： 占全国产量的70%；广西属北回归线以南，是木薯产品适宜种植区，种植木薯有利于改善本地农村贫困人口的生产生活状况；木薯酒精在广西的产业化可形成农业产业化和生态经济、循环经济的模式，促进区域经济发展。 3 制约木薯酒精发展的因素 制约木薯酒精发展的因素，关键在于没有把它作为一个产业来对待，上缺统一规划、行业指导，下缺农工协调、各自为政，结果是：资本集中度低，产业集中度低，技术水平低，环保措施投入小，经济效益差，主要表现在： 3.1 布局不合理 工厂远离原料主产区，缺乏资源优势，运输生产成本偏高。 3.2 工厂规模小 到目前为止，约有木薯酒精生产企业30余家，年产木薯酒精70多万吨，平均每
个生产企业日产133吨，难获规模经济效益。 3.3 技术水平 整体技术水平低，存在料耗高、能耗高、成本高及废渣处理难、废液处理达标排放难的问题，难显经济效益。 3.4 原料情况 原料市场不稳定，木薯种植缺乏组织性，种植粗放，且品种单一、单产低。4 提高木薯酒精效益的途径 提高木薯酒精的效益，关键在于从木薯酒精产业化和发展生态经济、循环经济的高度，统筹规划、合理布局；典型示范、正确引导；提升产业技术水平、形成循环经济规模。 木薯生态产业示意图 4.1 实现木薯种植的规模化、科学化 （1）推广木薯地套种西瓜、花生、南瓜技术，增加农民收入，提高农民种植积极性，稳定原料来源。以西瓜为例：套种西瓜每亩可收获3000斤，按0.6元/斤计算（现行价），农民可收入1800元。 （2）延长生木薯生产周期，降低原料成本。建立木薯原料基地，引进、繁育早、中、晚熟期木薯品种，延长鲜薯收获期，同时推广高产、高含淀粉木薯良种，提高木薯质量，确保以鲜木薯为原料占生产用料的70%以上。 （3）选择最佳种植优势区域。北回归线以南，属亚热带季风气候区，光照充足，气温适宜，是木薯最佳种植区域，该区域10℃以上年积温达6500℃以上，年10℃以上气温天数在280天以上，该区域木薯具有单产达到3吨的潜力，木薯质量较好，木薯平均含粉量比其他区域高1-2%，广西的木薯种植面积四分之三以上都在这些区域。 4.2 实现制造过程的现代化、高效化 （1）采用低温双酶快速糖化，可提高20-30%的设备利用率，比传统的单酶法节约5—10%的加工成本，约45元。 （2）采用浓醪生产工艺，木薯干片或鲜木薯发酵成熟醪酒精浓度可达到12%（V/V）以上，比传统的生产工艺提高1—2个酒份，可减少煤耗10-20%，降低加工成本80元/吨。 （3）采用大罐连续发酵，发酵速度快，发酵周期比运行状态良好的间歇发酵工艺要缩短8—10小时，特别是无需空罐灭菌，也无空罐时间，节约了间歇发酵的刷罐用水、灭菌用汽和人工等消耗，设备的利用率可提高15—20%。 （4）生产食用酒精可采用二塔、三塔或多塔蒸馏设备，按目前的技术水平，采用二塔常压蒸馏，比多塔蒸馏节约用汽，且技术线路较为简单，操作较容易。若采用自动化控制，效果会更好。 （5）采用CIP（Clean In Place）在线清洗，酸水、碱水可循环使用，达到清洗灭菌的目的。
木薯酒精发酵实验 生物101班-20130513
木薯酒精发酵实验 一、实验目的 掌握酒精发酵的基本原理。 二、实验原理 酒精发酵是在厌氧条件下，己糖分解为乙醇并释放出二氧化碳。酒精发酵的类型有3种：即通过EMP途径的酵母菌酒精发酵、通过HMP途径的细菌酒精发酵和通过ED途径的细菌酒精发酵酵母菌通过EMP途径分解己糖生成丙酮酸，在厌氧条件和微酸性条件下，丙酮酸则继续分解为乙醇。而如果在碱性条件或者培养基中加有亚硫酸盐时，则发酵的主要产物是甘油，这也是工业的甘油发酵。因此，如果要用酵母进行酒精发酵，就必须控制发酵液的微酸性条件。 三、实验材料 1. 菌种 酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）GGSF16 2. 培养基 ① YPD（Y east extract P eptone D extrose）broth：葡萄糖20 g/L，酵母膏10 g/L，蛋白胨10 g/L，自然pH，115℃灭菌20min。用于种子培养。 ②YPD Agar: YPD加1.5-2%(w/v) Agar，用于斜面（菌种活化）。 ③木薯粉发酵培养基：料水比(1：2.3) *的木薯粉，经液化糖化，调节pH至4.5，添加相应营养盐至终浓度为MgSO4·7H2O 0.45g/L，KH2PO4 1.5g/L，CaCl2 0.2g/L，115℃灭菌20min，冷却，添加NH4Cl 0.6g/L至灭菌醪液中。 (*配置150mL发酵酒精度为6%(v/v)的发酵培养基，每瓶需木薯粉21.72g。每人一瓶，150mL培养基装于500mL三角瓶中。) 3. 溶液及试剂 ①2.5g/L的标准葡萄糖溶液：称取105℃左右烘干至恒重的葡萄
糖2.5g，加水溶解，加浓盐酸5mL，蒸馏水定容至1000mL容量瓶。提前2-3天配好备用。 ②用NH4Cl代替尿素，使用时终浓度为0.6g/L。 ③菲林甲液：34.65g硫酸铜加蒸馏水定容至500mL。 ④菲林乙液：173g酒石酸钾钠加50g氢氧化钠，加蒸馏水定容至500mL。 ⑤质量分数为20%的HCl溶液(总糖的测定-消化)：浓盐酸257mL，定容至500mL容量瓶中。 ⑥2mol/L H2SO4溶液(调发酵液pH)：吸取浓硫酸5.6mL缓慢加入适量水中，冷却后定容至100mL。 ⑦200g/L NaOH溶液(总糖的测定-消化)：100g氢氧化钠定容于500mL容量瓶中。 ⑧2mol/L NaOH溶液(酒精度测定)：4g氢氧化钠定容于50mL容量瓶中。 ⑨亚甲基兰溶液（1%，w/v）: ⑩消泡剂 4.主要药品与试剂来源见表 1 表 1主要药品与试剂 Table 1 Main chemicals and reagents 产品名称规格产地/厂家 葡萄糖AR 天津市科密欧化学试剂有限公司 酵母浸膏BR 广东环凯微生物科技有限公司 细菌学蛋白胨BR 广东环凯微生物科技有限公司 磷酸二氢钾AR 广东光华化工厂有限公司 无水氯化钙AR 广东台山市化工厂有限公司氯化铵AR 广东台山市化工厂 七水硫酸镁AR 广东台山粤侨试剂塑料有限公司
生物工程毕业论文年产10万吨的木薯酒精发酵工厂设计
生物工程毕业论文--年产10万吨的木薯酒精发酵工厂 设计 摘要 酒精在人们日常生活以及科学研究等诸多领域都有很广泛的应用世界行业以及我国酒精行业都快速发展趋势Alcohol has very extensive application in a great deal of fields such as peoples daily life and scientific research The trades and alcohol trades of our country have fast development trends on earth in the world The output is increased progressively year by year The ability for producing alcohol of the fermented law will become the sign of a national economic strength The fermented law is mainly to utilize microorganism to have no oxygen to ferment it suck candy material likesugarcane sweet potato carbohydrate in the material such as the maize are turned into ethanol turn into alcohol This law raw material sources are abundant the environmental protection of the production process is worth popularizing in a more cost-effective manner Originally design the fermented workshop produced to alcohol to calculate with the selecting type of the apparatus strive to make the theory combine with practice Keyword Alcohol Fermented law Fermented workshop 一酒精的主要性质
木薯酒精发酵
木薯酒精发酵 王国东 201311805115 随着中国经济的快速发展，能源的过度消耗与利用，造成石油、天然气、煤等不可再生化石能源的严重短缺，寻找替代能源迫在眉睫，可再生的生物能源具有广阔的市场前景。在我国，玉米、小麦、水稻、马铃薯、红薯等作物中的淀粉是传统的酒精生产原料，不仅生产成本昂贵又会影响国家粮食安全，为此酒精生产原料“非粮化”是发展趋势。因此，来源广泛、成本低廉的生物燃料酒精生产原料成为国内外研究与开发的重点。木薯粗生快长，适应性好，耐瘠、耐旱，能在边际土壤中生长，广泛种植于广西、云南、海南、广东、福建等省区，是我国南方一种非常重要的经济作物。同时，木薯淀粉(25％～35％)含量高又不与粮食争地，符合国家大力发展生物质能源的规划要求，作为可替代生物质能源，极具应用与发展前景，是一种极好的酒精生产原料 目前，我国在木薯淀粉发酵生产酒精的研究与开发方面，莫丽春、赵江、陆雁、易弋等采用木薯粉和干片在低温水解和浓醪发酵等方面进行过较为详尽的研究，而在高温水解和稀醪发酵等方面研究报道还相对较少。木薯淀粉发酵生产酒精的最佳工艺条件为时间84 h、温度40℃、硫酸铵用量1.2％和酵母用量15％，在此工艺条件下生产酒精，酒精值高达11.16％(V／V)，出酒率为52.19％，比玉米、小麦、水稻、马铃薯、红薯等淀粉质为原料的出酒率都高，说明木薯淀粉是一种生产酒精的极好原料。木薯已被世界公认具有很大发展潜力、很有前途的酒精生产的可再生资源。近年来，随着木薯原料用于生产酒精逐渐受到人们的重视，国内外学者都致力于木薯生产酒精工艺的研究。 1木薯的预处理 木薯原料在进行正式生产之前，必须预处理，以保证生产的正常进行和提高生产的效益，预处理包括除杂和粉碎两个工序。 1.1原料除杂 木薯在收获和干燥过程中，经常会掺夹泥土、沙石、粗纤维、金属杂质等杂质，这些杂质如果没有在正式投入生产之前清除，将严重影响生产的正常进行。石块和金属杂质会使粉碎机的筛板磨损或者损坏，造成生产的中断；机械设备运
酒精发酵工艺
酒精发酵工艺 李洋41116115 摘要 酒精是一种可再生能源，酒精发酵原料来源广泛，供应充足，推行乙醇汽油清洁燃料，可以解决国家石油短缺，粮食过剩及环境恶化三大热点问题。 正文 一．背景（全球能源短缺） 能源是人类社会发展的重要基础资源。特别是随着世界经济的发展、世界人口的剧增和人民生活水平的不断提高，世界能源需求量持续增大，由此导致对能源资源的争夺日趋激烈、环境污染加重和环保压力加大。促使我们更加关注世界能源的供需现状和趋势，也更加关注中国的能源供应安全问题。 根据美国能源信息署（EIA）最新预测结果，随着世界经济、社会的发展，未来世界能源需求量将继续增加。预计，2010年世界能源需求量将达到105.99亿吨油当量，2020年达到128.89亿吨油当量，2025年达到136.50亿吨油当量，年均增长率为1.2%。欧洲和北美洲两个发达地区能源消费占世界总量的比例将继续呈下降的趋势，而亚洲、中东、中南美洲等地区将保持增长态势。伴随着世界能源储量分布集中度的日益
增大，对能源资源的争夺将日趋激烈，争夺的方式也更加复杂，由能源争夺而引发冲突或战争的可能性依然存在。 未来世界能源供应和消费将向多元化、清洁化、高效化、全球化和市场向发展。酒精就是一种良好的清洁能源。 近年来，世界酒精产量一直处在高速攀升中，2006年产量达4063万t，较2005年的3655万t，增加了408万t，增幅达11.16%。2006年世界酒精产量最大的三个国家，美国.巴西.中国，分别占世界份额38.37%. 33.55%. 13.54%。2007年中国酒精产量达到620万t，2008年超过700万t。（最新数据无法获取） 二．发展意义 酒精化学名称为乙醇，分子式为C2H5OH,相对分子质量为46.07。无水乙醇是无色透明，易挥发，具有特殊芳香和强烈刺激味的易燃液体。酒精的用途主要有三个方面：燃料酒精，食用品酒精，化工医药用酒精，而前者是酒精的主要用途。 燃料酒精作为一种清洁能源，是指向汽油或柴油中加入一定比例的无水乙醇作为燃料使用。酒精作为一种新能源，其优势在于发酵酒精是源于太阳能的一种生物质能转化能源，属于可再生能源。燃料酒精被认
酒精发酵大实验指导书
生物工程专业综合（设计）性大实验 报告书 学生姓名：徐从富 学号：3092106237 班级：生工2092 专业：生物工程 指导教师：魏胜华 2012年12月
安徽工程大学实验报告书 学号：3092106237 专业班级：生物工程 实验类型设计□创新实验日期：2012/12/19——2012/12/26 实验成绩： （酒精发酵实验为例需学生完成以下主要内容） 一、当前酒精生产工艺的技术进展及现状 二、实验目的 三、实验原理 3.1 酒精发酵工艺原理 3.2酒精生产工艺流程及工艺参数选择与依据 3.3酒精发酵工艺流程（方框图） 3.3糖化工艺参数选择 3.4发酵工艺参数选择 四、材料与方法 4.1 原料、药品以及仪器设备 4.2分析测定方法 五、实验结果与分析 六、讨论 七、参考文献 八、要求 1.遵守实验室纪律，保持实验室卫生，每天实验结束后将实验室彻底打扫，离开实验室时保证水、电的安全，并注意关闭窗，门。 2.实验态度严肃，认真，实验前要对实验所用仪器、设备的使用方法和注意事项弄清楚，熟悉实验方法，购买所需原料、试剂，配制所需的溶液，实验前后认真清洗仪器设备。 3.实验采用分组方式，实验内容按任务书要求完成，如更改必须在指导教师同意下进行。 4.严格按照工艺流程和工艺参数进行操作； 5.值班时定时取样，按标准分析方法，进行认真测定；填好试验纪录表，试验数据真实。 6.对原始记录进行必要的分析、整理。包括实验数据与理论值的比较，产生误差的原因及减小误差的方法，实验故障原因的分析等。总结试验结果，认真完成综合实验报告并
附原始记录表，用打印纸打印装订。 7.总结本次实验的体会和收获。 8.实验报告应简单明了，语言通顺，图表数据齐全规范。 生物工程专业设计（综合）实验任务书 设计（综合）实验名称：生物工程专业设计（综合）大实验 实验时间：第十六～十九周 实验内容： 淀粉质原料发酵生产酒精大实验 1.完成淀粉质原料成分的测定 2.完成糖化试验及过程参数的测定； 3.完成发酵试验及过程参数的测定； 4.完成酒精蒸馏及参数的测定； 5.计算酒精的得率。 实验要求： 1.完成实验设计报告书； 2.完成实验记录表； 3.完成实验总结报告； 4.上述报告用A4纸打印装订成册 打印要求：标题小4黑体字，正文小4楷体，单倍行距，页眉小5宋体（单页：生物工程专业设计（综合）实验，双页酒精发酵实验报告）。 注：实验报告、实验总结报告严禁雷同。 附：实验设计报告书内容格式（见实验指导书） 附录： 1.实验原始记录表 2.实验过程参数选择记录 酒精发酵生产设计（综合）实验原始记录表 姓名：徐从富 学号：3092106237 实验时间：12/19——12/26 同组成员：范振辉、汪加伟、郑晓丽、申珅、范捷 测定指标 1.** （填写你实验中所用的淀粉原料）淀粉主要质量控制指标的测定 表1 淀粉质原料水分和淀粉含量
木薯燃料乙醇
木薯燃料乙醇 链接：https://www.360docs.net/doc/ca10960672.html,/baike/1321.html 木薯燃料乙醇 木薯燃料乙醇 木薯系淀粉质原料，用途比较广泛，近年来随着我国乙醇产能迅速增长，木薯需求量也大增，每年均需从国外大量进口，2004年以来，连续3年进口量均超过300万t，价格也在逐年攀升。2006年11月广西木薯干收购价格已涨至1200元/ t。 制作工艺 同为淀粉质原料，除原料前处理工段有所不同外，制糖和发酵等工段与玉米乙醇是相同的。根据上述工艺要求，年产6万t燃料乙醇的生产厂，按2006年中期市场价格计，固定资产总投资1.25亿元，包括配套热电站一座。年销售收入2. 74亿元，其中主产品6万t燃料乙醇销售收入2.52亿元。5500t饲料酵母销售收入2200万元，年利税1166.8万元。燃料乙醇单位成本核算结果为：总成本4612.2元，副产品抵扣为366.6元，单位成本为4245.6元。 木薯乙醇主要存在问题 一是原料的可靠供应问题，即国内木薯生产难以满足发展燃料乙醇需要。 二是原料价格上扬问题，由于木薯的综合利用价值较低，副产品收益少，因此原料价格对生产成本的影响更明显；如上述工厂若按同期泰国市场木薯干价格（合人民币800元/t）进原料，则上述项目年利税可达7886.8万元。但2006年以来木薯干进口到岸价在120～140美元/t。因此木薯乙醇的成本更难以明显下降。每吨木薯燃料酒精成本较以玉米为原料的燃料酒精每吨成本高500元左右。 三是环保问题，木薯乙醇废液治理难度大是环保界公认的。目前绝大多数木薯乙醇厂排放的废液未经有效处理即排放，对当地及下游环境造成严重影响。上述问题严重制约了木薯燃料乙醇的发展。 原文地址：https://www.360docs.net/doc/ca10960672.html,/baike/1321.html 页面 1 / 1
糖发酵实验报告
糖发酵试验 一、目的 1．了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。 2．掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 二、原理 多糖?单糖?丙酮酸?酸性产物(或产酸产气)?ph下降?指示剂呈酸性变色(若产气者有气泡出现)。 不同的细菌可根据分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。是否产酸，可在糖发酵培养基中加入指示剂（通常为溴甲酚紫，即b.c.p，其ph在5.2以下呈黄色，ph在6.8以上呈紫色），经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。是否产气可在发酵培养基中放入倒置小倒管观察。 不同的微生物具有发酵不同糖（醇）的酶类，所以发酵途径及发酵产物各不相同。例如：大肠杆菌能使乳糖发酵，产酸产气，而伤寒杆菌则不能；大肠杆菌能使葡萄糖发酵，产酸产气，而伤寒杆菌则只产酸、不产气。 糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和气体(如氢气、甲烷、二氧化碳等)；有些细菌只产酸不产气。例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。发酵培养基含有蛋白胨，指示剂(溴甲酚紫)，倒置的德汉氏小管和不同的糖类。当发酵产酸时，溴甲酚紫指示剂可由紫色(ph6.8)变为黄色(ph5.2)。气体的产生可由倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。 三、器材 1．菌种大肠杆菌,普通变形杆菌斜面各一支。 2培养基葡萄糖发酵培养基试管和乳糖发酵培养基试管各3支(内装有倒置的德汉氏小管)。 3仪器或其他用具试管架，接种环等。 四、操作步骤 1．用记号笔在各试管外壁上分别标明发酵培养基名称和所接种的细菌菌名。 2取葡萄糖发酵培养基试管3支，分别接入大肠杆菌，普通变形杆菌，第三支不接种，作为对照。另取乳糖发酵培养基试管3支，同样分别接人大肠杆菌，普通变形杆菌，第三支不接种，作为对照。 在接种后，轻缓摇动试管，使其均匀，防止倒置的小管进入气泡。 3将接种过和作为对照的6支试管均置37℃培养24～48h。 4．观察各试管颜色变化及德汉氏小管中有无气泡。篇二：发酵实习实验报告第一部分、实验部分 实验一、酸乳的制作 一、实验目的 1、掌握酸乳的制作方法、基本原理； 2、了解发酵剂制备过程中的操作要点； 3、对最终产品进行感官评定及理化检测，并进行品质比较。 二、基本原理 酸乳也成为酸牛奶，是人们喜欢的饮用发酵乳。所谓发酵乳、鲜乳或乳制品等主要原料添加乳酸菌，发酵以后形成的具有特殊风味的乳制品。乳经过发酵制成发酵乳以后营养价值提高，发酵乳中的蛋白质、钙盐容易消化吸收，具有消化、抑制肠道内异常的发酵和杀死肠
啤酒发酵实验
实验室啤酒发酵 一、实验目的：熟悉静止培养操作，观察啤酒发酵过程，掌握发酵过程中一些指标的分析 操作技能。 二、实验原理：啤酒酵母将麦芽汁发酵，产生酒精等发酵产物（啤酒）。 三、实验器材： ⑴. 100升发酵罐。 ⑵. 0~10O BX糖度表。 (3).10℃-30℃可调生化培养箱。 培养基： ⑴.麦芽汁发酵培养基10Plato, 50升，糖化制取。 ⑵.麦芽汁琼脂培养基：麦芽汁加2％琼脂，自然pH。 ⑶.麦芽汁液体培养基：酵母扩大培养用。 菌种：啤酒生产用酵母菌株。 四、实验步骤： （1）麦汁制备 （2）酵母菌种分离纯化与质量鉴定 （3）菌种扩大培养 （4）啤酒主发酵：麦汁50升，10O BX ，11℃→接种量1.5×107个细胞/mL →主发酵，11℃，5~7天→至4.0O BX时结束（嫩啤酒）。在主发酵过程中，每天测定下列项目：糖度、细胞浓度、出芽率、染色率、酸度、α-氨基氮、还原糖、酒精度、pH、双乙酰。然后以时间为横坐标，这些指标为纵坐标，叠画于方格纸上。 （5）后发酵 五、作业要求 （1）. 画出发酵周期中上述上述指标的曲线图，并解释它们的变化。 （2）. 记下操作体会与注意点。 实验一协定法糖化试验 一、实验目的：协定法糖化试验是欧洲啤酒酿造协会（EBC）推荐的评价麦芽质量的标准方法，我们用该法进行小量麦芽汁制备，并借此评价所用麦芽的质量。 二、实验原理：利用麦芽所含的各种酶类将麦芽中的淀粉分解为可发酵性糖类，蛋白质分解为氨基酸（具体参见理论部分第二节）。 三、实验器材和试剂： 1 实验室糖化器：由水浴和500~600 mL的烧杯组成糖化仪器，杯内用玻棒搅拌或用100℃温度计作搅拌器（此时搅拌应十分小心，以免敲碎水银头）。实验时杯内液面应始终低于水浴液面。最好采用专用糖化器：该仪器有一水浴，水浴本身有电热器加热和机械搅拌装置。水浴上有4~8个孔，每个孔内可放一糖化杯，糖化杯由紫铜或不锈钢制成，每一杯内都带有
年产5万吨木薯酒精工艺设计主要参数
年产5万吨木薯酒精工艺设计主要参数 一、物料、热能衡算 1 鲜木薯1085吨／日（淀粉含量按29%） 2 干木薯450吨/日（淀粉含量按68%） 3 硫酸2000公斤/日（浓度为98%） 4 淀粉酶250公斤/日（酶活力为2万单位） 5 糖化酶500公斤/日（酶活力为10万单位） 6 烧碱250公斤/日（固体） 7 水20000M3/日回收利用按50%计算10000M3/日 8 蒸汽670吨/日 9电33200千瓦/日 二、主要设备 1 干式粉碎机25～30吨/小时110千瓦电动机(二台) 2 风机90千瓦电动机(一台) 3螺旋输送机Ф1.2米一个 4旋风分离器Ф1.4米一个 5洗涤塔 4.5M3 Ф1500×2500 一个 6预煮锅35M3/个二个Ф3000×5000 7搅拌器3档Ф1米轴功率11千瓦2套 8料泵流量100M3/小时不锈钢(2台) （型号100IND-30 ）
9 蒸煮锅40M3/个4个Ф1300×10000 10 液化喷射器(智能型) 1台45M3/小时 11汽液分离器30M3/个1个Ф2000×10000 12 真空罐1个Ф3500×4500 13 膜冷 1个Ф1400×4500 14 水力喷射器 1台 3000升/小时 13糖化锅40M3/个Ф3200×48002个 14搅拌器3档Ф1米轴功11千瓦 15料泵流量100M3/小时2台（型号：100IND-30 ）16螺旋板冷却器150㎡ 1台 17酒母罐 50M3/个 1个 18 蛇管冷却 30㎡/组 19 发酵罐 500M3/个 14个 20螺旋板冷却器 100㎡/个 2台 80㎡/个 4台 60㎡/个 2台 21发酵料泵流量 50M3/小时 24台（型号：80IND-30） 22 成熟醪泵流量 100M3/小时 2台（型号：100IND-40） 23 硫酸贮罐 20M3/个 2个 24硫酸计量罐 2M3/个 1个 25 耐酸泵功率 2～3千瓦 2台（型号：25FB-25 ） 26粗馏塔Ф2.8米 24～26层塔板板距 450～500㎜
发酵实验报告结果
（一）实验结果 1．详细描述枯草芽孢杆菌固态培养物（外观、气味、培养物状态等） 答：枯草芽孢杆菌淡黄色，中间色深，表面较平整，无光泽，边缘不整齐，形成的菌落为圆形。培养基中的枯草芽孢杆菌有腥臭味，长势良好，观察培养基，无明显染菌现象。 2．记录个人活菌测定中各平行数据，计算最终平均值。 答：平行试验中，其他几个由于菌落连成一片，无法计数。只有如图一个平板中大约有100 个透明圈，因为是稀释了5亿倍，所以600亿\克。 （二）思考题： 在枯草芽孢杆菌固态培养过程中，为了防止霉菌与酵母的污染，可采用什么方法？ 答：可以加入抗真菌制剂。 （三）注意事项 1. 实验所用稻壳应尽量剪碎，使固体发酵培养基混合均匀 2. 无菌水高压灭菌时，应向三角瓶中加入玻璃珠防止暴沸。 3. 使用涂布器时，注意使用用酒精灯灭菌，待涂布器冷却后再进行涂布，以免杀死菌体。
（一）实验结果 1、详细记录实验过程中各参数及数据。 结果记录如表： 糖化后，加入可乐瓶中的上清：400ml, 活化的酵母种液：10ml ，置于28℃的培养箱中静置培养36h左右。 2、对实验结果的判断与分析。 实验结果检验：○1二氧化碳生成的检验培养约48h后，观察瓶中混合液，淀粉大部分沉降在瓶底，上清浓度较稀，靠瓶壁边缘有一连串微小气泡 ○2酒精生成的检验打开瓶塞，闻到有浓重酒精气味。取发酵液5ml, 加10%硫酸2ml,加1%K2Cr2O7溶液10-20滴，颜色由黄色变为黄绿色，稍加热后现象产生更快，更明显。 图示：酒精生成的检验结果左侧：蒸馏水5ml,颜色偏黄，透明度高右侧：发酵液5ml,黄绿色，与对照管有明显差异 1、思考题：现有3株不同来源的酒精酵母，请设计实验判断哪株酵母发酵酒精能力最强？
酵母菌酒精发酵实验报告
酵母菌酒精发酵实验报告 实验方案 酵母菌酒精发酵地条件研究 学院（部）：生物与化学工程学院 专业：生物工程 学生姓名：鑫 学 班 指导 1 2 ｇ玉米粉 糖化：糖化时地工艺条件为：糖化温度为５８℃，ｐＨ值为４．５，糖化时间为３．５ｈ，糖化酶地添加量为０．３ｇ／１００ｇ玉米粉. 活化培养基 本实验在进行实验时采用察氏(czapck)培养基地配制，配方如下表一：
表一 扩大培养基 扩大培养仍然用察氏(czapck)培养基，由于要用液体地，所以将其中地琼脂配料去掉. 1 2 3 （1 （2 按照 中90℃液化3.5h.边液化边搅拌. （3）玉米粉地糖化 将液化后地玉米液中按照0.3g/100ml加入液化液中.再在水浴锅中，58℃糖化3.5h. （4）过滤 糖化后地糖化液有可能有没有彻底液化地玉米颗粒，会造成浑浊，这时需要对糖化液进行过 滤操作.
操作步骤： 最后与以上培养基一起进行灭菌处理.灭菌时，清洗16支移液管，与培养基一起灭菌. （5）活化步骤 器材：酒精灯，接种针，母菌，斜面培养基，消毒酒精. 步骤：1、将器材放于实验台上.对双手合桌面进行灭菌.对接种针进行灼烧灭菌.2、在酒精灯旁按照无菌操作步骤在酒精灯火焰旁取下试管棉塞.3、将灼烧后地接种针伸入母菌试管取粘 培养. ， 不同菌量下地发酵 器材：扩大菌种，移液管四个，酒精灯，发酵液，洗耳球. 步骤：1、将实验器材放于实验台上.2、用移液管移取8%地扩大菌种到发酵液中.3、塞好棉塞，将发酵液存放于30℃条件下发酵2d.4、按照以上步骤，分别移取10%、12%、14%地扩大菌种到发酵液中，30℃培养2d，之后进行酒精检测. 不同醪液浓度下地发酵
酒精发酵
酒精发酵 一、实验目的 1．了解淀粉水解酶、糖化酶和活性干酵母活化的方法； 2．掌握双酶法糖化淀粉的方法； 3．掌握酵母发酵糖化液制取酒精的方法； 4．了解糖浓度和酒精含量的测定方法。 5．通过实验让学生理解糖的无氧酵解途； 二、实验原理 1．在无氧的培养条件下，酵母菌(或细菌)利用葡萄糖发酵生成酒精和二氧化碳，此过程即为酒精发酵，反应式为： C6H12O6 2C2H5OH ＋2CO2 通过对发酵醪液酒精含量的测定，可以判断酒精发酵的程度。 酵母菌在有氧和无氧条件下的糖代谢的产物不同（好氧条件下生成水和二氧化碳），无氧条件下产生酒精和CO2，所以在酒精发酵时要杜绝氧气，否则酒精产率下降。 三、实验材料及仪器 1．实验材料：大米粉、玉米粉或甘薯粉等淀粉质原料，自来水，耐高温活性干酵母，耐高温α-淀粉酶，糖化酶，蔗糖，氯化钙，硫酸铜，亚甲基蓝，酒石酸钾钠，沸石。 2．实验仪器：铝锅，恒温培养箱，高压灭菌锅，酒精蒸馏装置，恒温水浴锅，蒸馏烧瓶，酒精计，糖度计，滴定管，温度计，pH计，三角瓶，容量瓶，石棉网等。 四、实验过程 1、实验步骤 （1）取自来水1000mL，按照1：4的料水比称取大米粉（250g），一起加入铝锅中，混匀，用盐酸将醪液pH调节到5.5-6.0，煮沸1h。注意不要煮糊，可适当补温水，不要骤然降温，避免“夹生饭”。 （2）糊化结束后，耐高温 淀粉酶，加入少量CaCl2 50-70mg/L，如果使用自来水也可以不加，冷却到85℃，按10U/g大米粉的比例加入活化好的淀粉酶酶液，90-93℃水浴保温。当DE值下降到20左右，结束糊化（一般糊化1个小时）。（3）用盐酸调节上述醪液至pH4.0-4.5，将醪液冷却到60℃，按150U/g大米粉的比例加入活化好的糖化酶酶液，60℃恒温箱或水浴保温6h以上（可放置过夜）。
发酵大实验实验报告
2010级发酵大实验（1） 实验报告 任课老师： 姓名： 专业：生物技术 班级： 学号： 日期：2013年6月
实验报告 一、目的要求： 了解筛菌的基本操作，包括：培养基配制，灭菌，接种，涂板，摇菌，紫外分光光度计的使用等。 二、实验材料 1、菌种来源：英语公园葡萄树下土壤和生物学院院楼门口土样。 2、培养基： （1）淀粉液体培养基：可溶性淀粉1%、蛋白胨1% 、葡萄糖0. 5%、NaCl 0. 5%、牛肉膏0. 5% （2）淀粉固体培养基: 可溶性淀粉1%、蛋白胨1% 、葡萄糖0. 5%、NaCl 0. 5%、牛肉膏0. 5%、琼脂粉1.5% 。 3、器皿：试管，量筒，烧杯，移液管，培养皿，洗耳球，玻璃棒，酒精灯，接菌环，三角瓶，玻璃棒等。 4、仪器：高压蒸汽灭菌锅，水浴锅，恒温培养箱，摇床，天平、紫外可见分光光度计等。 5、试剂：1%碘液、1M NaOH、DNS、pH 5.6 0.05M 乙酸/乙酸钠缓冲液、1%淀粉溶液、1mg/mL的麦芽糖，结晶紫溶液。 6、其他：封口膜、纱布，棉花，试管架等。 三、实验步骤： 1、初筛： （1）配制培养基：按照上述培养基成分及数量称取各物质，放入三角瓶中，加水到100ml，包扎。和包扎好的试管、移液管、涂布器、培养皿等一起放入灭菌锅中121℃高压灭菌20min。然后干燥后使用。 （2）倒平板：把培养基置于无菌工作台上，待冷却到55℃左右后，倒入灭菌后的平板中，每个平板中约15-20ml，之后待冷却凝固。 （3）菌悬液制备：我们组分别从英语公园的葡萄树下和生物学院院楼门口采集土样，各称取10g，放入装有90mL无菌水的三角瓶中，震荡20min后静置5min。（4）浓度稀释：在无菌试验台上进行浓度梯度稀释,把土样摇匀，从中吸取1ml 置于事先灭好菌的试管中，再加入9 ml无菌水，再从该试管中吸取1ml土样置