寿光鸡中禽网状内皮组织增生病毒的分离鉴定
鸡网状内皮增生病的诊断方法PPT
控制措施
隔离病鸡
治疗
一旦发现病鸡，立即隔离，以防止疾病在 鸡群中传播。
对病鸡进行治疗，如使用抗病毒药物和抗 生素。
加强环境控制
保持鸡舍温度、湿度适宜，通风良好。
减少应激
避免频繁转群、运输等应激因素。
防治效果评估
定期监测
定期对鸡群进行健康检查，统计发病率、死 亡率等数据。
比较数据
通过种蛋、胚胎垂直传播给 下一代。
水平传播
通过接触感染鸡的粪便、饮 水、饲料等水平传播给同群 鸡。
媒介传播
通过某些昆虫、鼠类等媒介 传播。
02
鸡网状内皮增生病的临床症状
早期症状
精神萎靡
鸡只失去活力，缩头闭眼，行动迟缓。
食欲减退
鸡只食欲下降，饲料消耗减少。
羽毛粗糙
鸡只羽毛蓬乱，失去光泽。
体重下降
随着病情发展，鸡只体重逐渐减轻。
病理学诊断
淋巴结病变
观察淋巴结的肿大程度和质地，是否有出血、坏死等病变。
肝脾病变
检查肝脏和脾脏是否有肿大、出血、坏死等病变，以及是否 有肿瘤形成。
实验室诊断
病原检测
通过PCR、病毒分离等方法检测鸡网状内皮增生病毒， 以确诊感染。
抗体检测
采集血清样本，检测抗体水平，了解鸡群感染情况。
组织病理学诊断
3
中药研究
中药在治疗鸡网状内皮增生病方面也取 得了一定的进展，一些中草药提取物具 有抗病毒和免疫调节作用，为该病的治 疗提供了新的选择。
研究展望
病毒变异研究
随着病毒的变异和进化，对鸡网 状内皮增生病的研究需要不断深 入，了解病毒变异规律和进化趋 势，为疫苗和药物的研发提供科 学依据。
肉鸡感染禽网状内皮组织增殖病的诊断及流行病学分析
温 下 固定 １ ０ｍｉ ｎ
淋 巴组 织 和 其 它组 织 的 慢 性肿 瘤 形 成 １１ Ｐ ．． ３ ＣＲ 所 用 试 剂 １ ｘ 冲 液 、 １ ． 将 固 定 液倾 去 ． ０缓 ．２ ４ 干燥 用 Ｐ Ｓ洗 Ｂ 为 特征 的一 群病 理 综 合 征 ．由于 病 毒 Ｍｇ １ （ ．ｍｍｏ／ 、 ｄ Ｐ、 ａ 酶 涤 １次 ．加 入 抗 ＲＥ 的单 抗 １ Ｂ１ ８ Ｖ １ １ Ｃ ２ ２５ ｌ ４ｘ ＮＴ Ｔ ｑ Ｌ） 引 起 的肿 瘤 以 网 状 组 织 增 生 为 特 征 ． （ Ｕ ￣Ｌ 均 购 自大 连 宝 生 物 工 程 公 （：０ １ ０ｕ，７Ｃ 应 ５ ｍｉ。 １／ ） １ ）０ ｌ３ ￣ 反 ８ ０ ｎ 因此 称 为禽 网状 内皮 组织增 殖 病 司。 １ ． 倾 去 单抗 ． Ｐ Ｓ洗 ３次 ． 次 ．３ ４ 用 Ｂ 每 １５ ９ ８年 英 国 的 Ｒ ｂｎｏ ｏ ｉｓｎ首 次 从 １ ． 抗 Ｒ Ｖ群 特 异 性 单 克 隆 抗 体 ３ ｍｉ ． 入 Ｐ Ｓ稀 释 的工作 浓 度 为 （ ．４ １ Ｅ ｎ加 Ｂ ｈ 只死 于 类似 淋 巴 细胞 增 生 和 浸 润 的 由 山东 农 业 大 学 崔 治 中 教 授 惠 赠 ６ ）的 羊 抗 鼠荧 光 二 抗 ５ １３ ｃ ４ Ｏｕ ．７ｃ反 神 经损 伤 的火 鸡 的 内脏 淋 巴瘤 中 分 离 １１５ Ｆ Ｔ 羊 抗 鼠荧 光 二 抗 美 国 应 ５ ｎ ．． ＩＣ一 ０ｍｉ。 ｉｎａ公 ．． Ｂ 到第 一株 Ｒ Ｖ病 毒— — Ｒ Ｖ Ｔ株 Ｅ Ｅ ＿ 此 Ｓｇ ｌ 司产 品 ．使 用 时 按 使 用 说 明 １４４ 倾 去 荧 光 二 抗 ．用 Ｐ Ｓ洗 ３ ： ６ 后， 在澳 大利 亚 、 匈牙 利 、 非 、 国 、 南 英 德 书 稀 释 至 １ ４的 工 作 浓 度 次 ． 次 ３ｒ ｎ 弃 Ｐ Ｓ 在 滤 纸 上 千 每 ｉ， ａ Ｂ． 国 和 日本 等 国相 继 分离 到 不 同 的 Ｒ １２ ＥＬＳ 诊 断 试 剂 盒 由 中 国 动 燥 后 ． 于 荧 光 显 微 镜 下 观 察 。 ＥＶ ． ＩＡ 置 毒株 ［ Ｉ 国于 １ ８ ］ 。我 ９ ６年 首 次报 道 ． 何宏 物 卫 生 与 流 行 病 学 中 心 动 物 外 来 病 １５ Ｐ Ｒ 方 ． Ｃ 虎 等 （９ ８ 利 用 鸡 胚 成 纤 维 细 胞 研 究 中 心研 制 ． 使 用说 明 书 使用 。 １８ ） 按 １５１ 组 织 ＤＮ 的提 取 取 病 鸡 的 ．． Ａ （ Ｅ ）从 自然病 例 中分 离 出我 国第 一 １ ＣＦ ． 病 理 组 织 学 检 查 取 １ ％中性 肝 脏 １ ．剪 碎 后 用 ２倍 体 积 的 ０ １ ３ ｏ 克 ． ０ ｌｌ ／ Ｂ 用研 磨 器 研磨 后分 株 禽 网 状 内 皮 组 织 增 殖 病 病 毒—— 福尔 马 林 固定 的肝 脏 、 脏 、 脾 肾脏 和腺 ｎｏ Ｌ的 Ｐ Ｓ悬 浮 ． ＲＥ — ４ Ｖ Ｃ ５毒 株 ． 实 了该 病 在我 国确 胃， 证 常规法 制 备石 蜡 切 片 （ 度 为 ５ １ ． 装 ．加 ６ｕ／ 厚 ｕ） Ｉ Ｌ的蛋 白酶 Ｋ．６Ｃ 用 １ ５￣作 ０ ＨＥ 染 ． 光 ｈ 然后 ＤＮ ． Ａ提取 试 剂盒直 接提 取 实存 在 ［ 以后 调 查发 现 山东 、 苏 、 ９ ｊ ， 江 北 用苏 木 精一 伊 红染 色法 （ ． ） 色 ． 京 、 龙 江等 地 也 有 Ｒ Ｖ存 在 ７］ 黑 Ｅ －。到 镜下 观察并 拍 照 ． ３ １５２ Ｐ Ｒ 反 应 ： 据 已 发 表 的 ＲＥ ．． Ｃ 根 Ｖ 目前 为 止 ．研究 发 现 在 许 多 国家 的商 １ ． 间 接 免 疫 荧 光 方 法 将 疑 似 病 Ｌ Ｒ 序 列 【 设 计 如 下 引 物 上 游 ４ Ｔ ． 品鸡 群 和火 鸡 群 都 存 在 Ｒ Ｖ抗 体 （ Ｅ 或 鸡 剖 杀 ， 肝 脏 、 脏 、 取 脾 肾脏 和 腺 胃用 ５ Ｔ Ｔ ＡＧＣ ＡＡ Ｇ ＴＹ 游 ℃Ａ ＡＣ ＧＧ Ｃ Ｔ Ｇ ３ ．Ｆ 病 毒 ） 只 是 检 出 率 不 一 致 而 已 ， 就 灭 菌 Ｐ Ｓ（ ：） 磨 ． 后 以 １ ０ ５Ａ Ｇ Ｔ Ｔ Ｃ ， 也 Ｂ １ 研 ５ 然 ００ ０ｒ ＡＴ Ｔ Ｇ ＡＧ ＧＡＡ Ｔ Ｔ 操 作 ／ Ｇ ＡＣ ３ ｎ离心 １ ｎ 上 清 液 过 滤 后 ． 种 按 照 常 规 进 行 ． 以 提 取 的 组 织 ＤＮ ５ｍｉ ． 接 Ａ 是说．Ｅ Ｒ Ｖ呈世 界性 分 布 本病 的危 害 ｍｉ 不 仅在 于因感 染 所 致 的 生 长 发育 障 碍 ２瓶 长 成 ７ ％左 右 的 单 层 的 Ｃ Ｆ 培 为 模 板 ， 应 条 件 为 ：４ ５ｍｉ（ｃ— ０ Ｅ ． 反 ９ ℃ ｎ １ｙ 或 发病 死 亡 ．更 重 要 的 是 免疫 抑 制 引 养 ７ｄ后 ． 至 ９ 转 ６孔 板 ． 养 ５ｄ后 ｃｅ－￣４Ｃ１ｍｉ．５Ｃ １ｍｉ．２Ｃ１ｍｉ 培 ｌ）－ ￣ －９ ｎ５ ｏ ｎ７ ｏ ｎ 起 的继 发 感染 用 荧 光 抗 体 进 行 检 测 方 法 如 下 ： ｆ０ ｙ ｌｓ ７ ℃ １ ｎ １ｙ ｌ） 反 应 ３ ｃ ｃｅ１ ２ ０ｍｉ（ｃ ｃｅ。 近 几 年 来 ． 禽 网 状 内皮 组 织 增 由 表 １ １ １４ 血 清 的 阳性 率 ～ ０号 殖 病 等 免 疫 抑 制 性 疾 病 所 造 成 的 损 编 号 鸡舍编号 品 种 日龄 阳性 率 失 越 来 越 突 出 ． 种 鸡 、 仔 鸡 因 感 肉 肉 １ ５ ～１ 社 会 鸡 Ａ Ａ肉仔 鸡 ２ ３ ｆ１ ｆ ） ） ５（） ／ ％ 染 ＲＥ Ｖ致 使 免 疫 失 败 ．常 常 暴 发 新 １ ６～４ ４ 种鸡二场 １ 舍 ＡＡ肉仔 鸡 ３ ９ ｛／９（ ４８％ ） ３２ ４ ．３ ４ ～５ ５ ４ 种鸡二场６ 舍 Ａ Ａ肉仔 鸡 ３ ９ ０１ ｆ ） ／０（） ％ 城 疫 和 大 肠 杆 菌 病 我 们 分 别 用 ５ ～ 种鸡二场８ 舍 Ａ Ａ肉种 鸡 ３４ ７ １／４（ ５７％ ） ２ １ ８ ．１ ＩＥ Ｄ ＸＸ公 司生 产 的 Ｅ ＩＡ 试 剂 盒 和 ＬＳ ６ ～８ ９ ０ 种鸡三场２ 舍 Ａ Ａ肉种 鸡 ２５ １ １ ／２（ １ ７ ） １１ ９． ％ ６ 自 己研 制 的 Ｅ ＩＡ染禽 网状 内皮组织增 殖病 的诊 断及 流行 病 学分 析
禽网状内皮组织增生病病毒的分离鉴定及其体外复制研究
网状 内皮组 织增生病病毒 ，经间接 免疫荧光 、Ｐ － 电镜 鉴定，将该株 病毒命名 ＣＲ ￣ ｇ ，
ＨＬ Ｒ０ ０ 。克隆ＨＬＲ ９ １ Ｊ ９１ Ｊ ０ ０
主 要保 护 性抗原 的 基 Ｎｇ ０ ｐ９ ，并进 行 了序列 分析 。ＨＬ Ｒ０ ０ 与我 国早 期 分 离的 南方毒株ＨＡ９ ０ 亲缘 关 系 Ｊ ９１ ９１
较远 ，而 与 美 国和 台 湾的 某些毒株 同源性 较 高。ＨＬ Ｒ０ ０ 的Ｔ Ｉ １ ／ Ｊ ９ １ Ｃ Ｄ 。 ０ ｍＬ。通过 绘制 复制 动 力学 曲线 为
中国动物传染病学 报
２ １，８ １：３ ２ ０ ０１ （） — ７ ２
Ｃ ｉ ｓ Ｊｕｎｌ ｆ ｎ ｌ ｎｅｔ ｕ ｉ ａｅ ｈｎ ｅ ｏ ｒａ ｏ ｉ ｆ ｉ ｓＤ ｓ ｓｓ ｅ Ａ ｍａ Ｉ ｃ ｏ ｅ
研 究论 文
ห้องสมุดไป่ตู้
禽 网状 内皮组织增生病病毒 的分离鉴定 及其体 外复制研 究
ＧＡ Ｏ Ｌｉ ．Ｗ ＡＮ Ｇ ａ — ｅ Ｘｉ ｏ ｍ ｉ
（． ａｉｎ ｌ ｅ ａ ｏａｏｙｏ ｔ ｉａ ｉｔｃｎ ｌｇ， ａ ｂｎＶｔ ｉａ ｅｅ ｒｈ ｎｔｕｅ Ｃ Ａ ， １Ｎ ｔ ａ ｙ ｂ ｒｔｒ Ｖ ｅ ｎ ｒ Ｂ ｏｅｈ ｏｏｙ Ｈ ｒｉ ｅ ｒ ｒ Ｒ ｓａｃ ｓｉ ｔ． Ａ Ｓ ｏ Ｋ Ｌ ｆｅｒ ｙ ｅ ｎｙ Ｉ ｔ Ｈ ｒ ｉ １ ０ ０ ， ｈｎ ， ． ｏｌ ｅ ｆＶｔ ｉａ Ｍｅ ｉｉ ， ｏｔｅ ｓＡ ｒ ｕｔ ａ ｎｖｒｉ， ｒｉ １ ０ ３ ， ｈｎ ， ａｂｎ ５ ０ １ Ｃ ｉ ＂ Ｃ ｌ ｇ ｅ ｒ ｒ ａ２ ｅ ｏ ｅ ｎｙ ｄｃ ｅＮ ｒ ａｔ ｇ ｉ ｌ ｒ ｌ ｉ ｓｙＨａｂｎ ５ ０ ０Ｃ ｉａ ｎ ｈ ｃ ｕ Ｕ ｅ ｔ
禽痘病毒活疫苗中网状内皮组织增生病病毒的分离鉴定及其序列比较
ｉｏａｅ ｅｉｕｏ ｎ ｏｈ ｌ ｓｓ ｉ ｓ ＲＥＶ） Ｆｖ ａ ｓ ａｅ， ｌｓ ａ ｌｓ ｒ ｏｌｃｅ ｎ ｏ ｕａｅ ｔ ｈｃ ｅ ｓ ｌｔ ｔｃ ｌｅ ｄ ｔｅｉ ｉ ｖｒ （ ｒ ｏ ｕ ． ｉ ｅｄ ｙ ｔｒｐ ａｍａｓｍｐｅ ｅｃ ｌ ｔｄａ ｄｉ ｃ ｌｔｄｉ ｏｃ ｉｋ ｎ ｌ ｗｅ ｅ ｎ ｎ
同源性 较低 仅 为９ ．％。 本研 究证 实 了在我 国生 产 的 某些Ｆ Ｖ疫 苗 中存 在ＲＥ ７３ Ｐ Ｖ污 染 ，所 污 染 的ＲＥ Ｖ的ｅ ｖ ｎ
基 因更接近 最近 的流行 野毒 ，这 是 国 内 第一 次报道 从 禽痘 弱毒 疫 苗 中分 离到Ｒ Ｖ活毒 。 Ｅ 关键 词 ：禽 痘病毒 活疫 苗； 网状 内皮组 织增 片病 病毒 ；鉴定 ；序 列 分析
中 图 分 类 号 ：￥ ５ ．２ ．９ ： ８ ８３ ６５ ３Ｑ７ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ： １７ ．４ ２ （ ０ ０ １０ ３ ．５ ６ ４６ ２ ２ １ ）０ ．０ ５０
Ｉ ｏＬＡＴＩ Ｓ ｏＮ ｏＦ ＲＥＴＩ ＣＵＬｏＥＮＤ ｏＴＨＥＬＩ Ｓ Ｓ ＶＩ Ｏ Ｉ Ｉ ＲＵＳ ＦＲｏＭ ＦｏＷ Ｌ Ａ ＰｏＸ
抗做 间接 免疫 荧光试验 ，确 ｉ Ｅ ＆Ｒ Ｖ感染 ，命名 为Ｊ ０ ０ 。提取 感 染细 胞 的ＤＮ Ｓ ８９ Ａ，采用Ｐ Ｒ扩￣ ｅ ｖ Ｃ ｇｎ． 基因。
测 序 分 析 表 明 ， 该 毒 株 的ｅ ｖ 因 开放 阅 读 框 同 大 部 分－Ｅ ｎ基 Ｒ Ｖ毒 株 一 致 ， 为 １ ６ ｐ Ｊ ０ ０ 的 囊 膜 蛋 白 基 因 ｌ 。 Ｓ ８９ ７ ｂ
Ｌ ＶＥ Ｖ ＣＩ ＮＤ Ｅ Ｉ ＡＣ ＮＥ Ａ ＮＶ ＧＥ Ｅ ，Ｅ ＣＥ ＡＮ ＹＳＳ ＮＥ Ｓ ＱＵ Ｎ ＡＬ Ｉ
禽网状内皮组织增殖症病原检测及其抗体检测分析
禽网状内皮组织增殖症病原检测及其抗体检测分析胡杰;蒋维维;李毅【期刊名称】《上海畜牧兽医通讯》【年(卷),期】2017(000)005【摘要】运用PCR方法对8种日龄(0、21、35、75、126、168、245、315 d)的400份棉拭子、水样和环境样本以及12个批次的疫苗样本进行禽网状内皮组织增殖症病毒(REV)病原检测;用间接ELISA方法对2208份8个日龄的鸡血清样品进行REV抗体检测.结果发现,400份棉拭子、水样和环境样本R EV病原检测全部为阴性,16个批次的疫苗有2个批次疫苗检测R EV病原阳性.抗体分布特点是刚出壳时R EV抗体滴度主要集中在3000~10000,占81.88%,抗体阳性率为90.58%;21~35 d抗体下降明显,抗体阳性率仅为0~1.09%;70 d抗体为0的鸡群占50.72%,1077~1500滴度之间的血清占30.43%;126~315 d抗体滴度主要集中在12000以上,占53.26%~65.94%.【总页数】3页(P21-23)【作者】胡杰;蒋维维;李毅【作者单位】广西动物疫病预防控制中心南宁530001;广西鸿光农牧有限公司容县537500;广西鸿光农牧有限公司容县537500【正文语种】中文【相关文献】1.禽网状内皮组织增殖症研究进展 [J], 李井春2.应用改良阻断ELISA检测禽网状内皮组织增殖病血清抗体 [J], 杨汉春;高云3.禽血清网状内皮组织增殖病毒抗体的检测 [J], Sasa.,T;金光明4.基于p30-gp90融合蛋白的禽网状内皮组织增生症病毒抗体间接ELISA方法的建立 [J], 栾晓宁;郭龙宗;马广斌;李玉燕;王一新;巩新民5.郑州地区鸡场禽白血病和禽网状内皮组织增殖症感染情况检测与分析 [J], 陈海燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
3种方法检测禽网状内皮组织增殖病毒人工感染鸡胚孵化雏鸡的带毒比较
3种方法检测禽网状内皮组织增殖病毒人工感染鸡胚孵化雏鸡的带毒比较徐凤霞;孙万里;张亚文;常爽;王一新;赵鹏【期刊名称】《中国动物检疫》【年(卷),期】2024(41)2【摘要】为比较血液和粪便等样品采用不同方法检测禽网状内皮组织增殖病毒(REV)的准确率,从而为制定禽网状内皮组织增殖病(RE)净化程序提供参考,利用鸡胚卵黄囊接种构建REV垂直传播感染雏鸡模型,分别采用DF-1细胞病毒分离、RT-PCR检测和荧光定量RT-PCR检测,对1日龄雏鸡血液和胎粪样品,7~70日龄鸡(每隔1周)的血液和泄殖腔棉拭子样品,进行REV检测和结果比较。
结果显示:对1日龄出壳的SPF鸡血浆进行检测,荧光定量RT-PCR灵敏度最高,阳性检出率为100%(25/25),其次为病毒分离,阳性检出率为96%(24/25),RT-PCR检出率最低;对1日龄出壳的SPF鸡胎粪进行检测,荧光定量RT-PCR与病毒分离灵敏度一致,阳性检出率均为80%(20/25),RT-PCR检出率最低,为28%(7/25)。
对7~70日龄鸡(每隔1周)进行血液和泄殖腔棉拭子检测,3种方法阳性检出率与1日龄检测情况总体相似,检出率从高到低依次为荧光定量RT-PCR、病毒分离和RT-PCR。
结果表明,在同一检测时间点使用同一检测方法,胎粪/泄殖腔棉拭子REV阳性检出率基本低于血液检出率。
本研究初步比较了不同方法检测REV人工感染鸡胚孵化雏鸡的带毒情况,为实施REV净化奠定了基础。
【总页数】6页(P80-85)【作者】徐凤霞;孙万里;张亚文;常爽;王一新;赵鹏【作者单位】山东农业大学动物科技学院【正文语种】中文【中图分类】S851.3【相关文献】1.禽网状内皮组织增生病病毒感染SPF雏鸡血液淋巴细胞增殖功能及其细胞周期相关因子变化2.鸡胚中人工感染网状内皮增殖病病毒的检测3.禽网状内皮组织增殖病病毒感染鸡的外周血白细胞动态变化4.SPF雏鸡人工感染禽网状内皮组织增殖病病毒后肝组织的超微结构观察5.禽网状内皮组织增生症病毒感染鸡胚成纤维细胞的转录组学分析因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
应用PCR法检测禽源生物制品中禽网状内皮组织增生症病毒
应 用 Ｐ Ｒ法检 测禽源生物制 品 中 Ｃ 禽 网状 内皮组 织增生症病毒
庄 金秋 ， 梅建 国 ， 毕研 丽。王金 良１ ， ， 立 中１， 志强 ２苗 ，沈 ２ ，
（． １山东省滨州畜牧兽 医 究院， 研 山东滨州 ２ ６０ ；． ５ ６０２山东绿都生物科技有限公 司， 山东滨州 ２ ６ ０ ） ５６ ０
Ｓ ｇ ） 物制 品都 不 允许 存 在 与产 品无 关 的外 源 病 毒 。 果病 （ ｉｍａ 。 如
毒性 生物 制 品携 带外 源病 毒 ， 不仅 不 能有效 预 防疾病 ， １ １ ３ 引物 的设 计 与合 成 ． ．
根 据Ｇｅ Ｂ ｎ 中登 录 的 ｎ ａｋ
甚 至还 可 能 成 为传 播 动 物疫 病 的媒介 ， 给养 殖 业 带来 Ｒ Ｖ参 考 毒 株 Ｌ Ｒ基 因序 列 ， 用 Ｐ ｉ ｒＰ ｅ ｅ ５０ Ｅ Ｔ 利 ｒ ｒｍｉｒ ． ｍｅ
并且 愈发严重 Ｊ 。 １ １２ 细 胞 、 ．． 病毒 、 品等 样 ９ ｌ 日龄 Ｓ Ｆ 胚（ 南 ～０ Ｐ鸡 济 在 生物 制 品生 产企业 的实 际生产 中， 疫苗 中Ｒ Ｖ的 斯 帕 法 斯 ）原 代 Ｓ Ｆ 胚 成 纤维 细 胞 （ Ｅ ） Ｅ ， Ｐ鸡 Ｃ Ｆ 自制 ， 鸡 污染 和传 播也 是 引起 Ｒ Ｖ感染 和流 行 的重要 原 因『 。 新 城 疫活 疫 苗样 品Ａ０ １ （ ＧＯＬ 供 ） Ｒ Ｖ及 鸡 Ｅ ８ ０ 等 ＶＩ Ｙ提 ，Ｅ 因此 ， 了保 证病 毒性 生物 制 品安全 有 效 ， 何 一种 生 抗 Ｒ Ｖ特 异 性 血 清 （ 为 任 Ｅ 中监 所 ）ＦＴ 标 记 的兔 抗 鸡 ＩＧ 、Ｉ Ｃ ｇ
对 １Ｐ ， １ 严 重 的经济 损失 。 国外 曾经报 道 ， 因马 立克 氏病 疫苗 中 软 件 设 计 合 成 了 １ 特 异 性 引物 Ｐ 、 ２ 扩 增 长 度 ３ ４
鸡感染网状内皮组织增生病的诊断
１ 发 病 情 况
贵州 省某 肉鸡 饲 养 场 的 ３ ０ ０ ０羽 肉鸡 ， 于 ２ ０ １ ３ 年 ９月发 现部分 雏 鸡精 神委 顿 ， 缩颈， 翅 下垂 。发病 初期 机体 进 行 性 消 瘦 ， 排黄绿色稀便 ， 有 神 经 症 状 的病 鸡 出现瘫 痪 、 伸颈 、 头 下垂 ， ３ ～６ ｄ后 开始 出现 死亡 ， 经治 疗效 果不 明显 ， 仍 有鸡 不断 死亡 。
Hale Waihona Puke ６ 分 析 与 讨 论 ６ ． １ 根 据上 述病 死 鸡 的发 病情 况 、 临床 症 状 及 分 子 生物学 鉴定 ， 判定 该 鸡 场 的雏 鸡 患鸡 网状 内皮 组 织增 生病 。 ６ ． ２ 临 床上 ， Ｒ Ｅ Ｖ 引起 的病 变主 要 为 急性 网 状 细 胞瘤、 矮 小综 合 征 和 慢 性 肿 瘤 ， 但 由于 其 他 病 毒 引 起 的免 疫 抑 制 ， 如 马 立 克 氏病 和 禽 白 血 病 往 往 和 Ｒ Ｅ Ｖ 的感染有 相 似 的症 状 ， 再 加上 并发 和继 发 的原 因， 因此 对该 病 的确诊 需要通 过实 验室 方法完 成 。 ６ ． ３ ＲＥ Ｖ 的危害 不仅仅 在 于其 自身 ， 还 间接 地影 响到疫 病 的 综 合 防 控 。预 防 Ｒ Ｅ Ｖ感 染， 应 严 格 杜 绝 弱毒 疫苗 污染 ＲＥ Ｖ， 制 备 活疫苗 的鸡 胚必 须 严格 保 证是 Ｓ Ｐ Ｆ鸡 胚 ； 净化种 鸡 群 ， 对 种 鸡群 进 行 检测 ， 剔 除 阳性鸡 ， 从 源 头 上 阻 断 该 病 毒 的传 播 ； 有 效 确 诊 ＲＥ Ｖ， 加强 其流 行 病 学 调 查 ， 为 综 合 防控 提供 必 要 的参 考 。
病鸡 可 从 口、 眼 分 泌 物 及 粪 便 中排 出病 毒 ， 通 过水 平传 播使 易感 鸡 群 感 染 ， 本 病 亦 可通 过 种 蛋 垂 直传 播 ， 但 传 播能力 较 弱 。本 病 以 ３ ０ ～９ ０ 日龄 的雏 鸡 多发 ， 成 年 鸡零 星 发病 。发病 季节 在 ６ ～ ９月 份 ， 同一 鸡群 感染 ， 发病 率 、 死亡 率可 达 ６ ５ 以上 。
禽活疫苗中网状内皮组织增生症病毒污染的检测方法比较
禽活疫苗中网状内皮组织增生症病毒污染的检测方法比较作者：***来源：《家禽科学》2021年第03期摘要：本研究随机抽取4种市售活疫苗，利用RT-PCR法、IFA检测法和SPF鸡检查法，检测活疫苗中的禽网状内皮组织增生症病毒的污染，比较三种检测方法的优劣以找到更好检测的方法。
試验结果表明，RT-PCR法虽然方便、快捷，但RT-PCR法检测会产生假阳性，影响结果的判定;SPF鸡检查法操作简单结果可靠，但该方法试验周期较长，成本高;IFA检测法与传统鸡检查法相比具有快速、准确、成本低的优点，利于推广应用。
关键词：IFA检测法;RT-PCR;SPF鸡检查法;禽网状内皮组织增生症病毒;家禽活疫苗禽网状内皮组织增生症（Reticuloendotheliosis，RE）是指由反转录病毒科网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus，REV）引起的禽类以急性网状细胞肿瘤、生长抑制综合征、淋巴组织及其他组织慢性肿瘤形成为特征的一群病理综合征[1-2]。
由于REV可以通过种蛋垂直传播，如果使用污染有REV的鸡胚生产的疫苗会造成疫苗中污染REV，这是REV独特的传播途径之一[3]。
REV是活疫苗污染中常见的一种外源病毒，当被污染的疫苗免疫鸡群后可引起雏鸡免疫抑制和矮小综合征，从而给家禽养殖业造成巨大经济损失。
国内外均有因REV污染疫苗引起严重损失的案例和报道[4-6]。
对禽源活疫苗进行REV污染检测，确保疫苗使用的有效性和安全性，是防止REV传播的重要手段。
目前对疫苗中REV污染的检测，我国应用方法主要包括细胞培养法和接种SPF鸡检查法，其中接种SPF鸡检查法被认为是经典的“金标准”，检测结果相对可靠容易判定，但缺点是检测周期长。
通常情况下，家禽活疫苗中REV等外源病毒的污染需要用非常灵敏、特异性强、检测周期短的方法来进行检测。
RT-PCR法、IFA检测法和SPF鸡检查法，目的就是为了找到更为合理的检测家禽活疫苗中禽网状内皮组织增生症病毒的检测方法。
禽网状内皮组织增生病诊断与防制研究进展
１０ ０ ； ５０ １
要 ： 网状 内皮 组织增 生症 （ ｔ ｕｏ ｎ ｏｈ ｌ ｓ ， Ｅ） 禽 类一种 重要 的致瘤性 和免 疫抑 制性 禽 Ｒｅ ｃ ｌｅ ｄ ｔｅｏｉ Ｒ 是 ｉ ｉ ｓ
疾病 。 近年 来 ， 群 中 Ｒ Ｖ 流行 比较 严 重 ； Ｅ 鸡 Ｅ １ Ｖ与 马立 克氏病病 毒 （ ｒｋ’ ｄ ｅｓ ｖ ｕ， Ｌ Ｍａ Ｓ ｉａ ｉ ｓＭＤＶ） ｅ ｓ ｅ ｒ 、 鸡 贫血病 病毒 （ ｈｃｅ ｎｅｔ ｕ ｎｍｉ， Ａ 和 Ｊ Ｃ ｉ ｎ ｉｆ ｉ ｓａｅ ａＣ Ｖ） 亚群禽 白血病 病毒 （ｕｇｏｐＪＡ ｉ ｅｋ — ｋ ｃｏ Ｓｂｒｕ ｖ ｎＬｕ ｏ ａ ｓ ｉ ｓＡ ｖ— ） 几种免 疫抑 制性病 毒 的混合 感染也 比较普遍 。 于 Ｒ Ｖ 正越 来越 受到 重视 。 ｉ Ｖｒ ， Ｌ Ｉ等 ｓ ｕ 鉴 Ｅ 本
东、 山东 、 宁 、 林 、 龙 江 ３ 辽 吉 黑 ９个 蛋 鸡 场 １４份 ８
性抗血清做免疫荧光试验 、免疫过氧化物酶染色 、 补 体 结 合 试 验 或 Ｅ ＩＡ来 检 测 Ｒ Ｖ抗 原 进 行 证 ＬＳ Ｅ
实 。这 一 过程 通常 需要 数 十天 的时间 ， 管本 方 法 尽
但 前仍然是 Ｒ Ｅ诊断的金标准。 作者 简介 ： 昊俊铭 （ ９ ３ ）哈 尔滨人 ， 士研 究 生 ， １８ ～ ， 硕 主 相对耗时 ， 目 要从事动物病毒学研究。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
纤维 细胞 单层 ， 附 ２ ， 吸 ｈ 加入 含有 ｌ 牛血 清 的培 ％犊
养基 ， 培养 ７ 。然后再消化和传代一次 ， ｄ 继续培养 ７， ｄ 电镜 下 观察 病毒 粒 子 的形 态 。同时 将样 品消 化
传 代 至 ９ 细 胞 培 养板 中 ， ６孔 培养 ７ ， Ｒ Ｖ特 异 ｄ用 Ｅ
四川部分鸡场禽网状内皮组织增生症病毒感染情况调查
自１ ９ ５ ８年 报 道 从 火 鸡 脾 脏 中 分 离 到 首 株 Ｒ Ｅ Ｖ以
来， 本 病 就 在 亚 欧 各 地 广 泛 流 行 。近 年 来 如 匈 牙 利 、 印度嘲 、 韩 国Ⅲ 等都 有该 病 发生 的报 道 。在 我
国鸡群 中 Ｒ Ｅ Ｖ 感 染 状 况 也 普 遍 存 在 ］ ，Ｓ ｕ ｎ Ｓ Ｈ 等 从 来 自广 东 的 三 黄 鸡 受 精 卵 中 分 离 到 一 株 ＲＥ Ｖ； 赵丽青等［ ７ ］ 对山东胶东地 区 Ｒ Ｅ Ｖ 血 清 学 调 查 结 果表 明其检 出率 高达 ８ ５ ． ７ １ ～１ ０ ０ 。从 各
细胞 肿瘤 、 矮小 综合 征 、 淋 巴组 织 和其 他组 织 的慢 性
肿瘤 形成 为特 征 的一 类病 理性 综 合征 。患 病 鸡 常表
现为 生长 发育 不 良 ， 胸腺 和法 氏囊 萎 缩 ， 多器 官肿 瘤 病变 等特 征 ］ 。Ｒ Ｅ Ｖ 属 于 Ｃ型反 转 录病 毒 属成 员 ，
Ａｎａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ Ｓ ｅ ｒ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ａ ｎ ｄ Ｐａ ｔ ｈｏ ｇ ｅ ｎ ｏ ｆ Ａｖ ｉ ａ ｎ Ｉ ｎｆ ｌ ｕ ｅ ｎ ｚ ａ Ｓ ｕ ｂ ｔ ｙ ｐｅ Ｈ７ Ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ Ｇｕ ｉ ｚ ｈｏ ｕ Ｐｒ ｏ ｖ ｉ ｎｃ ｅ
动 物 医学 进 展 。 ２ ０ １ ５ ， ３ ６ （ ６ ） ： １ ６ ２ — １ ６ ６
Ｐｒ ｏ ｇ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｎ Ｖｅ ｔ ｅ ｒ ｉ ｎａ ｒ ｙ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎｅ
四川 部 分 鸡 场 禽 网状 内皮 组 织 增 生症 病 毒 感 染 情 况 调 查
结果 显 示 ， ＲＥ Ｖ在 骨 髓和 法氏 囊 中的检 出率最 高 ， 分别为 ３ Ｏ （ ３ ６ ／ １ ２ Ｏ ） 和 ２ ８ ． ３ （ ３ ４ ／ １ ２ ０ ） ， 提 示 骨髓 和 法
鸡网状内皮增生病的诊断方法
本病是由网状内皮组织增生病病毒(REV)所 引起的鸡、鸭、火鸡和其他鸟类的肿瘤性传染病。 感染之后在鸡表现为生长停滞、消瘦和贫血，还 具有炎症性、肿瘤性和坏死性 3 种类型病变，本
病常为散发性，此病毒能侵害机体免疫系统，可 导致机体免力下降而易继发其他疫病。此病于 1958 年在美国首次发现，我国也存在本病。
鸡，明显消瘦和外周神经肿大，肝脾肿大和法氏 囊萎缩。本病组织学变化特征是各种组织见到大 的空泡状淋巴细胞浸润和增生。鸡网状内皮增生 病病毒所致病变是比较均一的网状内皮系统细 胞构成。
五、诊断
高三男生里最吸引人的，说到这儿她就起身离开了，她不想就知道他的存在
本病临床症状无特异性，如果病死鸡的剖检 和病理学变化是典型的，则有可能对本病作出诊 断。确诊须进行实验室病毒分离鉴定和抗体的检 测。
对外界抵抗力不强，4℃比较稳定，－7℃下可长 期保存，长期不失去活性。
三、流行病学 1．易感动物火鸡对此病毒最易感，鸡也易
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感，现在认为本病毒为火鸡白血病的病因之一， 鸭也可通过直接接触而感染。
2．传播途径病毒可通过鸡传给鸡，但传播 能力弱，并且接触的鸡一部分产生抗体，鸡的自 然感染很可能是由火鸡和水禽传播而引起的。本
Hale Waihona Puke 病在火鸡感染时有可能经卵传播。 四、症状 自然感染和发病机理目前还不清楚。潜伏期
不确定，在慢染或急染耐过的鸡，其主要表现为
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生长停滞、消瘦，成为瘦小鸡和羽毛稀少鸡，有 的病鸡发生运动失调、肢体麻痹等症状。感染鸡 还表现精神沉郁，呆立嗜眠，剖检可见病变为增 生型和坏死型，肝、脾肿大，其表面大小不等的 灰白色结节和弥漫性病变，感染毒力较低毒株的
2020年山东省种鸡场禽网状内皮组织增生症流行病学调查
2020年山东省种鸡场禽网状内皮组织增生症流行病学调查作者：李玉杰邢林林孙圣福曹振山徐聪徐鸿陈静来源：《家禽科学》2021年第09期摘要：为了解2020年山东省种鸡场禽网状内皮组织增生症流行情况，对我省内8个种鸡场内的种鸡进行随机抽样，利用商品化酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒对850份血清进行抗体的检测。
结果显示，REV抗体阳性率为1.65%。
因此，山东省内已出现禽网状内皮组织增殖症感染情况，且出现在种鸡场中，应引起足够的重视，制定REV净化方案，创建REV阴性场。
关键词：禽网状内皮组织增生症;流行病学调查;山东省;ELISA中图分类号：S858.31 文献标识码：B 文章编号：1673-1085（2021）9-0035-03禽网状内皮组织增殖症（Reticuloendotheliosis，RE）是由禽网状内皮组织增殖症病毒群（Reticuloe-ndotheliosis virus group，REV）引起禽类的一群病理综合征，包括免疫抑制、急性致死性网状内皮细胞瘤、矮小综合征及淋巴组织和其他组织形成的慢性肿瘤等。
是家禽的一种恶性疾病，最常影响鸡和火鸡，但也影响水禽，如鸭和鹅以及其他鸟类[1]。
该病同鸡马立克病、鸡淋巴细胞白血病类似，都能引发动物机体病毒性肿瘤病。
并且REV感染不仅能引起肿瘤，还可以引起免疫抑制，REV引起的免疫抑制会降低疫苗接种所达到的抗体水平，进而导致继发感染的易感性增高，给养禽业造成严重的经济损失。
另外，通过接种被REV污染的生物制品，也会导致该病在鸡群传播，并且在本病的传播上具有重要作用。
本研究利用商品化的REV抗体检测试剂盒，对省内8个种禽场的REV进行流行病学调查，统计分析REV的阳性率、感染程度等，探讨我省REV流行情况，为制定禽网状内皮组织增殖症的防治措施奠定基础。
1 材料与方法1.1 检测样品在2020年12月到2021年1月，我单位对山东省内分布于7个地市的8个种禽场进行鸡血清的采样，采取随机抽样的方法，抽样数量按照发现疫情公式计算（置信度95%，预期流行率3%），将采样数量按照存栏比例分配到不同群体和栋舍后随机抽样。
09-SOP-046-01 禽网状内皮组织增生症病毒检验操作规程
1.目的制定禽网状内皮组织增生症病毒检验操作规程，确保禽网状内皮组织增生症病毒检验操作正常进行。
2.适用范围适用于禽源细胞、胚及用禽源细胞、胚生产的禽源制品的禽网状内皮组织增生症病毒检验，目前公司涉及产品有：1.鸡胚细胞生产的种毒、活疫苗；2.鸡胚生产的种毒、活疫苗；3.定义和缩略词CEF：鸡胚成纤维细胞4.角色与职责QC经理和主检人负责相关操作人员培训，确保操作按照规程进行。
5.健康与安全无。
6.材料CO2培养箱（设定温度37.0℃，设定二氧化碳浓度为5.0%）电热恒温水浴锅（设定温度37.0℃）倒置荧光显微镜（OLYMPUS）37℃恒温培养箱低温高速离心机（2～8℃）海尔冰箱（2～8℃，-15℃以下）FITC标记的兔抗鸡IgG（SIGMA）无水甲醇（北京化工厂）吐温-20（国药集团）病毒特异性抗血清禽网状内皮组织增生症病毒阳性种毒（中国兽医药品监察所）禽网状内皮组织增生症病毒特异性抗体（中国兽医药品监察所）100～1000μL单道移液器及配套枪头20～200μL移液器及配套枪头0.8μm、0.45μm、0.22μm、0.1μm滤芯1.5mL离心管及离心管架，4.5mL离心管及离心管架50～300μL移液器及配套枪头10mL、5mL一次性吸管10mL一次性试管10mL一次性注射器25cm2一次性细胞瓶加样槽500mL蓝盖玻璃瓶电动移液枪80～90%CEF单层1倍M19910倍M199新生牛血清青链霉素双抗（10万IU/mL）无菌注射水0.05%胰酶-EDTA（GIBCO或同等资质供货商）7.程序7.1.细胞传代在收获禽白血病第1代细胞时，取0.6mL细胞液加入到含2mL M199营养液的4.5mL 离心管中，混合均匀。
取1个48孔细胞板，按下图进行标注。
写上样品名称（疫苗批号/REV/（-））、传代日期。
用1000µL移液器吸取样品按下图接种，每个样品接种4孔，0.5mL/孔。
置37℃ CO2培养箱内培养5天。
鸡网状内皮组织增生症的诊断与综合防治技术
鸡网状内皮组织增生症的诊断与综合防治技术作者：杭柏林来源：《科学种养》2012年第03期网状内皮组织增生症（RE）是由网状内皮组织增生症病毒（REV）引起的以网状细胞增生为主要特征的肿瘤性疾病，包括急性网状细胞瘤、矮小综合征以及慢性淋巴瘤和其他组织的肿瘤。
REV可导致禽类从亚临床感染到生长迟缓、免疫抑制和出现肿瘤等多种病变表现。
目前，该病已呈世界性分布。
在我国许多省份和地区的鸡群中存在REV的感染率很高，淘汰率也高，造成严重的经济损失。
为此，本文将网状内皮组织增生症的诊断与防治技术介绍如下，希望能为临床生产提供帮助。
一、诊断技术1. 流行病学诊断。
REV主要侵害鸡、鸭、鹅、火鸡、雉鸡，也可侵害草鸡、野鸡、珍珠鸡、日本鹌鹑和孔雀。
不同品种、性别和年龄的鸡均可发生。
REV对雏鸡，特别是对1日龄雏鸡最易感。
7~300日龄的鸡均可发病，以10~15日龄的鸡易发，但发病日龄有扩大趋势。
发病率一般不高，但有报道称蛋鸡早期感染REV强毒后，70~80日龄时发病率可达90%~100%。
死亡率一般不高，呈一过性，若有其他继发或并发症则死亡率较高。
患病家禽是主要传染源。
本病可通过种蛋进行垂直传播，也可从口、眼分泌物及其粪便中排出病毒，进行水平传播。
被污染的羽毛与排泄物会导致水平传播，但传播能力较弱。
人员、器械等可传播本病。
吸血昆虫（如骚扰锥蝽、环缘库蚊）在本病的传播中也有一定作用。
被REV污染的疫苗如鸡痘疫苗、马立克氏病疫苗和新城疫疫苗可造成本病传播。
本病一年四季均可发生，但冬季多发。
REV可与其他病原如鸡传染性贫血病毒（CIAV）、禽白血病病毒（ALV）、大肠杆菌、鸡痘病毒（FPV）、禽流感病毒（AIV）、马立克氏病病毒（MDV）发生二重或多重感染，从而使得疾病更加复杂。
2. 临床症状诊断。
①急性网状细胞瘤主要由缺陷型REV-T株引起，潜伏期最短3天，患病鸡体重减轻、反应迟钝、严重消瘦、排白色稀粪、产蛋下降，很少有特征性临床表现，新孵雏鸡感染后死亡率可达100%。
禽网状内皮组织增生症病毒蛋白酶PR酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定
禽网状内皮组织增生症病毒蛋白酶PR酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定姜莉莉;蒋培红;温海燕;樊兆斌【摘要】为研究禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)蛋白酶PR与宿主细胞的相互作用,将REVPR基因克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7,构建诱饵载体pGBK-PR,经菌落PCR、酶切鉴定及测序验证正确后,将重组诱饵质粒转化酵母菌株Y2H Gold感受态,进行重组诱饵载体在酵母中的自激活活性和毒性检测.结果表明,成功构建诱饵载体pGBK-PR,此载体在酵母细胞Y2H Gold中无自激活活性和毒性.研究结果为进一步利用酵母双杂交技术筛选与REV 蛋白酶PR互作的宿主蛋白奠定了基础.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2017(053)005【总页数】4页(P27-29,33)【关键词】禽网状内皮组织增生症病毒;PR;酵母双杂交;诱饵载体【作者】姜莉莉;蒋培红;温海燕;樊兆斌【作者单位】菏泽学院药物科学与技术系,山东菏泽274015;锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁锦州121001;菏泽学院药物科学与技术系,山东菏泽274015;菏泽学院药物科学与技术系,山东菏泽274015;菏泽学院药物科学与技术系,山东菏泽274015;锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁锦州121001【正文语种】中文【中图分类】S854.43禽网状内皮组织增生症是由禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis Virus, REV)引起的一种重要的肿瘤性免疫抑制病。
REV感染能引起慢性肿瘤、矮小综合征[1]。
还可引起免疫器官的萎缩，引发重剧的免疫抑制，造成免疫失败或继发其他传染病[2]。
近年来，REV 已在全球范围内流行[3]，在我国的流行愈发严重，鸡群中REV的血清抗体阳性率逐渐增高，存在普遍的混合感染[4-5]，对养禽业危害严重。
REV属反转录病毒科，哺乳动物C型反转录病毒亚科，γ逆转录病毒属，为双倍体单股正链RNA 病毒[6]。
禽网状内皮组织增殖病病毒GD09株的分离与全基因组测序
禽网状内皮组织增殖病病毒GD09株的分离与全基因组测序史伟伟;刘红波;徐成刚;廖明;曹伟胜【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2011(38)9【摘要】从广东某鸡场送检的疑似禽网状内皮组织增殖病的病鸡中采集病料,处理后经接种DF-1细胞,经聚合酶链式反应(PCR)及特异性间接免疫荧光试验(IFA),分离并鉴定出1株禽网状内皮组织增殖病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV),命名为GD09.依据已发表的REV前病毒全基因组序列设计并合成6对引物,采用分段扩增的方法完成了分离株的全基因组序列测定.结果显示,该分离株基因组序列全长8295 bp,符合典型的复制完全型反转录病毒的基因组结构,基因序列中不含已知致癌基因.将该分离株的亚群特异性gp90基因序列与国内外各参考株相应序列进行相似性比较分析,结果表明,GD09分离株与中国分离株HA9901亲缘关系最近,核苷酸相似性最高.%An avian reticuloendotheliosis virus (REV) .designated as GD09,was isolated and identified by DF-1 cell culture, PCR and immunofluorescence assay specific to REV from broiler breeder suspected with REV infection in Guangdong province. Based on the public full-length proviral genome sequence of avian reticuloendotheliosis virus strain, six pairs of primers were synthesized, and the full-length proviral genome of GD09 isolate was sequenced by the method of fragment amplification. The full-length proviral genome sequence of GD09 isolate was 8295 bp;its size had a little difference from that of published full-length genome sequences, but its structure corresponded with typical retroviral genomestructure for completely copy ability, the known oncogenes were not included in its genome. According to the gp90 gene sequence comparison of GD09 strain with those of the other REV strains at home and abroad,the sequences of gp90 gene of GD09 strain and phylogenetic analysis showed that the gp90 gene of GD09 strain had the closest genetic relationship to HA9901 strain.【总页数】5页(P170-174)【作者】史伟伟;刘红波;徐成刚;廖明;曹伟胜【作者单位】华南农业大学兽医学院,农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东广州 510642;华南农业大学兽医学院,农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东广州510642【正文语种】中文【中图分类】S858.31【相关文献】1.网状内皮组织增殖病病毒(REV)不同分离株LTR基因的序列分析 [J], 赵文明;丁家波;崔治中2.禽网状内皮组织增殖病病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR检测方法的建立 [J], 牛秀杰;赵妍;薛美;王云峰3.网状内皮组织增殖病病毒免疫抑制状态下禽波氏菌对雏鸡致病性增强 [J], 杨萍萍;袁朋;魏凯;胡莉萍;朱瑞良4.应用聚合酶链式反应检测禽痘病毒田间分离株及疫苗株中网状内皮组织增殖病毒LTR片断,env及re1基因 [J], 段宏安;IBRAHIM DIALLO;PETER SPRADBROW;WAYNE ROBINSON5.SPF雏鸡人工感染禽网状内皮组织增殖病病毒后肝组织的超微结构观察 [J], 阿合买提.买买提;崔琳;刘忠贵;王学东因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
禽网状内皮组织增殖病
流行病学
• 鸡和火鸡最易感，尚未见哺乳动物被感染的报道。 特别是鸡胚及新孵出的雏鸡，感染后引起严重的 免疫抑制或免疫耐受。而大日龄鸡免疫机能完善, 感染后不出现或仅出现一过性病毒血症。uloendotheliosis, ＲＥ)
特征
• 继鸡白血病和马立克氏病之后的第3种病毒性肿瘤 病。
• 是由一组反转录病毒—网状内皮组织增殖病病毒 群(ＲＥＶ)引起的鸭、火鸡、鸡、和野鸡等禽类 的一组症状不同的综合征。包括免疫抑制、急性 致死性网状细胞瘤、矮小综合征(或称生长抑制综 合征、僵鸡综合征)以及淋巴组织和其他组织的慢 性肿瘤形成。
• 剖检：胸腺、法氏囊发育不全或萎缩，前胃、 肠发炎,肝、脾肿大、呈局灶性坏死，外周神 经水肿。
慢性肿瘤形成
• 由非缺陷型REV毒株引起的慢性肿瘤，主要 包括鸡和火鸡经漫长的潜伏期后发生的肿瘤， 它与淋巴细胞性白血病的主要区别在于前者 是以淋巴网状细胞为主组成的。
诊断
• ＲＥ的诊断需在典型病理变化的基础上，结合检 测ＲＥＶ或其抗体进行
• 病理变化：肝、脾肿大，并伴有局灶性灰白色肿瘤 结节或是弥漫性肿大；胰脏、心脏、小肠、肾脏及 性腺有时可见肿瘤；常见胸腺、法氏囊萎缩现象； 偶而引起火鸡、鸡的外周神经肿大。
矮小综合征
• 因接触了污染完全型ＲＥＶ的生物制品引 起的几种非肿瘤疾病的总称。
• 患禽发育受阻,体格瘦小。羽毛发育异常是Ｒ ＥＶ感染的一个很有价值的指标，有异常羽 化的出现。
历史与分布
• 自1958年Ｒｏｂｉｎｓｏｎ和Ｔｗｉｅｈａｕｓ首次在美 国分离到ＲＥＶ Ｔ株以来,已在许多国家陆续分离到不同的 毒株。它们具有相似的抗原性，统称为ＲＥＶ群。
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１ ． ３ 分离毒株ｅ ｒ ｗ基因的扩增、克隆和测序 １ ． ３ ． １ 模板ＤＮ Ａ的提取 Ｃ Ｅ Ｆ 在接 种Ｒ Ｅ Ｖ维 持６ ｄ 后收 获
细 胞 ，经 洗 涤 、 离心 沉 淀 再用 抽 提 缓 冲 液 （ １ ０ ０ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ
Ｎａ ＣＩ ・１ ０ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ Ｔ ｒ ｉ ｓ － ＣＩ ｐ Ｈ８ ． ０ ，２ ５ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ ＥＤＴ Ａ ｐ Ｈ８ ． ０ ・
文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１ ０ ０ ７ － １ ７ ３ ３ （ ２ ０ １ ３ ） １ ０ ． ０ ０ ０ ５ ． ０ ３
行 间接 免 疫 荧 ３ ￣ （ Ｉ Ｆ Ａ ） 检￣ ｌ ｌ Ｊ ［ ４ ６ ５ ９
禽 网状 内皮组织 增生病 （ Ｒ ｅ ｔ ｉ ｃ ｕ ｌ ｏ ｅ ｎ ｄ ｏ ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ｏ ｓ ｉ ｓ ，Ｒ Ｅ ） 是 禽类 的一 种重要 的致肿 瘤性 疾病 ，其病 原禽 网状 内皮组 织增 生病毒（ Ｒ ｅ ｔ ｉ ｃ ｕ ｌ ｏ ｅ ｎ ｄ ｏ ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ｏ ｓ ｉ ｓ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ，Ｒ Ｅ Ｖ ） 是一个 禽反 转录病毒群 ，是禽 白血病毒（ Ａ ｖ ｉ ａ ｎ Ｌ ｅ ｕ ｋ ｏ ｓ ｉ ｓ Ｖｉ ｒ ｕ ｓ ， ＡＬ Ｖ） 、 马立克 氏病病毒（ Ｍａ ｒ ｅ ｋ ’ Ｓ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ，ＭＤＶ ） 之 后第三种 引起禽 类发 生肿瘤 的病 毒 ，不仅 感染鸡 ，还可 以感染 火 鸡、鸭 、鹅 、鹌鹑和野鸡 等ｎ １ 。Ｒ Ｅ Ｖ主要诱发鸡 急性 网状 细胞肿瘤、淋 巴组织和其它组织 的慢性 肿瘤等 。
２ ０ １ ３年第 ｌ Ｏ 期 （ 总第 ２ ０ １
试验研究
寿 光鸡 中禽 网状 内皮组 织增生病毒 的分离鉴定
中 颖 李兆华 王成森 （ 山东畜牧兽医职业学院 山东 潍坊 ２ ６ １ ０ ６ １ ）
摘要 对发 生肿瘤 的某寿光鸡群 随机抽取 ｌ ０ 只鸡接种鸡胚成 纤维细胞 进行针对禽 网状 内皮组织增 生病毒（ Ｒ Ｅ Ｖ ） 的分
Ｄ ＮＡ Ｓ ｔ ａ ｒ 软件 进 行 分 析 。
２ ０ １ ３ 年３ 月， 山东潍 坊某鸡场 饲养 的商 品代 寿光鸡发
生肿 痛病例 ．剖 检可 见肝脏 和脾 脏有 肿瘤 ，随机抽 取５ ０
只鸡翅静 脉采血 ，分 离血清后 分别用Ｒｅ ｔ ｉ ｃ ｕ ｌ ｏ ｅ ｎ ｄ ｏ ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ｏ ｓ ｉ ｓ
离和鉴 定。分 离３ ， １ ２ 株Ｒ Ｅ Ｖ，对２ 株Ｒ Ｅ Ｖ的ｅ ｒ ｌ ｖ 基 因进行 了扩增 克隆和序列分 析 ，结 果显 示 ，２ 株Ｒ Ｅ ｖ 之 间的ｅ ｎ ｖ 基 因核 酸 同源性为９ ９ ． ８ ％，与分 离 自中国黑龙江 的ＨＬ Ｊ Ｒ ０ ９ ０ １ 和分 离 自中国台湾的Ｃ ｈ ｉ ｃ ｋ ｅ ｎ ／ ３ ３ ３ ７ ／ ０ ５ 亲缘 关系最近。 关键词 禽 网状 内皮组 织增生病毒 病毒分 离鉴 定 序 列比较
０ ． ５ ％Ｓ ＤＳ ） 悬浮 后 ，加 入蛋 白酶Ｋ （ １ ０ ０ ｕ ｇ ／ ｍｉ ） 消化过夜 ，再
－ Ｊ ｌ 乃 苯 酚 抽提 和 乙 醇沉 淀 后 ，溶 解 于 Ｔ Ｅ （ １ ０ ｍ ｍｏ ｌ ／ Ｌ Ｔ ｒ ｉ ｓ ． Ｃ ｌ ，
ｌ ｍｍｏ ｌ ／ Ｌ Ｅ Ｄ Ｔ Ａ，ｐ Ｈ８ ． ０ ） 中 即为 样 品模 板 Ｄ ＮＡ （ ５ ０ ｎ ｇ ／ Ｉ ａ ｌ －
１ ０ ０ ｎ ｇ ／ ｌ ａ １ ） 。
除肿瘤 ￣ Ｆ Ｒ Ｅ Ｖ还 可导致 感 染禽类 胸 腺 、法 氏囊等 免
疫器官 发生 萎缩 ，形成 免疫抑 制 ，降低 了免疫应 答 ，对 其它病 原体 的敏感 性增 强 ，生产 性能下 降。禽通 常可经 垂 直传 播 、水平传 播 以及经 注射 了被 Ｒ Ｅ Ｖ污 染 的活疫苗 而 感染 ，但很 少 出现 肿瘤 ，多呈 现抗 体阳性 。近 年来 ， 我 国鸡 群 中Ｒ Ｅ Ｖ的血清抗 体 阳性 率逐渐 增 高 ，特 别是 在 地 方 品系鸡 中极 为 明显 （ ・ ，显 示地 方 品 系鸡 中仍 存在 Ｒ Ｅ Ｖ感染 的 巨大 风险 。本研 究 即 从山东 省地 方 晶系寿光 鸡 中分离 鉴定 了２ 株Ｒ Ｅ Ｖ并对其ｅ ｎ ｖ 基 因进行 了测序分析 。
１ ． ３ ． ３ 扩增 产物 的克 隆和 测序 将 Ｐ ＣＲ 扩增产 物经 １ ． ０ ％
琼 脂 糖 电泳 鉴 定 并 将 目的 条 带 切下 以Ｅ ． ｚ ． Ｎ． Ａ Ｇ ｅ ｌ
Ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｋｉ ｔ （ ＯＭＥ Ｇ Ａ ， ＵＳ Ａ ） 回 收 纯 化 ＤＮ Ａ ， 将 纯 化
１ 材料与方法
１ ． １ 病 料来源与背景
Ｄ ＮＡ连接Ｐ ＭＤ ． １ ８ Ｔ Ｖ ｅ ｃ ｔ ｏ ｒ（ Ｔ ａ Ｋ ａ Ｒ ａ ，大连） 后转化火肠杆 菌 感受 态细 胞 Ｄ Ｈ５ ａ ，随机 挑取 菌 落 以Ｐ ｌ ａ ｓ ｍｉ ｄ Ｍｉ ｎ ｉ Ｋｉ ｔ （ ＯＭＥ ＧＡ，ＵＳ Ａ ） 提取 质粒进 行酶切 鉴定 ，选取 鉴定为阳 性 克 隆予 送 上 海 生工 生物 工 程有 限公 司测 序 ，序 列 以
１ ． ３ ． ２ ｅ ｎ ｖ 基 因的Ｐ Ｃ Ｒ 扩增 参 照 已发表 的文献合成 了一 对 引物用 于扩增 分离毒株 的ｅ ｎ ｖ 基 因【 ５ 】 。反应 体系参照文 献 配 置 ， 扩 增 条 件 为 ：９ ５ ＂ Ｃ预 变性 ５ ｍｉ ｎ： ９ ５ ℃， ６ ０ ｓ ． ５ ５ ℃，５ ０ ｓ ，７ ２ ℃，２ ｍｉ ｎ ；３ ３ 个循环 ；７ ２ ℃，１ ０ ｍｉ ｎ 。 以正常Ｃ Ｅ Ｆ 基因组Ｄ ＮＡ 作 为阴性对 照。