09-SOP-046-01 禽网状内皮组织增生症病毒检验操作规程
鸡网状内皮增生病的诊断方法PPT
控制措施
隔离病鸡
治疗
一旦发现病鸡，立即隔离，以防止疾病在 鸡群中传播。
对病鸡进行治疗，如使用抗病毒药物和抗 生素。
加强环境控制
保持鸡舍温度、湿度适宜，通风良好。
减少应激
避免频繁转群、运输等应激因素。
防治效果评估
定期监测
定期对鸡群进行健康检查，统计发病率、死 亡率等数据。
比较数据
通过种蛋、胚胎垂直传播给 下一代。
水平传播
通过接触感染鸡的粪便、饮 水、饲料等水平传播给同群 鸡。
媒介传播
通过某些昆虫、鼠类等媒介 传播。
02
鸡网状内皮增生病的临床症状
早期症状
精神萎靡
鸡只失去活力，缩头闭眼，行动迟缓。
食欲减退
鸡只食欲下降，饲料消耗减少。
羽毛粗糙
鸡只羽毛蓬乱，失去光泽。
体重下降
随着病情发展，鸡只体重逐渐减轻。
病理学诊断
淋巴结病变
观察淋巴结的肿大程度和质地，是否有出血、坏死等病变。
肝脾病变
检查肝脏和脾脏是否有肿大、出血、坏死等病变，以及是否 有肿瘤形成。
实验室诊断
病原检测
通过PCR、病毒分离等方法检测鸡网状内皮增生病毒， 以确诊感染。
抗体检测
采集血清样本，检测抗体水平，了解鸡群感染情况。
组织病理学诊断
3
中药研究
中药在治疗鸡网状内皮增生病方面也取 得了一定的进展，一些中草药提取物具 有抗病毒和免疫调节作用，为该病的治 疗提供了新的选择。
研究展望
病毒变异研究
随着病毒的变异和进化，对鸡网 状内皮增生病的研究需要不断深 入，了解病毒变异规律和进化趋 势，为疫苗和药物的研发提供科 学依据。
禽网状内皮组织增殖症病原检测及其抗体检测分析
禽网状内皮组织增殖症病原检测及其抗体检测分析胡杰;蒋维维;李毅【期刊名称】《上海畜牧兽医通讯》【年(卷),期】2017(000)005【摘要】运用PCR方法对8种日龄(0、21、35、75、126、168、245、315 d)的400份棉拭子、水样和环境样本以及12个批次的疫苗样本进行禽网状内皮组织增殖症病毒(REV)病原检测;用间接ELISA方法对2208份8个日龄的鸡血清样品进行REV抗体检测.结果发现,400份棉拭子、水样和环境样本R EV病原检测全部为阴性,16个批次的疫苗有2个批次疫苗检测R EV病原阳性.抗体分布特点是刚出壳时R EV抗体滴度主要集中在3000~10000,占81.88%,抗体阳性率为90.58%;21~35 d抗体下降明显,抗体阳性率仅为0~1.09%;70 d抗体为0的鸡群占50.72%,1077~1500滴度之间的血清占30.43%;126~315 d抗体滴度主要集中在12000以上,占53.26%~65.94%.【总页数】3页(P21-23)【作者】胡杰;蒋维维;李毅【作者单位】广西动物疫病预防控制中心南宁530001;广西鸿光农牧有限公司容县537500;广西鸿光农牧有限公司容县537500【正文语种】中文【相关文献】1.禽网状内皮组织增殖症研究进展 [J], 李井春2.应用改良阻断ELISA检测禽网状内皮组织增殖病血清抗体 [J], 杨汉春;高云3.禽血清网状内皮组织增殖病毒抗体的检测 [J], Sasa.,T;金光明4.基于p30-gp90融合蛋白的禽网状内皮组织增生症病毒抗体间接ELISA方法的建立 [J], 栾晓宁;郭龙宗;马广斌;李玉燕;王一新;巩新民5.郑州地区鸡场禽白血病和禽网状内皮组织增殖症感染情况检测与分析 [J], 陈海燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸡网状内皮增生
禽网状内皮组织增生病病毒分子生物学特性与免疫抑制＊马春霞，郑世民*(东北农业大学动物医学学院，黑龙江哈尔滨150030)摘要：禽网状内皮组织增生病病毒为反转录病毒科禽类C型反转录病毒。
禽网状内皮组织增生病病毒感染后主要引起感染家禽免疫功能抑制和慢性肿瘤，该病的控制对养禽业的健康发展和生物制品质量的提高具有重大影响。
文章对禽网状内皮组织增生病病毒的生物学特性与引起免疫抑制机制的研究新进展进行了简要综述。
关键词：禽网状内皮组织增生病病毒；生物学特性；免疫抑制禽网状内皮组织增生病是由反转录病毒科禽网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosis virus，REV)引起的鸡、鸭、鹅、火鸡和其他禽类发生的一种病理综合征，是严重危害禽类的传染性肿瘤病之一，包括急性网状细胞肿瘤、矮小综合征、淋巴和其他组织的慢性肿瘤。
REV最早是1958年从患内脏型淋巴瘤的火鸡脾脏中分离，经过火鸡和鸡300次连续传代而获得的病毒。
由于该病毒所引起的肿瘤以网状内皮组织增生为特征，故称为“网状内皮组织增生病”，并将该病毒命名为REV-T，即T株[1]。
目前，美国、英格兰、以色列、澳大利亚、德国、南非和日本等国家已先后分离到不同毒株。
REVs主要包括REV-T株、鸡合胞体病毒(Chick syncytia virus，CS)、脾坏死病毒(Spleen necrosis virus，SNV)、鸭传染性贫血病毒(Duck infectious anaemia，DIA)及C45株(宇文延清等，2003年)，不同毒株的抗原相关性已被确定，而且都能引起禽类免疫抑制。
禽网状内皮组织增生病在我国家禽中的感染率已达20%～30%[2]，REV感染不仅能引起肿瘤，还可以引起感染鸡胸腺、法氏囊等免疫器官萎缩，使鸡的免疫功能下降、甚至丧失，导致免疫抑制，使感染鸡极易继发感染其他病毒病和细菌病。
研究表明[3]，马立克病病毒(Marek’s disease virus，MDV)、鸡贫血病病毒(Chicken infectious anemia，CAV)和REV等免疫抑制性病毒在生产鸡群中的混合感染是导致当前养禽业生产性能下降的重要因素之一。
禽活疫苗中网状内皮组织增生症病毒污染的检测方法比较
禽活疫苗中网状内皮组织增生症病毒污染的检测方法比较作者：***来源：《家禽科学》2021年第03期摘要：本研究随机抽取4种市售活疫苗，利用RT-PCR法、IFA检测法和SPF鸡检查法，检测活疫苗中的禽网状内皮组织增生症病毒的污染，比较三种检测方法的优劣以找到更好检测的方法。
試验结果表明，RT-PCR法虽然方便、快捷，但RT-PCR法检测会产生假阳性，影响结果的判定;SPF鸡检查法操作简单结果可靠，但该方法试验周期较长，成本高;IFA检测法与传统鸡检查法相比具有快速、准确、成本低的优点，利于推广应用。
关键词：IFA检测法;RT-PCR;SPF鸡检查法;禽网状内皮组织增生症病毒;家禽活疫苗禽网状内皮组织增生症（Reticuloendotheliosis，RE）是指由反转录病毒科网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus，REV）引起的禽类以急性网状细胞肿瘤、生长抑制综合征、淋巴组织及其他组织慢性肿瘤形成为特征的一群病理综合征[1-2]。
由于REV可以通过种蛋垂直传播，如果使用污染有REV的鸡胚生产的疫苗会造成疫苗中污染REV，这是REV独特的传播途径之一[3]。
REV是活疫苗污染中常见的一种外源病毒，当被污染的疫苗免疫鸡群后可引起雏鸡免疫抑制和矮小综合征，从而给家禽养殖业造成巨大经济损失。
国内外均有因REV污染疫苗引起严重损失的案例和报道[4-6]。
对禽源活疫苗进行REV污染检测，确保疫苗使用的有效性和安全性，是防止REV传播的重要手段。
目前对疫苗中REV污染的检测，我国应用方法主要包括细胞培养法和接种SPF鸡检查法，其中接种SPF鸡检查法被认为是经典的“金标准”，检测结果相对可靠容易判定，但缺点是检测周期长。
通常情况下，家禽活疫苗中REV等外源病毒的污染需要用非常灵敏、特异性强、检测周期短的方法来进行检测。
RT-PCR法、IFA检测法和SPF鸡检查法，目的就是为了找到更为合理的检测家禽活疫苗中禽网状内皮组织增生症病毒的检测方法。
禽网状内皮增生症的防治
四、防制：
1、本病以预防为主，没有有效的治疗药物，使用没有被污染的疫苗是防制本病的关键。 2、禽网状内皮增生病造成的免疫抑制是当前生产中的主要问题。因此控制禽网状内皮增生病的危 害需要注意以下两个方面。 一是净化种禽群，对种禽群进行检测，剔除阳性禽； 二是疫苗制作实现 SPF 胚化，制造活疫苗的鸡胚必须来源于 SPF 鸡胚，以防止疫苗污染。 对于感染发病的禽尽早淘汰处理，降低经济损失。
禽网状内皮增生症的防治
禽网状内皮增生症（ REV ）是由网状内皮组织增生症病毒引起禽的一种肿瘤性传染病，病禽表现 为贫血、消瘦、生长缓慢和多种内脏器官肿瘤增生、胸腺和法氏囊萎缩、腺炎特征。 一、流行特点： 1、本病为免疫抑制性疾病。只有一个血清型，主要感染鸡和火鸡，也可感染珍珠鸡、鸭、鹅和日 本鹌鹑等。 2、本病的垂直传播、水平传播率不高，疫苗（尤其是禽痘疫苗和马立克氏疫苗）污染是该病目前 流行的重要途径。 3、发病日龄多在80日龄左右，本病毒是低温病毒，在高温季节不易发病，鸡群中的发病率和死亡 率不高，呈慢性死亡，死亡周期约为10周。 4、患病家禽是本病的主要传染源，可从口、眼分泌物及粪便中排出病毒，通过水平传播使易感禽 感染。本病亦可通过种蛋垂直传播，但传播能力较弱。
发病鸡消瘦，贫血
发病鸡腺胃肿胀，腺胃壁增厚，乳头弥漫性出血
发病鸡腺胃肿胀，腺胃壁增厚
发病鸡腺胃肿胀，有肿瘤样病变
发病鸡腺胃肿胀，有肿瘤样病变
发病鸡脾和肾脏肿瘤样增生
发病鸡脾肿大，有肿瘤样增生
鸡肝脏肿大，有散在的肿瘤结节
鸡肝脏肿大，有散在的肿瘤结节
ห้องสมุดไป่ตู้
发病鸡肝脏肿大，有扣状肿瘤结节
二、临床诊断要点： 本病潜伏期为24~48h。急性暴发禽多突然死亡，死前精神委顿，嗜睡。慢性发病禽生长停滞，消瘦， 体质衰弱，羽毛稀少，全身性贫血和黄疸，腹泻。发病鸡死亡率7%~10%，有混合感染时可达30%。
2020年山东省种鸡场禽网状内皮组织增生症流行病学调查
2020年山东省种鸡场禽网状内皮组织增生症流行病学调查作者：李玉杰邢林林孙圣福曹振山徐聪徐鸿陈静来源：《家禽科学》2021年第09期摘要：为了解2020年山东省种鸡场禽网状内皮组织增生症流行情况，对我省内8个种鸡场内的种鸡进行随机抽样，利用商品化酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒对850份血清进行抗体的检测。
结果显示，REV抗体阳性率为1.65%。
因此，山东省内已出现禽网状内皮组织增殖症感染情况，且出现在种鸡场中，应引起足够的重视，制定REV净化方案，创建REV阴性场。
关键词：禽网状内皮组织增生症;流行病学调查;山东省;ELISA中图分类号：S858.31 文献标识码：B 文章编号：1673-1085（2021）9-0035-03禽网状内皮组织增殖症（Reticuloendotheliosis，RE）是由禽网状内皮组织增殖症病毒群（Reticuloe-ndotheliosis virus group，REV）引起禽类的一群病理综合征，包括免疫抑制、急性致死性网状内皮细胞瘤、矮小综合征及淋巴组织和其他组织形成的慢性肿瘤等。
是家禽的一种恶性疾病，最常影响鸡和火鸡，但也影响水禽，如鸭和鹅以及其他鸟类[1]。
该病同鸡马立克病、鸡淋巴细胞白血病类似，都能引发动物机体病毒性肿瘤病。
并且REV感染不仅能引起肿瘤，还可以引起免疫抑制，REV引起的免疫抑制会降低疫苗接种所达到的抗体水平，进而导致继发感染的易感性增高，给养禽业造成严重的经济损失。
另外，通过接种被REV污染的生物制品，也会导致该病在鸡群传播，并且在本病的传播上具有重要作用。
本研究利用商品化的REV抗体检测试剂盒，对省内8个种禽场的REV进行流行病学调查，统计分析REV的阳性率、感染程度等，探讨我省REV流行情况，为制定禽网状内皮组织增殖症的防治措施奠定基础。
1 材料与方法1.1 检测样品在2020年12月到2021年1月，我单位对山东省内分布于7个地市的8个种禽场进行鸡血清的采样，采取随机抽样的方法，抽样数量按照发现疫情公式计算（置信度95%，预期流行率3%），将采样数量按照存栏比例分配到不同群体和栋舍后随机抽样。
禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF鸡免疫器官和疫苗免疫效果的影响
禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF鸡免疫器官和疫苗免疫效果的影响李凯;高立;祁小乐;高宏雷;高玉龙;王永强;王笑梅【期刊名称】《畜牧兽医学报》【年(卷),期】2016(047)002【摘要】禽网状内皮组织增生病(RE)是禽类的一种重要免疫抑制性疾病,目前对其造成免疫抑制的机制尚不十分清楚.本研究对实验室分离的一株REV流行毒株(HLJR0901株)感染1日龄SPF鸡后对感染鸡免疫器官和免疫功能造成的影响进行研究.结果表明,1日龄SPF鸡感染REV后出现生长迟缓,法氏囊、胸腺萎缩,脾肿大的症状.感染鸡出现法氏囊滤泡淋巴细胞大量坏死减少,间质结缔组织增生;胸腺出血,胸腺小体增多;脾小结明显萎缩,淋巴细胞减少等病理变化.荧光定量PCR检测发现,病毒在感染鸡法氏囊、胸腺和脾内均有分布,且持续存在.SPF鸡感染REV后出现严重的免疫抑制,使AIV灭活疫苗和NDV弱毒疫苗的免疫效果显著下降.本研究为阐明REV的免疫抑制机制提供了重要的实验数据.【总页数】6页(P340-345)【作者】李凯;高立;祁小乐;高宏雷;高玉龙;王永强;王笑梅【作者单位】中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽免疫抑制病研究团队,哈尔滨150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽免疫抑制病研究团队,哈尔滨150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽免疫抑制病研究团队,哈尔滨150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽免疫抑制病研究团队,哈尔滨150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽免疫抑制病研究团队,哈尔滨150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽免疫抑制病研究团队,哈尔滨150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽免疫抑制病研究团队,哈尔滨150001【正文语种】中文【中图分类】S852.659.3【相关文献】1.禽网状内皮组织增生病病毒感染SPF鸡对脾细胞中产生IFN-γ的影响 [J], 郑玉姝;赵宏坤;崔治中2.禽网状内皮组织增生病病毒感染SPF雏鸡血液淋巴细胞增殖功能及其细胞周期相关因子变化 [J], 王晓燕;刘文超;付礼胜;高雪丽;刘超男;吕晓萍;郑世民3.禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织CD4+/CD8+细胞及相关细胞因子表达的影响 [J], 刘丹华;郑世民;刘晓静;吕晓萍;高雪丽;刘超男4.禽网状内皮组织增生症病毒感染雏鸡血液T细胞数量和细胞因子含量变化 [J], 张国勍;边洋;高海婷;刘超男;高雪丽;吕晓萍;郑世民5.禽网状内皮组织增生病病毒和呼肠孤病毒感染SPF鸡对IFN-γ产生的影响 [J], 郑玉姝;赵宏坤;崔治中;赵朴;李宏梅;刘翠艳;李培庆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
禽痘病毒活疫苗中网状内皮组织增生病病毒的分离鉴定及其序列比较
禽痘病毒活疫苗中网状内皮组织增生病病毒的分离鉴定及其序列比较王景艳;李中明;赵鹏;陈浩;崔治中【期刊名称】《中国动物传染病学报》【年(卷),期】2010(018)001【摘要】为了从怀疑污染禽网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosisvirus,REV)的禽痘病毒(Fowl pox virus,FPV)活疫苗中分离病毒,将市场上购买的某些厂家的禽痘弱毒疫苗接种7日龄SPF雏鸡.在5d后采其抗凝血浆接种鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblast,CEF),在连续传2代后,用REV特异性单抗做间接免疲荧光试验,确5AREV感染,命名为JS0809.提取感染细胞的DNA,采用PCR扩增env基因.测序分析表明,该毒株的env基因开放阅读框同大部分REV毒株一致,为1761 bp.JS0809的囊膜蛋白基因(envelope protein gene,env)与国内已发表株的同源性高达96.0%～99.%.相对而言,它与早年分离到的毒株的同源性只有96%～97.3%,但与近几年的分离珠的同源性则均高达99.5%～99.8%.它与整合进FPV野毒株中的全基因组REV的env基因同源性很高为99.8%,而与整合进FPV疫苗株中全基因组REV的env基因同源性较低仅为97.3%.本研究证实了在我国生产的某些FPV疫苗中存在REV污染,所污染的REV的env基因更接近最近的流行野毒,这是国内第一次报道从禽痘弱毒疫苗中分离到REV活毒.【总页数】6页(P35-40)【作者】王景艳;李中明;赵鹏;陈浩;崔治中【作者单位】山东农业大学动物科技学院,泰安,271018;山东农业大学动物科技学院,泰安,271018;山东农业大学动物科技学院,泰安,271018;山东农业大学动物科技学院,泰安,271018;山东农业大学动物科技学院,泰安,271018【正文语种】中文【中图分类】S858.326.593;Q7【相关文献】1.含有禽网状内皮组织增生病病毒基因组片段的天然重组禽痘病毒的研究 [J], 丁家波;崔治中;于立娟;孙淑红;姜世金2.寿光鸡中禽网状内皮组织增生病毒的分离鉴定及其env基因序列分析 [J], 王海燕;李志松;李志杰3.鸡马立克病活疫苗中污染禽网状内皮组织增生症病毒检测方法的建立 [J], 李启红;杨承槐;刘丹;夏业才;李慧姣;李俊平4.禽网状内皮组织增生症病毒的分离鉴定、全基因序列分析及致病性试验 [J], 王建丽;郭凯;刘正伟;刘郁夫;刘传高;赵大伟;李慧敏;董楠;陈瑞爱5.禽活疫苗中网状内皮组织增生症病毒污染的检测方法比较 [J], 李雪莲;张雪乾;单峰;刘雪慧;陈学杰;徐太辉;刘相娥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同途径感染禽网状内皮组织增殖病病毒的动态监测
不同途径感染禽网状内皮组织增殖病病毒的动态监测徐凤霞;孙万里;张亚文;常爽;王一新;赵鹏【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2024(60)4【摘要】为明确鸡群经不同途径感染禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)的排毒动态,本试验通过设立无特定病原体(SPF)鸡胚6胚龄卵黄囊感染组、1日龄SPF鸡腹腔感染组以及对上述两组SPF鸡分别加入感染鸡的卵黄囊感染同居组和腹腔感染同居组,建立SPF鸡感染REV模型,同时设置空白对照组,在不同日龄记录各组鸡的体重和死亡情况,并综合运用反转录PCR(RT-PCR)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和间接免疫荧光试验(IFA)3种检测方法对各感染组进行REV的动态监测。
结果显示:(1)与空白对照组相比,腹腔感染组和卵黄囊感染组SPF鸡体重增长在感染后第21~70天均受到显著抑制(P<0.05),卵黄囊感染组SPF鸡的死亡率在感染后第49和63天显著升高(P<0.05),腹腔感染组SPF鸡的死亡率在感染后第42天显著升高(P<0.05),卵黄囊感染组SPF鸡血浆中REV病毒载量在感染后第21天显著高于腹腔感染组(P<0.05);(2)卵黄囊感染组SPF鸡自出壳即可检测到病毒血症阳性,并在感染后第21天时达到排毒高峰,腹腔感染组SPF鸡在感染后第14天时达到排毒高峰;(3)卵黄囊感染同居组的10只SPF鸡在感染后第7天时即检测到2只鸡呈病毒血症阳性,腹腔感染同居组SPF鸡在感染后第21天时检测到1只鸡呈阳性;(4)3种检测方法中,RT-qPCR和IFA检出REV效果更好。
本试验通过分析不同途径感染REV后鸡群血浆中的带毒状态,为REV感染的科学防控和净化提供参考数据。
【总页数】7页(P11-17)【作者】徐凤霞;孙万里;张亚文;常爽;王一新;赵鹏【作者单位】山东农业大学动物科技学院【正文语种】中文【中图分类】S831【相关文献】1.鸡混合感染J亚群禽白血病病毒与禽网状内皮增殖症病毒的初步研究2.禽网状内皮组织增殖病病毒感染鸡的外周血白细胞动态变化3.SPF雏鸡人工感染禽网状内皮组织增殖病病毒后肝组织的超微结构观察4.clade 1.3 J亚群禽白血病病毒与Ⅱ型禽网状内皮组织增殖病病毒共感染的病原分离鉴定及其囊膜基因分析5.2021年北京市种鸡场禽网状内皮组织增殖病和禽白血病监测因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
蛋鸡网状内皮组织增生病病毒分离鉴定
组 Ｄ Ａ作 为模版 ，Ｃ Ｎ Ｐ Ｒ扩增后得到 ４ ８ｂ ３ ｐ的 目的片段 ；Ｃ Ｐ Ｒ产物测序结果比对显示 ， 该毒株与其他中国野毒株 的同源诊断判定该病可能与鸡群早期感染致病 力较强的 Ｒ Ｖ有关。 Ｅ Ｈ Ｅ
关 键词 ： 兰蛋 鸡 ； 海 网状 内皮组 织增 殖 病病 毒 （ Ｅ ； 胃炎 ； 毒 分 离鉴 定 Ｒ Ｖ）腺 病 中 图分 类 号 ：８ １ 文 献标 识 码 ： 文 章 编号 ：０ １ ５ １２ １ ）６— １７ ０ Ｓ３ Ａ １０ —８８ （０ ０ ０ ０ ３ — ４ Ｉ ｏ ａ ｉ ｎ ｎ ｄ ｎ ｉ ｃ ｔｏ ｆＲｅ ｉｕｌｅ ｄ ｔ ｅｉ ｓｓ Ｖｉｕ ｎ Ｃｏ ｍ ｅ ｃ ａ ｙ ｒ Ｆｌｃ ｓ ｓ ｌ ｔｏ ａ ｄ Ｉ ｅ ｔｆ ａ ｉ ｎ ｏ ｔｃ ｏ ｎ ｏ ｈ ｌｏ ｉ ｒ ｓ ｉ ｍ ｉ ｒ ｉ ｌＬａ ｅ ｏ ｋ
江 西 农业 学 报
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（ 山东 农业 大 学 动 物 科技 学 院 ， 山东 泰安 ２ １ １） ７０ ８
禽网状内皮组织增生症研究进展
摘要：禽网状内皮组织增生症（RE ），也被称为极性网状内皮组织细胞癌，是一种重要的家禽免疫抑制疾病。
其病原体禽网状内皮组织组织增生症病毒（REV ）广泛分布于不同鸟类，可引起亚临床感染。
REV 具有免疫抑制作用，REV 整合到其他较大DNA 病毒基因组中的能力使其诊断和预防变得复杂，可能导致其他疫病的疫苗接种失败。
目前还没有有效的治疗方案和预防疫苗，这也使如何限制RE 对家禽养殖的影响变得复杂。
本文综述了RE 已知的知识现状，强调了这一问题的严重性。
关键词：禽网状内皮组织增生症；病毒；共同感染禽网状内皮组织增生症研究进展刘洪勋（博兴县畜牧兽医服务中心山东滨州256500）doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2023.09.057收稿日期：2022-12-02禽网状内皮组织增生症（reticuloendotheliosis ，RE ）是家禽的一种恶性疾病，其病原体禽网状内皮组织组织增生症病毒（reticuloen -dotheliosis virus ，REV ）最早于1958年从患有肿瘤的火鸡内脏中分离而来，于1966年根据肿瘤病变存在的主要细胞成分首次被命名[1]。
我国2008年《一、二、三类动物疫病病种名录》将RE 列为二类动物疫病[1]。
长期以来，REV 一直与鸟类中广泛传播的疟原虫白斑疟原虫有关。
报道最多的是鸡和火鸡，鸭和鹅等水禽也有报道，其他野生鸟类包括鹌鹑、鹧鸪、孔雀、麻雀和鸽子等，成熟鹌鹑和10周龄鸡极易感染[2]。
尚没有证据证明哺乳动物能产生该病，而且REV 不会在任何哺乳动物来源的培养细胞中生长。
美国得克萨斯州濒临灭绝的阿特沃特草原鸡（tympanuchus cupido attwateri ）因为种群中流行的RE 致使种群恢复工作颇受阻碍，保护区内的雉和麻雀血液样本检测的阳性率极高[3]。
从组织病理学的角度来看，RE 导致淋巴组织的急性或慢性肿瘤。
RE 的临床过程类似于其他肿瘤性疾病，如淋巴性白血病（lym -phoid leukosis ）或由J 亚组禽白血病病毒（avian leukosis virus of subgroup J ，ALV-J ）引起的禽白血病等。
野鸭源禽网状内皮组织增生症病毒的分离与鉴定
野鸭源禽网状内皮组织增生症病毒的分离与鉴定姜莉莉;祁小乐;高玉龙;邓小芸;柴洪亮;张礼洲;贠炳岭;秦立廷;王永强【期刊名称】《畜牧兽医学报》【年(卷),期】2013(044)008【摘要】利用扩增禽网状内皮组织增生症病毒(REV)长末端重复序列(LTR)的特异性引物作为检测引物,对采集于吉林省某地健康野鸭的脏器样品进行PCR检测.阳性样品经DF1培养增殖,进行病毒的分离,经PCR和间接免疫荧光(IFA)方法鉴定,确定分离到2株REV,分别来自于针尾鸭和绿头鸭,将分离病毒分别命名为DBYR1101和DBYR1102.克隆2个病毒株的主要保护性抗原基因gp90,并进行序列分析.结果显示,2个分离株gp90基因氨基酸相似性为99.5％;DBYR1101 gp90基因与REV 3个型的代表株170A、SNV和CSV的氨基酸相似性分别为95.7％、94.2％和98.2％;DBYR1102 gp90基因与REV 3个型的代表株170A、SNV和CSV的氨基酸相似性分别为95.2％、93.7％和97.7％;与中国早期南方分离株HA9901的氨基酸序列相似性分别为94.7％和94.2％;与中国北方分离株氨基酸序列相似性为99.2％～100％.核苷酸遗传进化分析表明,2个野鸟源REV分离株与现有的东北分离株亲缘关系较近,趋于形成1个北方分离群;与SNV株亲缘关系最远;与170A株亲缘关系较远;与美国和中国台湾地区的某些分离株相似性较高.该研究首次自野鸭体内分离到REV,丰富了REV流行病学资料,同时提醒我们重视野生鸟类迁徙在疾病传播中所扮演的角色,为深入研究REV致病机制、免疫抑制机制等奠定基础.【总页数】6页(P1277-1282)【作者】姜莉莉;祁小乐;高玉龙;邓小芸;柴洪亮;张礼洲;贠炳岭;秦立廷;王永强【作者单位】中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,哈尔滨150001;东北林业大学野生动物资源学院,哈尔滨150040;辽宁医学院畜牧兽医学院,锦州121001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,哈尔滨150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,哈尔滨150001;东北林业大学野生动物资源学院,哈尔滨150040;东北林业大学野生动物资源学院,哈尔滨150040;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,哈尔滨150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,哈尔滨150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,哈尔滨150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,哈尔滨150001【正文语种】中文【中图分类】S852.659.3【相关文献】1.应用PCR法检测禽源生物制品中禽网状内皮组织增生症病毒 [J], 庄金秋;梅建国;毕研丽;王金良;苗立中;沈志强2.应用PCR法检测禽源生物制品中禽网状内皮组织增生症病毒 [J], 庄金秋;毕研丽;梅建国;王金良;苗立中;沈志强3.鸡痘病毒活疫苗污染禽网状内皮组织增生症病毒的间接免疫荧光法检测研究 [J], 孙淼;李岭;李启红;夏业才;李慧姣;李俊平;杨承槐4.SYBR GreenⅠ实时荧光 PCR 法检测禽活疫苗中禽网状内皮组织增生症病毒 [J], 黄小洁;杨承槐;刘丹;陈晓春;侯力丹;李启红;李慧姣;李俊平5.分子克隆化禽网状内皮组织增生症病毒传染性及其前病毒全基因组序列研究 [J], 吉荣;崔治中;王锡乐;孙淑红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
禽网状内皮组织增生症病毒蛋白酶PR酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定
禽网状内皮组织增生症病毒蛋白酶PR酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定姜莉莉;蒋培红;温海燕;樊兆斌【摘要】为研究禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)蛋白酶PR与宿主细胞的相互作用,将REVPR基因克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7,构建诱饵载体pGBK-PR,经菌落PCR、酶切鉴定及测序验证正确后,将重组诱饵质粒转化酵母菌株Y2H Gold感受态,进行重组诱饵载体在酵母中的自激活活性和毒性检测.结果表明,成功构建诱饵载体pGBK-PR,此载体在酵母细胞Y2H Gold中无自激活活性和毒性.研究结果为进一步利用酵母双杂交技术筛选与REV 蛋白酶PR互作的宿主蛋白奠定了基础.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2017(053)005【总页数】4页(P27-29,33)【关键词】禽网状内皮组织增生症病毒;PR;酵母双杂交;诱饵载体【作者】姜莉莉;蒋培红;温海燕;樊兆斌【作者单位】菏泽学院药物科学与技术系,山东菏泽274015;锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁锦州121001;菏泽学院药物科学与技术系,山东菏泽274015;菏泽学院药物科学与技术系,山东菏泽274015;菏泽学院药物科学与技术系,山东菏泽274015;锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁锦州121001【正文语种】中文【中图分类】S854.43禽网状内皮组织增生症是由禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis Virus, REV)引起的一种重要的肿瘤性免疫抑制病。
REV感染能引起慢性肿瘤、矮小综合征[1]。
还可引起免疫器官的萎缩，引发重剧的免疫抑制，造成免疫失败或继发其他传染病[2]。
近年来，REV 已在全球范围内流行[3]，在我国的流行愈发严重，鸡群中REV的血清抗体阳性率逐渐增高，存在普遍的混合感染[4-5]，对养禽业危害严重。
REV属反转录病毒科，哺乳动物C型反转录病毒亚科，γ逆转录病毒属，为双倍体单股正链RNA 病毒[6]。
不同方法对网状内皮组织增殖病病毒的检测
不同方法对网状内皮组织增殖病病毒的检测赵文明;丁家波;崔治中【期刊名称】《中国兽医学报》【年(卷),期】2003(23)2【摘要】从山东、江苏、上海等地的鸡场中 ,收集疑为网状内皮组织增殖病病毒(REV)感染鸡的脾脏、肝脏 5 6份 ,分别通过聚合酶链式反应 (PCR)、班点杂交试验(Dot- blot)和间接免疫荧光试验 (IFA)对其进行 REV检测。
结果有 2 1份呈PCR 阳性 ,2 0份呈 Dot- blot阳性 ,15份呈 IFA阳性 ,且所有 IFA阳性样品 ,PCR和Dot- blot检测都呈阳性 ,2 0份Dot- blot阳性样品中有 19份呈 PCR阳性。
研究表明 ,PCR检测 REV较其他方法敏感 ,可作为 REV的常规检测方法之一。
【总页数】3页(P133-135)【关键词】网状内皮组织增殖病;检测;网状内皮组织增殖病病毒;聚合酶链式反应;斑点杂交试验;间接免疫荧光试验;鸡【作者】赵文明;丁家波;崔治中【作者单位】扬州大学畜牧兽医学院;山东农业大学动物科技学院【正文语种】中文【中图分类】S858.31;S852.659.3【相关文献】1.网状内皮组织增殖病病毒(REV)不同分离株LTR基因的序列分析 [J], 赵文明;丁家波;崔治中2.禽网状内皮组织增殖病病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR检测方法的建立 [J], 牛秀杰;赵妍;薛美;王云峰3.禽网状内皮组织增殖病病毒及其检测技术进展 [J], 翟新验;王兴龙;卢胜明4.聚合酶链反应技术检测禽网状内皮组织增殖病病毒 [J], 翟新验;王兴龙;卢胜明;刘月焕5.禽网状内皮组织增殖病病毒PCR及RT-PCR检测方法的研究和p30主要抗原域的原核表达 [J], 葛兆宏;陆广富因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
禽网状内皮组织增生症流行现状及检测技术研究进展
禽网状内皮组织增生症流行现状及检测技术研究进展邓小芸;祁小乐;高玉龙;高宏雷;秦立廷;王永强;王笑梅【摘要】禽网状内皮组织增生症(RE)是禽类一种重要的致瘤性和免疫抑制性疾病.近年来,国内外鸡群中网状内皮组织增生症病毒(REV)流行比较严重;REV与马立克病病毒(MDV)、鸡贫血病病毒(CAV)和J亚群禽白血病病毒(Avian leukosis virus subgroup J,ALV-J)几种免疫抑制性病毒的混合感染在我国部分养鸡场中均普遍存在,使得鸡群处于免疫力低下的状态,导致禽流感、新城疫等重要疫苗免疫失败,并容易造成继发感染,使疫病的诊断和防控难度加大.另外,REV可以整合到MDV和鸡痘病毒(Fowlpox virus, FPV)基因组中,从而导致商品化疫苗受到污染,并可用做将外源基因插入到鸡和哺乳动物细胞内的表达载体;基于REV传统检测方法的基础上,新型的分子生物学检测技术如PCR、实时荧光PCR、LAMP提高了诊断REV的敏感性和特异性.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2010(031)009【总页数】4页(P93-96)【关键词】禽网状内皮组织增生症;流行;感染;基因重组;检测技术【作者】邓小芸;祁小乐;高玉龙;高宏雷;秦立廷;王永强;王笑梅【作者单位】中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001;东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨,150030;黑龙江畜牧兽医职业学院,黑龙江双城,150111;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,禽传染病研究室,黑龙江哈尔滨,150001【正文语种】中文【中图分类】S856.5禽网状内皮组织增生症(Reticuloendotheliosis,RE)是由网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)引起鸡、鸭、鹅、火鸡及其他禽类的,以急性网状细胞肿瘤形成、矮小综合征、淋巴组织和其他组织的慢性肿瘤形成为特征的一群病理综合征[1]。
禽网状内皮组织增殖病病毒GD09株的分离与全基因组测序
禽网状内皮组织增殖病病毒GD09株的分离与全基因组测序史伟伟;刘红波;徐成刚;廖明;曹伟胜【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2011(38)9【摘要】从广东某鸡场送检的疑似禽网状内皮组织增殖病的病鸡中采集病料,处理后经接种DF-1细胞,经聚合酶链式反应(PCR)及特异性间接免疫荧光试验(IFA),分离并鉴定出1株禽网状内皮组织增殖病病毒(reticuloendotheliosis virus,REV),命名为GD09.依据已发表的REV前病毒全基因组序列设计并合成6对引物,采用分段扩增的方法完成了分离株的全基因组序列测定.结果显示,该分离株基因组序列全长8295 bp,符合典型的复制完全型反转录病毒的基因组结构,基因序列中不含已知致癌基因.将该分离株的亚群特异性gp90基因序列与国内外各参考株相应序列进行相似性比较分析,结果表明,GD09分离株与中国分离株HA9901亲缘关系最近,核苷酸相似性最高.%An avian reticuloendotheliosis virus (REV) .designated as GD09,was isolated and identified by DF-1 cell culture, PCR and immunofluorescence assay specific to REV from broiler breeder suspected with REV infection in Guangdong province. Based on the public full-length proviral genome sequence of avian reticuloendotheliosis virus strain, six pairs of primers were synthesized, and the full-length proviral genome of GD09 isolate was sequenced by the method of fragment amplification. The full-length proviral genome sequence of GD09 isolate was 8295 bp;its size had a little difference from that of published full-length genome sequences, but its structure corresponded with typical retroviral genomestructure for completely copy ability, the known oncogenes were not included in its genome. According to the gp90 gene sequence comparison of GD09 strain with those of the other REV strains at home and abroad,the sequences of gp90 gene of GD09 strain and phylogenetic analysis showed that the gp90 gene of GD09 strain had the closest genetic relationship to HA9901 strain.【总页数】5页(P170-174)【作者】史伟伟;刘红波;徐成刚;廖明;曹伟胜【作者单位】华南农业大学兽医学院,农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东广州 510642;华南农业大学兽医学院,农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东广州510642;华南农业大学兽医学院,农业部动物疫病防控重点开放实验室,广东广州510642【正文语种】中文【中图分类】S858.31【相关文献】1.网状内皮组织增殖病病毒(REV)不同分离株LTR基因的序列分析 [J], 赵文明;丁家波;崔治中2.禽网状内皮组织增殖病病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR检测方法的建立 [J], 牛秀杰;赵妍;薛美;王云峰3.网状内皮组织增殖病病毒免疫抑制状态下禽波氏菌对雏鸡致病性增强 [J], 杨萍萍;袁朋;魏凯;胡莉萍;朱瑞良4.应用聚合酶链式反应检测禽痘病毒田间分离株及疫苗株中网状内皮组织增殖病毒LTR片断,env及re1基因 [J], 段宏安;IBRAHIM DIALLO;PETER SPRADBROW;WAYNE ROBINSON5.SPF雏鸡人工感染禽网状内皮组织增殖病病毒后肝组织的超微结构观察 [J], 阿合买提.买买提;崔琳;刘忠贵;王学东因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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1.目的
制定禽网状内皮组织增生症病毒检验操作规程，确保禽网状内皮组织增生症病毒检验操作正常进行。
2.适用范围
适用于禽源细胞、胚及用禽源细胞、胚生产的禽源制品的禽网状内皮组织增生症病毒检验，目前公司涉及产品有：
1.鸡胚细胞生产的种毒、活疫苗；
2.鸡胚生产的种毒、活疫苗；
3.定义和缩略词
CEF：鸡胚成纤维细胞
4.角色与职责
QC经理和主检人负责相关操作人员培训，确保操作按照规程进行。
5.健康与安全
无。
6.材料
CO2培养箱（设定温度37.0℃，设定二氧化碳浓度为5.0%）
电热恒温水浴锅（设定温度37.0℃）
倒置荧光显微镜（OLYMPUS）
37℃恒温培养箱
低温高速离心机（2～8℃）
海尔冰箱（2～8℃，-15℃以下）
FITC标记的兔抗鸡IgG（SIGMA）
无水甲醇（北京化工厂）
吐温-20（国药集团）
病毒特异性抗血清
禽网状内皮组织增生症病毒阳性种毒（中国兽医药品监察所）
禽网状内皮组织增生症病毒特异性抗体（中国兽医药品监察所）
100～1000μL单道移液器及配套枪头
20～200μL移液器及配套枪头
0.8μm、0.45μm、0.22μm、0.1μm滤芯
1.5mL离心管及离心管架，4.5mL离心管及离心管架
50～300μL移液器及配套枪头
10mL、5mL一次性吸管
10mL一次性试管
10mL一次性注射器
25cm2一次性细胞瓶
加样槽
500mL蓝盖玻璃瓶
电动移液枪
80～90%CEF单层
1倍M199
10倍M199
新生牛血清
青链霉素双抗（10万IU/mL）
无菌注射水
0.05%胰酶-EDTA（GIBCO或同等资质供货商）
7.程序
7.1.细胞传代
在收获禽白血病第1代细胞时，取0.6mL细胞液加入到含2mL M199营养液的4.5mL 离心管中，混合均匀。
取1个48孔细胞板，按下图进行标注。
写上样品名称（疫苗批号/REV/（-））、传代日期。
用1000µL移液器吸取样品按下图接种，每个样品接种4孔，0.5mL/孔。
置37℃ CO2培养箱内培养5天。
7.2.荧光抗体染色
7.2.1.REV特异性抗体准备
用10mL 一次性吸管吸取5mL PBS加入到一个洁净平皿中。
用50μL移液器吸取REV特异性抗体10μL加入到平皿中，轻轻摇动平皿并用移液器吹打，使其混合均匀。
7.2.2.固定
5天后，将细胞板取出，甩掉细胞板中的培养液，在卫生纸上轻轻拍干。
每孔加入500μL的PBS液，轻轻摇晃细胞板10s后，再将PBS液甩掉，尽量弃尽PBS液。
每孔加入300μL的冷甲醇（-15℃保存），置室温固定15min，弃去甲醇后，自然晾干5min。
7.2.3.加禽网状内皮组织增生症病毒特异性抗体
自然晾干后，每孔加入500μL的PBS液，轻轻摇晃细胞板10s后，再将PBS液甩掉，尽量弃尽PBS液。
每孔再加入100μL 500倍稀释的禽网状内皮组织增生症病毒特异性抗体。
置37℃恒温培养箱中作用1h。
7.2.4.洗涤
用移液枪吸取75μL的吐温-20加入到150mLPBS液中，配制成含有0.05%吐温-20的洗液。
弃去禽网状内皮组织增生症病毒特异性抗体。
用1000μL移液器每孔加入500μL吐温洗液，轻轻摇晃细胞板1min后将洗液弃去，按上述方法再洗涤2次。
按上述相同方法用PBS液洗涤2次。
7.2.5.荧光二抗准备
使用前配制荧光二抗。
用10mL 一次性吸管吸取5 mL PBS加入到一个洁净平皿中。
用50μL移液器吸取荧光二抗25μL加入到平皿中，轻轻摇动平皿并用移液器吹打，
使其混合均匀。
7.2.6.荧光二抗染色
每孔加入100μL 200倍稀释的FITC标记的兔抗鸡IgG（荧光二抗）。
置37℃恒温培养箱中作用1h。
7.2.7.洗涤
按7.2.4方法用吐温洗液洗涤3次，用PBS洗涤2次。
7.3.观察
按照《荧光显微镜使用操作规程》用蓝色激发光（λ=490 nm）观察。
被感染的CEF细胞呈现绿色荧光，有完整的细胞形态，周围未被感染的细胞不着色，视野发暗。
7.4.结果判定
当阳性对照接种的4个孔中全部出现特异性绿色荧光，阴性对照接种的4孔均未出现特异性绿色荧光时，检验结果成立。
被检样品接种的4个孔中，只要有1孔出现特异性绿色荧光，即判定该样品中REV阳性。
8.文件历史
第一版，生效日期：2014-10-29。