第14章补充酶类药物及其生产工艺PPT课件
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⑤精制、冻干 调节pH8.8离心弃去沉淀， 清液再调 pH7.7加入50％聚乙二醇，浓度 达到 16％。2～ 5℃放置 4～ 5天，离心得 沉淀。蒸馏水溶解加 4倍量的丙酮沉淀，同 法反复 1次，pH6.4,0.05mol/L磷酸缓冲液 溶解，50％聚乙二醇处理 1次，即得无热原 的 L一天门冬酸胺酶。溶于 0.8mol/L磷酸 缓冲液，在无菌条件下用 6号垂熔漏斗过滤， 分装，冷冻干燥制得注射用 L一天门冬酸 胺酶成品，每I支 1万或 2万单位。
10
结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的， 所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End
11
感谢聆听
不足之处请大家批评指导
Please Criticize And Guide The Shortcomings
常见的酶类药物及治疗作用
1
Baidu Nhomakorabea
常见酶类药物
2
3
1、L-天门冬酰胺酶工艺路线
4
L-天门冬酰胺酶工艺说明
①菌种培养 大肠杆菌37℃培养24h普通牛肉培养 基;
②种子培养 16％玉米浆，接种量 1～ 1.5％，37℃， 通气搅拌培养 4～8h;
③发酵罐培养 玉米浆培养基，接种量 8％，37℃ 通气搅拌培养 6～ 8h，离心分离发酵液，得菌体， 加2倍量丙酮搅拌，压滤，滤饼过筛，自然风干成 菌体干粉;
7
二、细胞色素C生产工艺 临床上主要用于组织缺氧的急救和辅助治疗药物， 适用于治疗脑、心肌缺氧和其它因缺氧引起的一切 症状。
8
工艺过程
①绞碎、提取、压滤
取新鲜或冷冻猪心，去血块、脂肪和肌健等，绞肉机 中绞碎。称取心肌碎肉，加1.5倍量蒸馏水搅拌均匀， 用硫酸调pH4左右，常温搅拌提取压滤，滤液用氨水 调节pH6.2，离心得提取液。心渣再加等量蒸馏水同上 法重复提取1次，合并两次提取液。
演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
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②中和、吸附、洗脱
提取液加氨水中和至pH7.5，在冰箱中静止沉淀杂蛋白， 吸取上层清液，每升提取液加入10g人造沸石，搅拌吸 附40min，静置倾去上层清液。收集吸附细胞色素 C的 人造沸石，用蒸馏水和氯化钠溶液反复洗涤，然9 后装
③盐析、浓缩、透析 洗脱液加入固体硫 酸镀达到 45％饱和度，使杂蛋白析出， 过滤。收集透明滤液，缓缓加入 20％ 三氯醋酸，边加边搅拌使细胞色素 C 沉淀析出，离心收集沉淀。再将沉淀 溶于蒸馏水，装入透析袋中，透析至 无硫酸根为止，过滤得细胞色素C粗品 溶液。
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④提取、沉淀、热处理 每千克菌体干粉加入 0.01 mol/LpH8的硼酸缓冲液10L37℃搅拌 1.5h，30℃8mol/L醋酸调节pH4.2～4.4，压 滤，滤液加入2倍体积的丙酮，放置3～4h过滤， 收集沉淀，自然风干，得干粗酶。
取粗制酶，加入0·3％甘氨酸，调节pH8.8搅拌 1.5h离心，上清液60℃30min热处理。上清液 加 2倍体积的丙酮，析出沉淀，离心，收集酶 沉淀，0.01mol/L，pH8磷酸缓冲液溶解，离 心得上清酶溶液。
⑤精制、冻干 调节pH8.8离心弃去沉淀， 清液再调 pH7.7加入50％聚乙二醇，浓度 达到 16％。2～ 5℃放置 4～ 5天，离心得 沉淀。蒸馏水溶解加 4倍量的丙酮沉淀，同 法反复 1次，pH6.4,0.05mol/L磷酸缓冲液 溶解，50％聚乙二醇处理 1次，即得无热原 的 L一天门冬酸胺酶。溶于 0.8mol/L磷酸 缓冲液，在无菌条件下用 6号垂熔漏斗过滤， 分装，冷冻干燥制得注射用 L一天门冬酸 胺酶成品，每I支 1万或 2万单位。
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结束语
当你尽了自己的最大努力时，失败也是伟大的， 所以不要放弃，坚持就是正确的。
When You Do Your Best, Failure Is Great, So Don'T Give Up, Stick To The End
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感谢聆听
不足之处请大家批评指导
Please Criticize And Guide The Shortcomings
常见的酶类药物及治疗作用
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常见酶类药物
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1、L-天门冬酰胺酶工艺路线
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L-天门冬酰胺酶工艺说明
①菌种培养 大肠杆菌37℃培养24h普通牛肉培养 基;
②种子培养 16％玉米浆，接种量 1～ 1.5％，37℃， 通气搅拌培养 4～8h;
③发酵罐培养 玉米浆培养基，接种量 8％，37℃ 通气搅拌培养 6～ 8h，离心分离发酵液，得菌体， 加2倍量丙酮搅拌，压滤，滤饼过筛，自然风干成 菌体干粉;
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二、细胞色素C生产工艺 临床上主要用于组织缺氧的急救和辅助治疗药物， 适用于治疗脑、心肌缺氧和其它因缺氧引起的一切 症状。
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工艺过程
①绞碎、提取、压滤
取新鲜或冷冻猪心，去血块、脂肪和肌健等，绞肉机 中绞碎。称取心肌碎肉，加1.5倍量蒸馏水搅拌均匀， 用硫酸调pH4左右，常温搅拌提取压滤，滤液用氨水 调节pH6.2，离心得提取液。心渣再加等量蒸馏水同上 法重复提取1次，合并两次提取液。
演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日
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②中和、吸附、洗脱
提取液加氨水中和至pH7.5，在冰箱中静止沉淀杂蛋白， 吸取上层清液，每升提取液加入10g人造沸石，搅拌吸 附40min，静置倾去上层清液。收集吸附细胞色素 C的 人造沸石，用蒸馏水和氯化钠溶液反复洗涤，然9 后装
③盐析、浓缩、透析 洗脱液加入固体硫 酸镀达到 45％饱和度，使杂蛋白析出， 过滤。收集透明滤液，缓缓加入 20％ 三氯醋酸，边加边搅拌使细胞色素 C 沉淀析出，离心收集沉淀。再将沉淀 溶于蒸馏水，装入透析袋中，透析至 无硫酸根为止，过滤得细胞色素C粗品 溶液。
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④提取、沉淀、热处理 每千克菌体干粉加入 0.01 mol/LpH8的硼酸缓冲液10L37℃搅拌 1.5h，30℃8mol/L醋酸调节pH4.2～4.4，压 滤，滤液加入2倍体积的丙酮，放置3～4h过滤， 收集沉淀，自然风干，得干粗酶。
取粗制酶，加入0·3％甘氨酸，调节pH8.8搅拌 1.5h离心，上清液60℃30min热处理。上清液 加 2倍体积的丙酮，析出沉淀，离心，收集酶 沉淀，0.01mol/L，pH8磷酸缓冲液溶解，离 心得上清酶溶液。