核磁共振实验室操作规程培训讲学

核磁共振实验室操作规程

1. 打开空压机电源（电源开关向上推）；

2. 打开空压机的排气口；

3. 取下磁体样品腔上端的盖子

4. 将样品管插入转子中，然后用定深量筒控制样品管的高度。这个步骤不能缺少，如果样品管插入的太长，有可能会损坏探头。

二、常规样品的测试

1.双击桌面上的图标，进入topspin

2.1主界面，调出最近做过的一张谱图。

2. 在命令行中输入“new”回车，跳出一窗口，建立一个新的实验，输入name、Solvent、Experiment等实验参数。其中1H选proton，13C选C13CPD，点击OK。

3.“ej”回车，打开气流，放入样品管；”ij”回车，关闭气流，样品管落入磁体底部。

4.“lock solvent（选用的溶剂）”回车，进行锁场，待锁场完场后，进行探头匹配调谐和自动匀场。

7.“ased”回车，调出采样参数，根据具体的样品设置NS、DS、D1等。

8.“getprosol”回车，调脉冲参数。所有参数不用改动，尤其PL1不能修改。

9.“rga”回车，自动增益，“zg”回车，开始采样。带采样完毕后，按进行傅立叶变换和自动相位校正

13. 实验完毕后，脱锁、停止旋转，输入“ej”命令，把样品管吹出，取出样品管；“ij”关掉气流。

14、对样品数据处理，然后打印图谱

填写实验记录

三、注意事项

1. 实验前空压机必须打开，保证气流流畅；

2. 打开气流前，查看样品腔的上盖是否取下；

3. 不要带具有磁性的物质靠近磁体；

4. 本台电脑数据转移使用光盘，不允许使用其它工具如U盘等

常见问题

1.购买核磁管和氘代溶剂？

答：核磁管和常用的溶剂可以在校试剂库购买。

也可向试剂代理公司购买，例如：青岛腾龙、百灵威、创美、

柏卡、腾达远等公司，联系方式网上搜索即可。

2.核磁管如何清洗？

答：

a.用原先的溶剂（非氘代）清洗；

b.不知道原先的溶剂时，则用二氯甲烷、丙酮清洗；

c.如果仍洗不掉，在适当的溶剂中用超声波振荡，或者用棉棒擦洗（可能会损坏核磁管）；

d.如果必要的话，用混酸（HNO3/H2SO4，不可用铬酸）溶解；

e.上述一步或多步完成后，再用蒸馏水、丙酮反复洗三次，空气中干燥或低温烘干。

3.样品需要避光怎么办？

答：可用锡箔纸包裹核磁样品管，并在登记本上注明样品需要避光，我实验室的自动进样器设置有避光装置，可尽量减少样品检测时被光照。

4. 难以溶解的样品怎么办？

答：

a. 更换其他溶剂，或使用混合溶剂；

b. 根据溶剂的沸点，适当提高温度；

c. 用固体核磁谱仪检测。

NMR数据处理方法（VNMR6.1C）

一、调用图谱

点击主菜单main menu—file—(set directory—parent-change—load—wft)。此时如果能看到你需要打开的文件，则选择该文件(注意: 每次只能选定一个文件, 选定两个以上不能调用)，然后点菜单中的load，显示屏上方输入wft↙, 如果此时看不到你需要打开的文件，则set directory—parent—change来改变路径，直到进入正确的路径，然后点return，选择你需要打开的文件，点击菜单中的load，输入wft↙，此时已经能够看到图谱了。

二、图谱的处理

1、相位校正及相关处理图谱调出后, 输入aph进行相位自动校正（也可以点击菜单中的phase手动调整相位）→输入vsadj自动调整峰高到满屏的最大峰高（也可以手动调整峰高）→点击或输入dscale显示标尺→点击full显示完整谱图，dg显示参数。

2、定标输入ds，显示图谱, 把光标移到TMS附近→输入nl →点击ref→输入0。也可定溶剂峰的化学位移值如: D2O: 4.75(H谱); 碳谱: CDCl3: 77(C谱)。

3、窗函数的应用对于氢谱，输入lb=1，或者lb=’n’，对于碳谱，输入lb=1或者2，然后输入wf t↙, 目的使谱图的S/N加大，但是它是以牺牲分辨率为代价的。

4、基线调平对所有的峰进行积分，然后输入bc即可。

5、查看图谱的精细结构点击box，选定要查看的部分，点expand进行放大，点full显示整个图谱。

6、积分点击part intergral进行积分→输入cz对积分清零→点击Lvl/Tlt对基线进行调平，点击reset进行分段积分→鼠标左键在所需积分峰的左右两边点击即可, 积分完毕后再输入dc调平，输入vp=12，抬高谱图的高度, 输入dpir以便显示分段积分值。

7、化学位移的显示图谱调出经1-2-3后, 点击th调节阈值（门槛）的高度（门槛(显示黄线)以上化学位移值可以显示出来），输入dpf显示th以上各峰的化学位移值。

8、局部放大图谱的处理图谱调出经过步骤1-2-3后, 点击box选定所要放大的范围，输入inset回车→选定位置，左键定位，右键调整大小,中键调整高度→s1(或者s2,s3等)保存当前图谱,r1(或者r2,r3等)调出相应的图谱,其它步骤和处理同正常的一维谱图。

9、DEPT的处理调出谱图后, 输入wft进行处理，处理过程同前，处理完毕后输入dssa同时显示DEPT的四组图谱。也可以自动处理，自动处理过程如下：点击菜单中的main menu —analyze—DEPT—full analysis（这个菜单不仅包括分析，还包括打印全套dept图谱）。10、二维图谱的处理调出谱图后, 输入wft、wti进行窗函数处理、wft1da进行变换、wti 再进行窗函数处理、wft2da进行二维谱图的变换、对于H—H 二维可以进行对称化处理, 用foldt命令处理即可, 如再要显示二维谱图可用dconi命令, dconi相当于一位谱图的处理命令