最新核素标记化合物-检验核医学

1、氧化剂与还原 剂
Ch-T和Na2S2O5遇水、空气、阳光都不稳定，应新鲜 配制，1小时内应用。Ch-T用量应适当，过多易损伤 标记物的生物活性，过少则标记率降低或标不上，理论 上37mBq的*I仅需0.08ug，实际用量比理论高，一 般通过预实验确定。 Na2S2O5用于还原Ch-T以终止 碘化反应，用量往往是Ch-T的1.5-2倍。
放射化学 此 某纯 核 一度 素 核各 素种 特 总 的 化 定 放 放 学 化 射 射 形 学 性 性 1态 形 0% 活 活 0的 态
3、放射性比活度
放射性比活度a（specific activity）：定义： 单位质量所含的放射性活度。 单位：Bq/g、Bq/mg、Bq/mol、 Bq/mmol等
② 特点
方法简便、标记率高、重复性好、不受标 记分子的空间因素影响，试剂易得，是经 典的蛋白质碘标记方法，应用最为广泛。
蛋白质、多肽的碘标记
（2）乳过氧化物酶法 （Lactoperoxidase，LPO）
蛋白质、多肽的碘标记
B、Ch-T标记实例（放射性AFP的制备）
1、向1.5ml锥形离心管中加入含AFP（5ug）的 50mmol/L的PB（磷酸盐缓冲液）5ul
2、再向管中加入50mmol/L的PB（pH7.5）25ul, 3、向管中加入无载体Na125I溶液37MBq（2ul） 4、向管中加入用PB新鲜配制的氯胺-T 10ug
（10ul）,立即充分混匀，室温反应60秒左右 5、向管中加入新鲜配制的偏重亚硫酸钠（Na2S2O5） 水溶液20ul20ug），充分混匀，中止反应
6、加入KI 100ug标记物立即进行分离纯化，并 进 行薄板层析，计算碘标记率、125I-AFP的比活 度、 放射化学纯度.
蛋白质、多肽的碘标记
C、Ch-T标记注意事项
a A mA m
二、同位素标记与非同位素标记
化合物中的原子被其同位素原子取代，称为同 位素标记（isotopic labelling），由于标记化合 物的化学、物理、生物学性质不会引起显著差 异，亦称理想标记，如13N-NH3，15O-H2O 用化合物组成以外的原子标记，称非同位素标 记(nonisotopic labelling)，又称非理想标记，如 131I-AFP（甲胎蛋白）， 99Tcm –DTPA
蛋白质、多肽的碘标记
（二） 常用的标记方法
1、直接标记法 （1）氯胺-T法 （2）乳过氧化物酶法 （3）Iodogen法
2、间接标记法
蛋白质、多肽的碘标记
1、直接标记法
蛋白质、多肽的碘标记
（1） 氨胺-T法(Ch-T)
A、方法学原理：
氯胺-T（Chloramine T,Ch-T）化学名称：N氯代对甲苯磺酰胺钠盐，是一种温和的氧化剂， 在水中形成次氯酸，将阴离子的I-氧化为分子态的 I0或I+，在弱碱性（pH7.5）的环境里能与蛋白质 或多肽的酪氨酸残基苯环上的H+发生置换反应， 制得碘标记物。
室温下，反应时间控制在1分钟左右。过短，标记率低； 过长，虽然标记率高，但易损伤标记物生物活性。温度 降低可适当延长反应时间。
应选择新鲜、比活度高、无还原剂的*I，放射性浓度在 1.85-37GBq/ml为宜。
蛋白质、多肽的碘标记
D Ch-T应用范围与特点
① 应用范围
适用于分子中含酪氨酸、组氨酸或色 氨酸残基的蛋白质和多肽的碘标记。
2、反应体系的pH
一般最佳pH在7-8之间，过低过高均影响标记率。为 保证反应体系足够的缓冲容量，常用50 – 500 mmol/L的PB。
3、反应体积
待标记物和*I的化学量极少，反应体积不宜过大，过 大使反应物浓度变小，影响标记率，一般体积在50500ul。
4、温度与反应时 间
5、放射性* I的选择
蛋白质、多肽的碘标记
一、 常见的标记方法
（一） 蛋白质、多肽碘标记的原则：
1、待标记物要有可被碘原子结合的基团。
*I OH *I
*I
CH2CHCOOH NH2
酪氨酸
HN N
CH2CHCOOH NH2
组氨酸
CH2CHCOOH NH2
N H
*I
色氨酸
2、 要将Na*I中的*I-离子氧化成*I0或*I+
核素标记化合物-检验核医学
第一节 概述
一、放射性核素标记化合物定义 二、放射性核素的来源 三、常用概念
放 射 性 核 素 发 生 示器 意 图
三、 几个基本概念
一、放射性浓度、放射性纯度、放射化学 纯度和放射性比活度、
二、同位素标记与非同位素标记 三、定位标记与非定位标记
一、放射性浓度、放射化 学纯度和放射性比活度
1、放射性浓度
放射性浓度（radioactive concentratiБайду номын сангаасn）:
指单位体积的溶液中含有的放射性 活度，单位：Bq/L或Bq/ml。
标记化合物的放射性活度
放射性浓度= 标记化合物溶液的体积
2、放射化学纯度
放射化学纯度(radiochemical purity，RCP）：
在一种放射性核素产品中,以某种 特定化学形态存在的这种放射性核素 的百分含量。
一、放射性核素标记化 合物的制备方法
（一）、化学合成法 （二）、生物合成法 （三）、同位素交换法 （四）、金属络合物法 （五）、其他标记方法
二、14C、3H、32P、35S等标记 化合物的制备
略
三、放射性碘标记化合物 的制备
（一）、同位素交换法（略） （二）、蛋白质、多肽的碘标记 （三）、核酸的碘标记（简）
三、定位标记与非定位标记
•定位标记（specific labeling）：分子中的标记原
子限定在指定的位置上，用“S”表示。如：S-[5T]-尿嘧啶，其中95%以上3H标记在尿嘧啶分子的 第五位碳原子的C-H键上。
•非定位标记（non-specific labeling）：标记原子
的结合部位无法确定，称之为非定位标记。
•双标记（double labelling)：在化合物不同部位
引入两种不同示踪核素称之为双标记，该化合物 称为双标记化合物。
•均匀标记、全标记
第二节 放射性核素标记化 合物的制备
一、放射性核素标记化合物的制备方法 二、14C、3H、32P、35S、99mTc等
标记化合物的制备 三、放射性碘标记化合物的制备 四、99mTC标记化合物的制备