组培苗的炼苗方法

组培苗的炼苗方法 Document serial number【KK89K-LLS98YT-SS8CB-SSUT-SST108】

试管苗的炼苗和移栽

一、目的要求

熟练掌握组培苗移栽驯化技术。

二、用品

1、材料：生根组培苗；

2、器具用品：镊子；水盆；蛭石、珍珠岩、草木灰；育苗盘；喷雾器；竹签等。

三、方法与步骤

（一）练苗将生根的组培苗从培养室取出，将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右，遮阴度宜为50%~70%。然后打开瓶口，再放置3~7天。

（二）基质灭菌将蛭石、珍珠岩和草木灰分别用聚丙烯塑料袋装好，在高压灭菌锅中灭菌20分钟，或者采用高温干热灭菌法灭菌，灭菌后冷却备用。

（三）育苗盘准备取干净的育苗盘，将蛭石和珍珠岩按1：1混合，然后倒入育苗盘中，用木板刮平。将育苗盘放入1－2cm深的水槽中，使水分浸透基质，然后取出备用。

（四）试管苗脱瓶用镊子将试管苗轻轻取出，放入清水盆中，小心洗去根部琼脂，然后涝出，放入干净的小盆中。

（五）移栽用竹签在基质上打孔，将小苗栽入育苗穴盘中，轻轻覆盖、压实。待整个穴盘栽满后用喷雾器喷水浇平。最后将育苗盘摆入到驯化室中，正常管理。

四、作业

记录试管苗移栽驯化步骤，统计移栽成活率。

解释：

1、闭瓶强光练苗。当生根后或根系得到基本发育后，将培养瓶移到室外遮阴蓬或温室中进行强光闭瓶练苗5~20天左右，遮阴度宜为50%~70%。

2、开瓶强光练苗。将培养容器的盖子或塞打开，在自然光下进行开瓶练苗3~7天，正午强光或南方光照较强地区要注意采取措施如用阴蓬或温室避免灼伤小苗。如果在开盖容器中培养不超过1周，一般不会引起含蔗糖培养基的污染问题。开瓶炼苗可以分阶段进行，即首先松盖（或塞）一两天，然后部分开盖一两天，最后完全揭去盖。这种方法在相对湿度十分低的屋内特别有好处。培养容器的开口大小也影响开盖的速度，开口大的瓶盖应比开口小的瓶盖除去的速度慢一些。

3、试管苗的移栽。试管苗移栽是组织培养过程的重要环节，这个工作环节做不好，就会造成前功尽弃。试管苗从琼脂培养基中移出时要用长镊子小心取出，彻底清洗干净根部（因为残留的蔗糖和营养会成为潜在的致病微生物的生长培养基，洗不净容易引起移栽苗烂根死亡），并且避免损坏根系。之后直接移栽或使用0.1%~0.3%的高锰酸钾或多菌灵等杀菌剂溶液中清洗，然后用清水清洗后移入苗床或盆钵，也可用水清洗后用多菌灵溶液浸泡10~30分钟后移栽，栽后淋足定

根水。炼苗在塑料薄膜（或玻璃）温室内或遮阴网室内进行，使用温室或温棚时应注意设置通风口，防止浇水后高温引起萎蔫及高湿引起烂苗。生长基质应当具有适合的pH值、多空隙、良好的排水和通气性能，如一般用珍珠岩、蛭石、草炭土或腐殖土比例为1：1：0.5。也可用砂子：草炭土或腐殖土为1：1。这些基质在使用前应高压灭菌，或用至少小时烘烤来消灭其中的微生物。由于移出的试管小植株极容易感染病，所以生长环境的卫生状况和病害防治对移栽能否成功十分关键。通常对生长基质、培养容器和苗床进行消毒处理，采用新的培养容器或聚乙烯薄膜效果都很好，必要时可喷施稀的杀菌剂。

4、移栽后的管理。移出的试管苗一般在炼苗前4周遮阴要达到50%~90%，并采用喷雾洒水保持一定的湿度（85%左右），之后逐渐降低湿度和增强光照。湿度降低幅度及光照增加量依不同植物而定，总体上应促使老叶缓慢衰退并同时产生新叶。如果降低或增加过快，会使叶片褪绿和灼伤，缓苗期延长，甚至导致移栽苗死亡。但是，只要小植株能够忍受，尽可能高的光照水平是有利的。温度不应低于20℃，最好达到25~30℃。但温度湿度过高易于滋生杂菌，造成苗霉烂或根茎处腐烂，因此应对温度加以控制。遮阴和调节湿度（喷雾或塑料薄膜覆盖）也有助于控制温度。在炼苗时可适当施用大量和微量元素，如采用1/4或1/2?MS培养基溶液。移栽后定期施肥才能保持苗木旺盛生长，具体施肥方法（顶部喷施或掺入基质）与施肥量随不同植物而异。

移栽一般在春季进行，如果在北方早春或冬季较冷的时节，可能需要对移栽苗床下铺电线进行加温，促进根系功能的恢复，直至新叶形成为止。对于较难移栽的植物，可先经沙床或营养盘移栽后，再移至营养袋中培育壮苗，也可直接移入营养袋中。直到长成一定规格（一定的高度、粗度和新叶数）和无病害的壮苗后，在大田中定植。也可不进行体外生根培养，直接将试管外或瓶外生根与炼苗相结合，也就是对无根苗进行直接移栽。这种方法对某些植物行之有效，并可大大节约成本，所需要的环境条件与生根试管苗的炼苗要求相同，特别需要注意湿度、光照和温度。在向生根基质移植前，有时需要经生长素诱导生根处理。