胶体金应用

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胶体金应用

摘要:胶体金因而具有胶体的多种特性,特别是对电解质的敏感性。电解质能破坏胶体金颗粒的外周永水化层,从而打破胶体的稳定状态,使分散的单一金颗粒凝聚成大颗粒,而从液体中沉淀下来。某些蛋白质等大分子物质有保护胶胶体金、加强其稳定性的作用。呈色性微小颗粒胶体呈红色,但不同大小的胶体呈色有一定的差别。最小的胶体金(2~5nm)是橙色的,中等大小的胶体金(10~20nm)是酒红色的,较大颗粒的胶体金(30~80nm)则是紫红色的。

关键词:胶体金应用

正文:

1、胶体金在电镜中的应用

应用金探针的各种免疫标记方法的基本技术是相似的,即首先使用特异性一抗与细胞待测抗原结合,然后用金标记的二抗定位一抗。此为间接法。若直接用金标记一抗,即为直接法。[1]

胶体金应用电镜水平的研究最早,发展最快,应用最广泛。其最大优点是可以通过应用不同大小的颗粒或结合酶标进行双重或多重标记。直径为3~15nm 胶体金均可用作电镜水平的标记物。3~15nm 的

胶体金多用于单一抗原颗粒的检测,而直径15nm 多用于检测量较

多的感染细胞。

胶体金用于电镜水平的研究,主要包括:①细胞悬液或单层培养中细胞表面抗原的观察。②单层培养中细胞内抗原的检测。③组织抗原的检测。

金标记在电镜水平的应用,主要方法包括:包埋前染色、包埋后染色、免疫负染色、双标记技术和原位杂交技术等。[2]

2、胶体金免疫层析技术

胶体金免疫层析就是以胶体金为标记物对目标物进行定性或定量测定的侧向免疫层析方法。最适合免疫检测的胶体金粒径在 20~40 n m[3],该粒径范围的胶体金呈现红宝石色。其在碱性条件下带负电,可与蛋白质通过静电和疏水作用相互结合,并且不影响结合物的生物活性。应用胶体金的这些特点,人们建立了 GICA 方法。该方法的优势渐渐被人们熟识并被大量运用到各种样品的检测。这些优势包括:① 开发成本低:试纸结构简单,耗材、生产设备等成本不高;相对易于制造,易于大批量生产;② 使用较简便、快速[3]

3、胶体金在光镜中的应用

胶体金颗粒本身呈红色,其高密度及红色特征可以用于光镜研究。[1]胶体金同样可用做光镜水平的标记物,取代传统的荧光素、酶等。各种细胞涂片、切片均可应用。主要用于:①用单克窿抗体或抗血清检测细胞悬液或培养的单层细胞的膜表面抗原。②检测培养的单层细胞胞内抗原,③组织中或亚薄切片中抗原的检测。[2]

4、胶体金在流式细胞仪中的应用:

应用荧光素标记的抗体,通过流式细胞仪计数分析细胞表面抗原,是免疫学研究中的重要技术之一。但由于不同荧光素的光谱相互重叠,区分不同的标记困难,因此必须寻找一种非荧光素标记物,用于流式细胞计数。这样可以同时进行几种标记。该标记物必须能够改变散射

角,胶体金可以明显地改变红激光散射角,因而可以作为流式细胞仪的标记物之一。[2]

参考文献:

[1]胶体金探针在电镜技术中的应用,临床与实验病理学杂志,孙辉臣,1989

[2]互动百科

[3]胶体金免疫层析技术的研究进展,张莹、冯海、吴秋平,现代生物医学进展2015(12)

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