第十一讲义章糖蛋白与蛋白聚糖
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Ser/Thr-GalNAc：是最常见的O-连接,最少1个GalNAc,多达18个 以上,可连成长链或分支糖链。主要存在于粘蛋白（mucin）中， 又称粘蛋白型聚糖。糖基组成除GalNAc外，还有Gal和GlcNAc; 非还原端偶尔含SA或Fuc,但不含Man。
⑵ N-连接糖链
常为6-数十个糖基的糖链；还原端GlcNAc与蛋白质中Asn酰 胺氮（N）以β1,4糖苷键连接。这种连接方式不被稀碱水解， 但可用肼解法将其与蛋白质分离。
② N-聚糖分型(三型)
高（寡）甘露糖型( high-or oligo-mannose type ): 五糖核心以外的糖基全部是 Man。
复合型(complex type)：天线(antenna)连接GlcNAc、 Gal和 SA(NeuAc)或Fuc组成。
杂合型(hybrid type): 一半分子似复杂型，另一半分 子似高甘露糖型。
糖蛋白的荧光染色技术
甲苯胺兰,R山兰,高碘酸-Schiff试剂,高碘酸-硝酸银; SYPRO RUBBY总蛋白和Pro-Q Emerald (Diamond )糖蛋白 （磷蛋白）染色
第一节 糖蛋白
糖蛋白（glycoprotein）是蛋白质和糖 类的共价复合物
一、糖蛋白中聚糖的分类和结构 二、糖蛋白中聚糖的代谢 三、糖蛋白中聚糖的功能
纤维素：是木材的主体，尤其是棉花。分子是线状 同多糖，由1-1.5万个D-Glc单体（β1-4）构成.
几丁质：由N-GlcNAc以（β1-4）连接成的线形同 多糖。
糖脂的结构
Kdo:3-脱氧-D-甘露-辛酸（脱氧辛酮糖酸）;Hep：L-甘油-D-甘露 庚糖；AbeOAc:一种3，6-双脱氧己糖；Rha:α-L-吡喃鼠李糖
己糖: 半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、甘露糖(Man) 脱羟己糖：L－岩藻糖(Fuc) 己糖衍生物：乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc).乙酰氨基半乳糖(GalNAc 戊糖：木糖(Xyl)、L－阿拉伯糖(Ara)
己糖胺: 半乳糖胺(GalN)、葡萄糖胺(GlcN) 唾液酸(SA)：一类九碳单糖，所有神经氨酸或酮基-脱氧壬酮糖
游离形式：如植物杂多糖(heteropolysaccharide) 糖复合物：如糖蛋白(glycoprotein)、蛋白聚糖(proteoglycan）、
糖脂(glycolipids)。糖脂不属于蛋白质,了解不多。
糖蛋白或蛋白多糖中的单糖
生物界已发现200多种单糖，但只有11种出现在糖蛋白或蛋 白多糖中。
必须有Asn-X-Ser/Thr(NXS/T) 序列子（sequon）,其中X可以 是Pro以外的任何氨基酸。
O-GalNAc和N-聚糖是最重要的糖蛋白糖链，可共存于同一肽链。
O-GalNAc聚糖和N-聚糖的主要区别
2.聚糖的结构
3. 4. ⑴ N-连接型聚糖
N-聚糖由一个分支的五糖核心 (pentasaccharide
② 糖基和Ser或Thr的OH连接:
Ser/Thr-Fuc：是近来在EGF结构域中发现的只有一个Fuc的糖蛋 白，Ser/Thr的N端常有两个连续的Gly，功能尚不清；
Ser/Thr-GlcNAc：每个连接位点只有一个糖基，但可有多个连接 位点；在神经细丝蛋白，突触囊泡蛋白，细胞骨架蛋白，转录 因子及癌基因蛋白等发现；功能不清。可能参与核内蛋白的投 递，也可能参与蛋白质的磷酸化（如正常人脑中tau蛋白为oGlcNAc,而Alzheimer病人中大量被磷酸化取代）；
非还原端 支链
主链
分支点
非还原端
还原端 直链淀粉
还原端 支链淀粉
糖原（glycogen）
动物细胞储藏多糖。结构与支链淀粉大体相同，但具有更多分 支（平均8-12个残基出现一个分支），且结构比淀粉更紧密。
动物肝中糖原特别丰富，可占湿重的7％，呈大颗粒状存在。
纤维素（cellulose）和几丁质（chitin）
第十一章糖蛋白与蛋白聚糖
糖蛋白或蛋白聚糖，包括酶、激素、膜蛋白、血浆蛋白、结构 蛋白、毒素等。占总蛋白½ 以上。糖蛋白的含糖量可以小 于1％或大于99％。如胶原蛋白<1％；糖元>99％。糖蛋白 或蛋白聚糖中的糖链称聚糖(glycan)。
聚糖：即寡聚糖(oligosaccharide)或多聚糖(polysaccharide) 的总称。由同一种单糖连接而成的多糖称同多糖（homopoly saccharide）；而由两种以上单糖连接而成的多糖称杂多糖 (heteropolysaccharide).
糖链都有分支，大多存在于血浆蛋白，故称血浆蛋白型聚糖， 但在细胞膜和胞质中也普遍存在，可和O-GalNAc并存于同一 肽链上。
糖基组成除GlcNAc外，尚有Gal和Man。酸性N-聚糖的末端有 SA，中性糖链则一般以Gal或Fuc为末端。 少数的N-糖链含GalNAc和末端硫酸基团。
N-糖基化位点:
core) 和不同数量的外链组成。
① N-聚糖的五糖核心
平分型修饰:对分子结合、信号传导、生殖发育以及肿瘤细胞的生物学行为都有重要影响；如影响 受体-配体，抗原-抗体结合；已知至少9种膜型和可溶性AC，即使蛋白质部分差异较 大，但平分型糖差异极小。
核心Fuc:阻断岩藻糖基转移酶(FUT8)基因表达,能有效阻断肾小管上皮细胞的间质纤维化(EMT)。
一、糖蛋白中聚糖的分类和结构
1.糖基的连接方式和分类 2.聚糖的结构
1.糖基的连接方式分类
⑴ O-连接糖基或糖链
糖链的还原端与蛋白质肽链中Ser、Thr或 羟赖氨酸残基中羟基的氧原子（O）相连接，这 类连接方式很容易被稀碱水解。
可分两种连接方式:
① 糖基与羟赖氨酸的OH连接
这类糖基只存在于胶原中，只有两种： O－Gal O－Gal－Glc
研究发现：昆虫细胞仅能表达高甘露糖型N-糖链(Man３-GlcNAc2) 而且缺乏由五糖核心生成复合型或杂合型糖链的能力，昆虫病毒 多糖也有类似现象。
酸(KDN)的N-或O-衍生物的总称;相关衍生物已超过百余种。 醛酸：葡萄糖醛酸(GlcA)、艾杜糖醛酸(IdoA)
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淀粉多糖
直链淀粉:由D-Glc经（α1-4）糖苷连接而成的无分支的糖链， Mr几千到几百万；
支链淀粉：Mr可达一亿，并有大量分支，直链（α1-4 ）,分支 点（α1-6），大约24-30个残基出现一个分支点。
⑵ N-连接糖链
常为6-数十个糖基的糖链；还原端GlcNAc与蛋白质中Asn酰 胺氮（N）以β1,4糖苷键连接。这种连接方式不被稀碱水解， 但可用肼解法将其与蛋白质分离。
② N-聚糖分型(三型)
高（寡）甘露糖型( high-or oligo-mannose type ): 五糖核心以外的糖基全部是 Man。
复合型(complex type)：天线(antenna)连接GlcNAc、 Gal和 SA(NeuAc)或Fuc组成。
杂合型(hybrid type): 一半分子似复杂型，另一半分 子似高甘露糖型。
糖蛋白的荧光染色技术
甲苯胺兰,R山兰,高碘酸-Schiff试剂,高碘酸-硝酸银; SYPRO RUBBY总蛋白和Pro-Q Emerald (Diamond )糖蛋白 （磷蛋白）染色
第一节 糖蛋白
糖蛋白（glycoprotein）是蛋白质和糖 类的共价复合物
一、糖蛋白中聚糖的分类和结构 二、糖蛋白中聚糖的代谢 三、糖蛋白中聚糖的功能
纤维素：是木材的主体，尤其是棉花。分子是线状 同多糖，由1-1.5万个D-Glc单体（β1-4）构成.
几丁质：由N-GlcNAc以（β1-4）连接成的线形同 多糖。
糖脂的结构
Kdo:3-脱氧-D-甘露-辛酸（脱氧辛酮糖酸）;Hep：L-甘油-D-甘露 庚糖；AbeOAc:一种3，6-双脱氧己糖；Rha:α-L-吡喃鼠李糖
己糖: 半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、甘露糖(Man) 脱羟己糖：L－岩藻糖(Fuc) 己糖衍生物：乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc).乙酰氨基半乳糖(GalNAc 戊糖：木糖(Xyl)、L－阿拉伯糖(Ara)
己糖胺: 半乳糖胺(GalN)、葡萄糖胺(GlcN) 唾液酸(SA)：一类九碳单糖，所有神经氨酸或酮基-脱氧壬酮糖
游离形式：如植物杂多糖(heteropolysaccharide) 糖复合物：如糖蛋白(glycoprotein)、蛋白聚糖(proteoglycan）、
糖脂(glycolipids)。糖脂不属于蛋白质,了解不多。
糖蛋白或蛋白多糖中的单糖
生物界已发现200多种单糖，但只有11种出现在糖蛋白或蛋 白多糖中。
必须有Asn-X-Ser/Thr(NXS/T) 序列子（sequon）,其中X可以 是Pro以外的任何氨基酸。
O-GalNAc和N-聚糖是最重要的糖蛋白糖链，可共存于同一肽链。
O-GalNAc聚糖和N-聚糖的主要区别
2.聚糖的结构
3. 4. ⑴ N-连接型聚糖
N-聚糖由一个分支的五糖核心 (pentasaccharide
② 糖基和Ser或Thr的OH连接:
Ser/Thr-Fuc：是近来在EGF结构域中发现的只有一个Fuc的糖蛋 白，Ser/Thr的N端常有两个连续的Gly，功能尚不清；
Ser/Thr-GlcNAc：每个连接位点只有一个糖基，但可有多个连接 位点；在神经细丝蛋白，突触囊泡蛋白，细胞骨架蛋白，转录 因子及癌基因蛋白等发现；功能不清。可能参与核内蛋白的投 递，也可能参与蛋白质的磷酸化（如正常人脑中tau蛋白为oGlcNAc,而Alzheimer病人中大量被磷酸化取代）；
非还原端 支链
主链
分支点
非还原端
还原端 直链淀粉
还原端 支链淀粉
糖原（glycogen）
动物细胞储藏多糖。结构与支链淀粉大体相同，但具有更多分 支（平均8-12个残基出现一个分支），且结构比淀粉更紧密。
动物肝中糖原特别丰富，可占湿重的7％，呈大颗粒状存在。
纤维素（cellulose）和几丁质（chitin）
第十一章糖蛋白与蛋白聚糖
糖蛋白或蛋白聚糖，包括酶、激素、膜蛋白、血浆蛋白、结构 蛋白、毒素等。占总蛋白½ 以上。糖蛋白的含糖量可以小 于1％或大于99％。如胶原蛋白<1％；糖元>99％。糖蛋白 或蛋白聚糖中的糖链称聚糖(glycan)。
聚糖：即寡聚糖(oligosaccharide)或多聚糖(polysaccharide) 的总称。由同一种单糖连接而成的多糖称同多糖（homopoly saccharide）；而由两种以上单糖连接而成的多糖称杂多糖 (heteropolysaccharide).
糖链都有分支，大多存在于血浆蛋白，故称血浆蛋白型聚糖， 但在细胞膜和胞质中也普遍存在，可和O-GalNAc并存于同一 肽链上。
糖基组成除GlcNAc外，尚有Gal和Man。酸性N-聚糖的末端有 SA，中性糖链则一般以Gal或Fuc为末端。 少数的N-糖链含GalNAc和末端硫酸基团。
N-糖基化位点:
core) 和不同数量的外链组成。
① N-聚糖的五糖核心
平分型修饰:对分子结合、信号传导、生殖发育以及肿瘤细胞的生物学行为都有重要影响；如影响 受体-配体，抗原-抗体结合；已知至少9种膜型和可溶性AC，即使蛋白质部分差异较 大，但平分型糖差异极小。
核心Fuc:阻断岩藻糖基转移酶(FUT8)基因表达,能有效阻断肾小管上皮细胞的间质纤维化(EMT)。
一、糖蛋白中聚糖的分类和结构
1.糖基的连接方式和分类 2.聚糖的结构
1.糖基的连接方式分类
⑴ O-连接糖基或糖链
糖链的还原端与蛋白质肽链中Ser、Thr或 羟赖氨酸残基中羟基的氧原子（O）相连接，这 类连接方式很容易被稀碱水解。
可分两种连接方式:
① 糖基与羟赖氨酸的OH连接
这类糖基只存在于胶原中，只有两种： O－Gal O－Gal－Glc
研究发现：昆虫细胞仅能表达高甘露糖型N-糖链(Man３-GlcNAc2) 而且缺乏由五糖核心生成复合型或杂合型糖链的能力，昆虫病毒 多糖也有类似现象。
酸(KDN)的N-或O-衍生物的总称;相关衍生物已超过百余种。 醛酸：葡萄糖醛酸(GlcA)、艾杜糖醛酸(IdoA)
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淀粉多糖
直链淀粉:由D-Glc经（α1-4）糖苷连接而成的无分支的糖链， Mr几千到几百万；
支链淀粉：Mr可达一亿，并有大量分支，直链（α1-4 ）,分支 点（α1-6），大约24-30个残基出现一个分支点。