病料采集、保存和运输

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病料采集、保存和运输
猪病的种类很多,有点是常病和多发病,,如白痢、黄痢等,比较容易诊断,有的表现出特异性的症状和病变,如水肿、气喘等,可以一目了然,但在更多的情况下疾病是缺乏特征性的病变,甚至肉眼看不到明显的病变,有的出现两种以上不同疾病的复杂病变,而小区有缺发实验室诊断做进一步的检验。

现将细菌、病毒、寄生虫、毒物和病理组织学的检查材料的采集、保存和运输方法,做一简要介绍。

一、细菌和病毒学检查材料
1、取料时间的要求,在患畜死后即行采取,一般情况下最好不超过6小时,但炎热夏天越快越好。

剖开腹腔后,首先取材料再做检查,因时间拖长后肠道和空气中的微生物都可能污染病料;
2、采集病料是应进行无菌操作,新用的容器和器械都要经过消毒,刀、剪、镊子用火焰消毒或煮沸(100℃,15-20分钟);玻璃器皿(试管、吸管、注射器及针头)要洗干净,用纸包好高压灭菌(1.5kg/平方厘米,121℃,20-30分钟)或干热灭菌(160℃,2小时)。

3、采病料要有目的地进行,首先要怀疑是什么病,就采什么病料,如果不能确定是什么病时,则尽可能的全面采集病料,取料方法如下:
一是实质器官(肝、脾、肾、淋巴结):先用废刀(新刀火烧后易损坏),在酒精灯上烧灼后,用灭菌的刀、剪、镊子从组织深部取病料(约1-2平方厘米大小)放在灭菌的容器内。

二是血液、胆汁、浓汁等流汁病料。

心、胆囊病变,用灭菌注射器插入器官或病变内抽取,再注入灭菌的试管或小瓶内。

猪死后不久血液就凝固,无法采血样但从心室内尚可取出少量(多数为血浆)。

若死于败血症或某些毒物中毒则血液凝固不良。

三是采血,是指加抗凝剂的血液,用无菌操作从耳静脉采血3-5毫升,盛于灭菌的小瓶内,瓶内先加抗凝剂(20%枸椽酸钠)2-3滴于5毫升血液中,轻轻振摇。

四是血清,同上方法才出3-5毫升血液,置于干燥的灭菌试管内,经1-2小时后即自然凝固析出血清,必要时可进行离心,再将血清液置于另一个灭菌的小管内,冰冻保存。

五是肠内容物和肠壁。

用吸管插穿肠壁从肠腔内吸入内容物置试管内,也可将肠管两端结扎后取出送检。

六是皮肤、结痂、皮毛等。

用刀、剪割取新需的样品,主要用于真菌、疥螨、痘疮的检查。

七是脑、脊髓等病料。

常用于病毒学的检查,无菌操作采集病死猪的脑或脊髓,冰冻保存送检。

4、送检材料的包装和送运要求如下:1、涂片自然干燥,在玻片之间垫上半截火柴棒,避免摩擦,最外的一面
倒过来使涂面朝下,然后捆扎,用纸包好。

2、装在试管、广口瓶或青霉素瓶内的病料,均需盖好盖或塞好棉塞,然后用胶布粘好,在用蜡封固,放入保温箱中。

盛病料的容器均应保持正立,切勿翻倒物件标本却要写好标签。

3、病料送检是应托运或专人送检,并附带记的内容包括送检单位、地址、动物种类、送检目的、保存方法、死亡时间、剖检日期、送检者姓名及电话号码,并附上临床病例摘要。

二、寄生虫学检查材料
1、血液寄生虫(以血孢子虫)需送检血液及全血。

2、线虫(绝大部分在肠道,也有的在肺、肾等处)主要是挑拣虫体(要注意采集的部位),尽可能多采集一
些,并把它保存在4%福尔马林溶液或70%的酒精中。

三、毒物学检查材料
1、要求容器清洁,物化学杂质,要洗刷干净,不能随便用药瓶盛装,病料中更不能放入防腐消毒剂,因为化学药品可能发生反应而妨碍检验。

2、送检材料应包括肝肾胃肠内容物及怀疑中毒的饲料样品甚至血和膀胱内容物。

3、每一种病料应该在一个容器内,不要混合。

4、专人保管、送检,除微生物检查新附带的例外,尚须提供剖检材料,提供可疑的毒物。

四、病理组织学检查材料
1、及时来取,及时固定,以免自溶出现死后变化,影响诊断。

2、新切取的组织,应包括病灶和其邻近的正常组织两部分,这样便对照观察,更主要的是看病灶周围的炎症反应变化。

3、采取的病理组织材料,要包括各器官的主要结构,如应包括皮质,髓质、肾乳头及被膜。

4、送取病料时,切勿挤压(可使组织变形),刮抹(使组织破损),冲洗(水洗易使细胞和其他细胞解分水肿而胀大,甚至破裂)。

5、选取的组织不宜太大,一般为3×2×0.5(厘米)或1.5×1.5×0.5(厘米),尸检取标本是可先切取稍大的组织块,待固定一段时间(数小时至过液)后再修整成适当大小,并换固定液继续固定。

常用的固定液是10%福尔马林固定液量为组织体积的5-10倍,容器可以用大小适宜的广口瓶。

6、当类似的组织快较多,一造成混淆时,可分别固定于不同的小瓶内,并附上标记(用铅笔标记的小纸片和组织块一同用纱布包裹),再行固定。

7、将固定好的病理组织块,用浸渍固定液的脱脂棉包裹,放置于广口瓶或塑料袋内,并将口封闭再用干棉花包好装入木盒内寄送。

此时应将整好的尸检记录及有关材料一同寄出,并在送检单中说明送检的目的和要求。

五、猪常见传染病应送检的病料
1、猪瘟取血清、脾、肝、肾、淋巴结做病原学病理组织学和血清的检查。

2、猪乙型脑炎、伪狂犬病、繁殖与呼吸综合症、细小病毒感染等疾病,取血清、脑组织、睾丸及死胎、肺、淋巴结,做血清学、病原学和组织学检查。

3、猪肺疫、猪传染性胸膜肺炎、猪丹毒、链球菌病等,耳、心血、肝、脾、肺送检,做细菌学检查。

慢性病例,应取心瓣膜增生物送检。

4、沙门氏菌病、病毒性,切取肝、脾并结扎一段小肠做病原学检查。

5、结核、放线杆菌、霉菌性肺炎等,耳局部病变组织,做细菌学检查和组织学检查。

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