水的细菌检测

能源、碳源不同的微生物分类
营养类型
能源 电子供体 碳源
实例
光能无机营养型 光能 H2、H2S CO2 蓝细菌、紫硫细菌、绿
（光能自养型）
、S或H2O
硫细菌、藻类
光能有机营养型 光能 （光能异养型）
有机物 CO2以及 简单有机 物
红螺菌属的细菌
化能无机营养型 无机物 H2、H2S
（化能自养型）
、Fe2+、 NH4+或
（三）培养基类型及应用
1.根据培养基成分划分
天然培养基 合成培养基 半合成培养基
► 1）合成培养基
► 合成——纯化学试剂
• 优点——稳定、选择性 • 缺点——很多细菌营养需
求较为复杂，配方获取较 难
► 2）天然培养基
► 天然——？ ► 纯生物制品(细胞提取物)
► 如，常用的细菌肉汤培养基
► 牛肉膏 3g 蛋白胨 5g ► 水 1000mL pH 7.2~7.4 ► 牛肉膏——瘦牛肉经过加热浓
2、能源
► 细菌的能源种类 ► 化学能、光能
提问：哪些物质可以产生化学能？ • 有机碳源 • 特殊的无机物（如S、Fe) • 提问：什么样的细菌利用光能？ • 含有光合色素
► 所有细菌细胞内能量传 递体都是ATP
► 营养型细菌分类 ► 根据碳源不同 ► 分为无机营养——有机
营养 ► （或自养——异养）
•工业投加的细菌氮源？
•——尿素、粪便
4、无机盐
► 阴离子盐：磷酸盐、硫酸盐、氯化物、碳酸盐、碳酸氢盐。 ► 阳离子盐：氨、钾、钠、钙、镁、铁的盐 ► P和S、Fe、Mg的需求量较大 ► 同时还需要锌、锰、钴、铝、铜、硼、钒、镍等微量元素。
5、生长因子
• ——必需，但不能自身合成的有机物
► 种类：嘌呤、嘧啶类、维生素类 ► 作用：？ ► 嘌呤和嘧啶参与合成核酸和辅酶； 维生素，重要辅酶 Байду номын сангаас 多数细菌不存在生长因子问题。 ► 只有少数细菌需要外界提供现成的生长因子，才能生
NO2-
CO2 硝化细菌、硫化细菌、 铁细菌、氢细菌、硫磺 细菌
化能有机营养型 有机物 有机物 有机物 绝大多数原核微生物和
（化能异养型）
全部真核微生物
3、氮源 ► 提问：哪些物质可作为细菌的氮源？ ► 有机氮（氨基酸和蛋白质）、无机氮（ N2、 NH3、铵 盐、硝酸盐）等。 ► 实验室中有机氮源——蛋白胨
天然的固体培养基——土豆块、培 养真菌的麸皮、大米、大麦等。
► 石花菜(红藻）→琼脂
琼脂特性： • A.不能被绝大多数微生物
利用、分解液化； • 提问：有什么好处？ • 不作为额外碳源，干扰试
验，保持固体特性
B.高压灭菌结构不被破坏，且 颜色透明不妨碍观察； C.多数微生物在琼脂培养基表 面生长并形成独立菌落；
长，如乳酸菌需要多种维生素，因此只能生活在这些 物质供应充足的环境，如牛奶中、肠道。
6、水
► 提问：水对细菌有哪些作用？ ► 1)溶剂作用 ► 2)运输物质的载体 ► 3)参与生化反应(如脱水、加水反应)
（二）营养物质进入细胞的方式
营养物质通过细胞膜的方式主要有4种 1.单纯扩散 2.促进扩散 3.主动运输 4.基团转位（磷酸转移酶系统）
(二) 玻璃器皿的循环使用
（三）菌落总数及实验前的准备 菌落总数：水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培 养48h后，所得1mL水样所含菌落的总数。
1. 培养皿的包扎
2. 吸管的包扎
3.棉塞制作 4、试管的包扎 5、锥形瓶的包扎 6.采样瓶的包扎
实验前的准备要求： 种类齐全 数量富足。
任务3.2 微生物营养及培养基的制备
•糖 • 尤其是葡萄糖
常见的碳源
实验室常用的几种碳源：葡萄糖、蔗糖、乳糖、可溶性淀粉等
发酵工业中常利用的碳源： 单糖、饴糖、糖蜜（制糖工业副产品）、淀粉（玉米粉 、山芋粉、野生植物淀粉）、麸皮、米糠、酒糟、马铃 薯等。
微生物分类 自养微生物：
生长时能以简单的无机物质作为营养物质
异养微生物 生长时需要以复杂的有机物质作为营养物质
（一）微生物的营养物质
传统上根据功能不同对营养物归类 ►碳源和能源 ►氮源 ►无机盐 ►生长因子等 ►水
1、碳源
• 供碳元素来源的物质 • 细菌细胞中的碳素含量占
干物质质量的50％左右。 细菌对碳素的需求量最大。 • 碳源作用— • 细胞的碳骨架、大多还是 能源物质。
► 种类？ ► 有机物、无机碳化合物 ► 随细菌不同，各有偏好 ► 细菌最喜好的碳源是？
培养皿(平皿)：一般直径为9cm。 试管：较大的长220mm，直径20mm；较小的长150mm， 直径15mm。 锥形瓶：—般容量为250mL、500mL。 量筒、量杯：用于定量量取各种液体。 移液管（吸管）：一般容量为lmL、10mL等。 载玻片与盖玻片：普通载玻片大小为75mm×25mm，盖 玻片为18mm×l8mm。 其他：滴瓶(用来装各种染料、生理盐水等)、烧杯、漏斗 等。
作用: 1.纯种分离 2.计数 3.菌落特征
（3）半固体培养基
► 在液体培养基中加入0.5%或更低浓度的琼脂 ► 半固体培养基中可以融入少量的溶解氧，因此这种培养基
缩抽提的膏状物（主要作碳源）
酵母膏
• 蛋白胨——动植物蛋白（大豆或动物骨粉等）经初步酶 解形成的短肽（主要作氮源）
• 类似物如酵母膏、麦芽汁、土壤浸出液、牛奶、玉米粉 ► 优点——营养丰富、配制容易
§ 缺点？
► 质量不稳定、选择性差；
► 3）半合成培养基
► 半——不纯
优缺点介于前两者之间，因而使用最广
2、根据物理状态 ► 固体培养基、半固体培养基和 液体培养基
► （1）液体培养基（“汤”） ► ——废水也可看作是一种广义的液体培养基
（2）固体培养基
► 人工做法——(与果冻方法一样) ► 向液体培养基中加入2％左右的
琼脂，加热至100℃溶解，40℃ 下冷却并凝固。
粉末琼脂 条状琼脂
•琼脂主要成份—半乳聚糖，分 子量大，呈网状粘着力强，溶解 分散（温度为96℃以上）
项目3 污水中菌落总数检测
GB/T5749-2006 《中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准 检验方法》（ 2007年7月1日执行）规定生活饮用水中微生物 指标及限制为: 细菌总数（CFU/mL）不得超过100个；
注：CFU表示菌落形成单位。
任务3.1 菌落总数的检验物品准备工作
(一) 微生物实验室常用的玻璃器皿