松茸多糖成分分析
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中图分类号 ： ０６ ２ ９ ． １ 文 献标 识码 ： Ａ
松茸 （ Ｔ ｒ ｉ ｃ ｈ ｏ ｌ ｏ ｍａ ｍａ ｔ ｓ ｕ ｔ ａ ｋ ｅ ） 属 担 子 菌 门 （ Ｂ ａ ｓ ｉ ｄ ｉ ｏ ｍｙ ｃ ｏ ｔ ａ ） ， 担 子 菌纲 （ Ｂ ａ ｓ ｉ ｄ ｉ ｏ ｍｙ － ｃ ｅ ｔ ｅ ｓ ） ， 伞 菌 目（ Ａｇ ａ ｒ ｉ ｃ ａ ｌ ｅ ｓ ） ， 口蘑科 （ Ｔ ｒ ｉ ｃ ｈ ｏ ｌ ｏ ｍａ ｔ ａ ｃ ｅ ａ ｅ ） ， 口 蘑属（ Ｔ ｒ ｉ ｃ ｈ ｏ ｌ ａ ｍａ ） ， 是 名 贵食 用 药 用 菌． 主 要 分 布 于 日本 、 朝鲜 、 美国、 加拿 大 和 北 欧 国 家 ， 我 国主 产 地 区为 东北 和云 南． 松 茸 含 有蛋 白质 、 脂 肪 和 多种 氨基 酸 、 维生 素等 ， 具有 强身 、 益肠 胃 、 止痛 等功 效 ． 研究 表 明 ， 松 茸子 实体 热水 提取 物 （ 即多糖 ） 对小白 鼠肉瘤 １ ８ ０和 艾 氏 癌 的抑 制 率 分 别 为 ９ １ ． ８ 和
糖 水 解 产 物． 结 果 确 定 松 茸 多 糖 水 解 产 物 中 的 ５种 单 糖 ： 木糖 ， 甘露 糖 ， Ｉ ） Ｉ 葡萄 糖 ， 半乳糖 ， 【 ） ＿ 葡 萄糖 醛 酸 ， 单 糖 摩 尔 比为 １： １ ． ８： ３ ２ ６ ． ５： ５ ２ ． ５ ３： ２ ８ ． ８ ３ ， 可 能含有 【 ） ＿ 阿拉伯 糖． 为 深 入 研 究 松 茸 多糖 提供 了 理 论 依 据 ． 关键 词 ： 松 茸 ；多糖 成 分 分 析 ；甲基 化 反 应 ； 气 相 色 谱 法
作 用方 面 ， 对 多糖本 身组 成 研 究 较 少 ， 而 多 糖 结构
研 究 中单糖 组成 及摩 尔 比分析 是重 要环 节 ． 为进 一 步研究 松茸 多糖 中单 糖组 成 ， 本文 对松茸 多 糖进 行
复处 理至 氯仿 与水层 间无胶 状物 产生 ． 加 入无 水 乙
醇至 醇浓度 为 ７ Ｏ ， ４ ℃静 置 １ ２ ｈ ， 过滤 ， 冷 冻 干燥
第４ ７卷 第 ５期
２ ０ １ ３年 １ ０月
华中师范大学学报 （ Leabharlann Baidu然 科 学 版 ）
ｊ ｏｕＲＮＡＬ ＯＦ Ｈ ＵＡＺＨ０ＮＧ Ｎ０ＲＭ ＡＬ Ｕ ＮＩ ＶＥＲＳ Ｉ ＴＹ（ Ｎａ ｔ ．Ｓｃ ｉ ． ）
Ｖｏ １ ． ４７ Ｎｏ ．５ Ｏｃ ｔ ． ２Ｏ１ ３
国 Ａｇ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ 公 司） ， 真 空干燥 箱 （ ＸＭＴ Ｄ － ８ ２ ２ ２型 ， 上
海 精宏 实验 设备 有 限公 司） ， 超 低 温冷 冻储 存箱 （ 中
科美菱） ， 低速离心机 （ Ｔ Ｄ２ ５型 ， 长 沙 平 凡 仪 器 仪 表 有 限公 司） ， 冷冻 干燥 机 （ Ｆ Ｄ 一 １ Ｂ 一 ５ ０型 ， 北 京博 医 康 实 验仪 器 有 限 公 司 ） ， 电子天 平 （ 精度 ０ ． １ ｍｇ ， ＡＲ ２ １ ４ ０型 ， 上海 奥豪 斯仪 器 有 限公 司） ， 旋 转 蒸 发 仪（ Ｒ Ｅ 一 ５ ２ Ａ型 ， 上 海 亚 荣生 化 仪 器 厂 ） ， 标 准 单糖 （ Ｓ ｉ ｇ ｍａ 公 司） ． 氯仿 ， 甲醇 ， 无水 乙醇 ， 正 丁醇 ， 三 氟 乙酸 ， 氢氧 化 钠 ， 硼 氢 化钠 ， 三 甲基 氯 硅 烷 ， 六 甲基 二硅 醚烷 ， 吡啶 ， 分子 筛． 试 剂 皆为分 析 纯．
１ ． ２ 多 糖 提 取
７ Ｏ ｌ １ ］ ， 可使 小 鼠脾 脏 增 重 为 正 常 鼠 ５倍 ， 同 时使 脾 组织 ｃ ＡＭＰ含 量增 高 ］ ， 具 备 免疫 功 能保 护 ， 抗 氧 化 系统 保 护 ， 体外抗肿 瘤， 以及 抗 应 激ｃ 。 剖等 作
用． 因此 ， 松 茸 多糖 不 论 在药 物开 发 还 是 医 疗保 健 研 究方 面均 有一 定价 值 ． 目前 对 松 茸 多糖 的研 究 主要 集 中 在 多糖 药 理
得 较 纯多糖 ． １ ． ３ 多糖水 解 ， 单 糖 还 原
水解 、 甲基 化反 应 ， 通 过 气 相 色 谱 法对 照 已知单 糖
气 相色谱峰 确定多糖 中单 糖组分 ， 并计算 摩 尔 比． 气 相色谱法具 有分析速度 快 、 样 品用 量少 、 高灵 敏度等 优点 ； 甲基 化在多糖 化学反应 中较为 常见 ， 利 用该 反
取０ ． ５ ～１ ． ０ ｍｇ多 糖 溶 解在 １ ｍＬ ４ ｏｏ ｔ ｌ ／ Ｌ的 Ｔ Ｆ Ａ（ 三氟 乙酸） 中， 充 氮气 加盖密 封 ， １ ０ ０ ℃水 解４ ｈ ，
应可解 决多糖在气 相色谱分 析 中挥发 性和热 稳定 性 差 的缺点 ， 是 多糖 分析常用方法 ．
称取 １ ５ ｇ过 ６ ０目筛 的松 茸 子 实体 粉 末 ， 按 料
水 比 １： １ ５ （ 质 量体 积 比） 加 蒸馏 水 ， 于 ９ Ｏ ℃水浴 加 热 ２ ． ５ ｈ ， 离 心过 滤 ． 滤液 用 Ｓ ｅ ｖ ａ ｇ ｅ 试液（ 氯仿 ： 正 丁醇 一 ４ ：１ ， 体 积 比） 按 １：５充 分 混 匀 ， 振 荡 ２ ５ ｍｉ ｎ ， ４ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ离 心 １ ５ ｍｉ ｎ ， 收集上清 液， 重
文 章 编 号 ：１ ０ ０ ０ － １ １ ９ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５ — ０ ６ ５ ８ — ０ ３
松 茸 多糖 成 分 分 析
高瑞 希 ，李 竣 ，柴 万 鹏 ，邹 大 江 ，罗会 畏 ，杨 光 忠
（ 中南民族大学 药学院 ， 武汉 ４ ３ ０ ０ ７ ４ ）
摘
要： 为 研 究 松 茸 多 糖 中单 糖 成 分 ， 将 松 茸 多 糖 水 解 产 物进 行 甲 基 化 反 应 ， 以 气相 色谱 仪 检 测 多
松茸 （ Ｔ ｒ ｉ ｃ ｈ ｏ ｌ ｏ ｍａ ｍａ ｔ ｓ ｕ ｔ ａ ｋ ｅ ） 属 担 子 菌 门 （ Ｂ ａ ｓ ｉ ｄ ｉ ｏ ｍｙ ｃ ｏ ｔ ａ ） ， 担 子 菌纲 （ Ｂ ａ ｓ ｉ ｄ ｉ ｏ ｍｙ － ｃ ｅ ｔ ｅ ｓ ） ， 伞 菌 目（ Ａｇ ａ ｒ ｉ ｃ ａ ｌ ｅ ｓ ） ， 口蘑科 （ Ｔ ｒ ｉ ｃ ｈ ｏ ｌ ｏ ｍａ ｔ ａ ｃ ｅ ａ ｅ ） ， 口 蘑属（ Ｔ ｒ ｉ ｃ ｈ ｏ ｌ ａ ｍａ ） ， 是 名 贵食 用 药 用 菌． 主 要 分 布 于 日本 、 朝鲜 、 美国、 加拿 大 和 北 欧 国 家 ， 我 国主 产 地 区为 东北 和云 南． 松 茸 含 有蛋 白质 、 脂 肪 和 多种 氨基 酸 、 维生 素等 ， 具有 强身 、 益肠 胃 、 止痛 等功 效 ． 研究 表 明 ， 松 茸子 实体 热水 提取 物 （ 即多糖 ） 对小白 鼠肉瘤 １ ８ ０和 艾 氏 癌 的抑 制 率 分 别 为 ９ １ ． ８ 和
糖 水 解 产 物． 结 果 确 定 松 茸 多 糖 水 解 产 物 中 的 ５种 单 糖 ： 木糖 ， 甘露 糖 ， Ｉ ） Ｉ 葡萄 糖 ， 半乳糖 ， 【 ） ＿ 葡 萄糖 醛 酸 ， 单 糖 摩 尔 比为 １： １ ． ８： ３ ２ ６ ． ５： ５ ２ ． ５ ３： ２ ８ ． ８ ３ ， 可 能含有 【 ） ＿ 阿拉伯 糖． 为 深 入 研 究 松 茸 多糖 提供 了 理 论 依 据 ． 关键 词 ： 松 茸 ；多糖 成 分 分 析 ；甲基 化 反 应 ； 气 相 色 谱 法
作 用方 面 ， 对 多糖本 身组 成 研 究 较 少 ， 而 多 糖 结构
研 究 中单糖 组成 及摩 尔 比分析 是重 要环 节 ． 为进 一 步研究 松茸 多糖 中单 糖组 成 ， 本文 对松茸 多 糖进 行
复处 理至 氯仿 与水层 间无胶 状物 产生 ． 加 入无 水 乙
醇至 醇浓度 为 ７ Ｏ ， ４ ℃静 置 １ ２ ｈ ， 过滤 ， 冷 冻 干燥
第４ ７卷 第 ５期
２ ０ １ ３年 １ ０月
华中师范大学学报 （ Leabharlann Baidu然 科 学 版 ）
ｊ ｏｕＲＮＡＬ ＯＦ Ｈ ＵＡＺＨ０ＮＧ Ｎ０ＲＭ ＡＬ Ｕ ＮＩ ＶＥＲＳ Ｉ ＴＹ（ Ｎａ ｔ ．Ｓｃ ｉ ． ）
Ｖｏ １ ． ４７ Ｎｏ ．５ Ｏｃ ｔ ． ２Ｏ１ ３
国 Ａｇ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ 公 司） ， 真 空干燥 箱 （ ＸＭＴ Ｄ － ８ ２ ２ ２型 ， 上
海 精宏 实验 设备 有 限公 司） ， 超 低 温冷 冻储 存箱 （ 中
科美菱） ， 低速离心机 （ Ｔ Ｄ２ ５型 ， 长 沙 平 凡 仪 器 仪 表 有 限公 司） ， 冷冻 干燥 机 （ Ｆ Ｄ 一 １ Ｂ 一 ５ ０型 ， 北 京博 医 康 实 验仪 器 有 限 公 司 ） ， 电子天 平 （ 精度 ０ ． １ ｍｇ ， ＡＲ ２ １ ４ ０型 ， 上海 奥豪 斯仪 器 有 限公 司） ， 旋 转 蒸 发 仪（ Ｒ Ｅ 一 ５ ２ Ａ型 ， 上 海 亚 荣生 化 仪 器 厂 ） ， 标 准 单糖 （ Ｓ ｉ ｇ ｍａ 公 司） ． 氯仿 ， 甲醇 ， 无水 乙醇 ， 正 丁醇 ， 三 氟 乙酸 ， 氢氧 化 钠 ， 硼 氢 化钠 ， 三 甲基 氯 硅 烷 ， 六 甲基 二硅 醚烷 ， 吡啶 ， 分子 筛． 试 剂 皆为分 析 纯．
１ ． ２ 多 糖 提 取
７ Ｏ ｌ １ ］ ， 可使 小 鼠脾 脏 增 重 为 正 常 鼠 ５倍 ， 同 时使 脾 组织 ｃ ＡＭＰ含 量增 高 ］ ， 具 备 免疫 功 能保 护 ， 抗 氧 化 系统 保 护 ， 体外抗肿 瘤， 以及 抗 应 激ｃ 。 剖等 作
用． 因此 ， 松 茸 多糖 不 论 在药 物开 发 还 是 医 疗保 健 研 究方 面均 有一 定价 值 ． 目前 对 松 茸 多糖 的研 究 主要 集 中 在 多糖 药 理
得 较 纯多糖 ． １ ． ３ 多糖水 解 ， 单 糖 还 原
水解 、 甲基 化反 应 ， 通 过 气 相 色 谱 法对 照 已知单 糖
气 相色谱峰 确定多糖 中单 糖组分 ， 并计算 摩 尔 比． 气 相色谱法具 有分析速度 快 、 样 品用 量少 、 高灵 敏度等 优点 ； 甲基 化在多糖 化学反应 中较为 常见 ， 利 用该 反
取０ ． ５ ～１ ． ０ ｍｇ多 糖 溶 解在 １ ｍＬ ４ ｏｏ ｔ ｌ ／ Ｌ的 Ｔ Ｆ Ａ（ 三氟 乙酸） 中， 充 氮气 加盖密 封 ， １ ０ ０ ℃水 解４ ｈ ，
应可解 决多糖在气 相色谱分 析 中挥发 性和热 稳定 性 差 的缺点 ， 是 多糖 分析常用方法 ．
称取 １ ５ ｇ过 ６ ０目筛 的松 茸 子 实体 粉 末 ， 按 料
水 比 １： １ ５ （ 质 量体 积 比） 加 蒸馏 水 ， 于 ９ Ｏ ℃水浴 加 热 ２ ． ５ ｈ ， 离 心过 滤 ． 滤液 用 Ｓ ｅ ｖ ａ ｇ ｅ 试液（ 氯仿 ： 正 丁醇 一 ４ ：１ ， 体 积 比） 按 １：５充 分 混 匀 ， 振 荡 ２ ５ ｍｉ ｎ ， ４ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ离 心 １ ５ ｍｉ ｎ ， 收集上清 液， 重
文 章 编 号 ：１ ０ ０ ０ － １ １ ９ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５ — ０ ６ ５ ８ — ０ ３
松 茸 多糖 成 分 分 析
高瑞 希 ，李 竣 ，柴 万 鹏 ，邹 大 江 ，罗会 畏 ，杨 光 忠
（ 中南民族大学 药学院 ， 武汉 ４ ３ ０ ０ ７ ４ ）
摘
要： 为 研 究 松 茸 多 糖 中单 糖 成 分 ， 将 松 茸 多 糖 水 解 产 物进 行 甲 基 化 反 应 ， 以 气相 色谱 仪 检 测 多