A5 糖化血红蛋白金标法检测操作规程

A5 糖化血红蛋白检测操作规程
A5.1首页



A5.2检测原理
NycoCard HbA1c是一种硼化亲和试验。试剂能溶解红细胞并特异性沉淀血红蛋白因子，其中蓝色的硼酸缀合物能和糖化血红蛋白上的Cis-diols相结合。血液和试剂混合后加入滤膜装置，所有沉淀的血红蛋白，不管是和缀合物结合的或未结合的都保留在滤膜的顶部。过量的显色缀合物就被洗涤液洗掉。通过NycoCard Reader Ⅱ多功能全定量金标监测仪测定蓝色（糖化血红蛋白）和红色（总血红蛋白）的强度，可以计算样品中的HbA1c的百分比。
A5.3检测项目
糖化血红蛋白（HbA1c）含量测定。
A5.4 标本采集与处理
A5.4.1 NycoCard 分析仪使用抗凝静脉血进行分析。
A5.4.2 静脉采血
除非是卧床病人，一般在采血时取坐位，体位影响水分在血管内外的分布。一般从肘静脉取血，婴幼儿可从颈静脉、股静脉取血。使用止血带时时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带，当需要重新使用止血带时应选用另一上臂。
（1）采血器具：静脉采血器具采用3.2％ EDTA-K3抗凝剂真空采血管和与之配套的7号无菌针头。
（2）采血操作步骤：按静脉采血标准规程严格操作。采血完毕后，要马上翻转真空采血管以抗凝。翻转8至10次可防止大多数血样产生血块或血小板栓子。
A5.5试剂
本实验室使用挪威NycoCard Reader Ⅱ多功能全定量金标监测仪配套试剂，由挪威授权天津市嘉士林科贸有限公司销售。
A5.5.1试剂R1必须储存在2～8℃，从冰箱中取出就可使用，不需达到室温。不用时避免光照。
A5.5.2反应板应当储存在室温（15～25℃）暗处，避免70％以上的湿度。
A5.5.3洗涤液R2储存在室温（15～25℃）。
A5.6 仪器操作
A5.6.1机器打开自检后屏幕将出现“main menu calibrate”提示，按下“ENTER”键后，根据屏幕英文提示翻开机器右侧黑色盖子，用比色笔的尖部用力插入白色圆盖的中心部位，稍后屏幕出现“active wait”，待屏幕相继出现“calibrated”、“main menu enter test”后，便可以开始测量样本。
A5.6.2取5μl抗凝全血加入标本处理管内，振摇混匀。室温放置2～3分钟。从试剂盒中取出比色板，揭开盖纸，再次混匀后加入25μl标本处理管内血液于孔内，待渗透。加入25μl洗涤液，待渗透。5分钟内完成下列比色操作步骤。
首先，按下“ENTER”键进入操作状态，屏幕出现“test：D-Dimer new”，按“select”键选择“test：HbA1c”，再按下“ENTER”键后屏幕出现“measure HbA1c place pen”，将比色笔用力插紧比色板中心红色区域，等屏幕出现“active wait”后，屏幕将显示HbA1c试验结果，请及时记录（数据结果无保存！）请注意测

量结果单位为“**％”，注意填写报告并登记！
A5.6.3关机方法：测量完毕后按“Quit”键直至屏幕出现“off” 按下“ENTER”键关机。
A5.7 注意事项
A5.7.1加样或加试剂时避免有气泡。
A5.7.2不同批号的试剂不要交叉使用。
A5.7.3不要用吸管头接触滤膜，以免触破。
A5.7.4当样本的Hb浓度高于可测范围时，混合2个试管的R1试剂（400μl）再加样品（5μl），仪器将直接显示正确的结果。
A5.8参考值
　4.5％～6.3％
A5.9 操作性能：
测量范围：3％～18％
测量间隔：0.1％
批内、批间误差均小于5％
A5.10 临床意义
此实验用于评定糖尿病的控制程度，当糖尿病控制不佳时，糖化血红蛋白浓度可高至正常2倍以上。糖化血红蛋白所占比率能反映测定前1～2月内平均血糖水平，现已成为反映糖尿病较长时间血糖控制水平的良好指标。
A5.11参考文献
1.中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程（第三版）．南京：东南大学出版社，2006，349-351.
2.NycoCard Reader Ⅱ金标监测仪操作手册.



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