病料采集流程

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9、全血采样:适合细菌、血液寄生虫感染 感染,进行血涂片检测,用灭菌注射器自 鸡的心脏或翅静脉采血1-2毫升,注入灭菌 试管中。(一般在血液中加入少量的抗凝 剂3.8%枸橼酸钠0.1-0.2毫升或柠檬酸钠液 )
5、液体病料的采集 胆汁、脓肿液、渗出物等液体病料,使用 灭菌吸管或注射器,经烫烙部位吸取病变 组织的液体,将病料注入灭菌的试管中, 塞好棉塞送检。
6、肠道及内容物的采集方法 6.1 肠道:选择病变明显部位的肠道,将内容物 弃掉,用灭菌生理盐水冲洗干净,然后将病料放 入盛有灭菌的30%甘油盐水缓冲液中送检。 6.2 亦可将肠管切开,用灭菌生理盐水冲洗干净 ,然后用烧红的手术刀片烫烙粘膜表面,将接种 针插入粘膜层,取少量病料接种于培养基上。 6.3 肠内容:用烧红的手术刀片烫烙肠道浆膜层 ,将接种针插入肠道内,吸取少量肠内容,放入 试管中或将带有肠内容的肠道两端扎紧,去掉其 它部分送检。
病料采集流程
一、用途
采集的病料常用于细菌分离、涂片检查、 抗体检测、病毒分离、病理切片、免疫组 化、PCR鉴定、试纸快速诊断等。 通常在出现紧急疫情情况下采集。
二、病料采集注意事项
1. 适时采样。用于病源原分离的样品应在发病初期采集或者有典型症状时 采集,急性死亡的动物要立即采集病料。 2. 合理采样。在不知道是何种疫病时采样要全面,包括心、肝、脾、肺、 肾、脑等组织器官,还要采集血液、血清、粪便和分泌液等,方便诊断。 3.适量采样。通常在诊断过程中一只鸡的样本是不够的,经常在采集时会做 到10只鸡以上,如果是血清学检测采样量通常要大于24份。单个样本量要足 够,以便在复检时还有足够的样本。 4. 无菌采样。所用与采样的器械需要经过消毒处理,每个样品单独存放在 一个包装内。采样除要防止样品污染更重要的是要防止采样人员感染,因此 采样人员必须佩戴乳胶手套和口罩。 5. 及时送样。储备固定液固定的组织和骨组织外,其他样本采集好后均需 要进行冷处理。在一天内能送到检测中心的放在4℃,在一天内不能运到的 样品最好在-20℃做冰冻处理,然后冷链运输。 6. 每次采样送检。填写《送样信息表》,须注明场子、送检人、被检鸡群 日龄,日期,检测项目、检测目的。 7. 送样时间。避免周六周日、节假日、培训日,提前和动保中心人员电话 联系确定。 8. 让司机或班车捎样,必须电话跟踪,确定送至目的地。
7、皮肤及羽毛的采集 7.1 皮肤要选病变明显部分的边缘,采取 少许放入灭菌的试管中送检; 7.2 羽毛也要选病变明显部分,用灭菌的 刀片刮取羽毛及根部的皮屑少许,放入灭 菌的试管中送检; 7.3 孵化室的绒毛:用灭菌镊子采取出雏 机出风口的绒毛3-5克,放入灭菌的试管中 送检。
8、泄殖腔、气管棉拭子采样:检测细菌、 病毒 取无菌棉签,插入鸡喉头内或泄殖腔转动3 圈,取出,插入含无菌缓冲液离心管内, 剪去露出部分,盖紧瓶盖,作好标记。ຫໍສະໝຸດ 气管 脑部肾脏 肺脏
法氏囊 脾脏 输卵管
细菌病采集部位
病毒病采集部位
4、血清检测送样:用于检测抗体、凝集 试验、琼脂扩散试验、Elisa。 4.1血清析出后将血清放于输液管内并封 好两端,放至保温盒冰袋内,送动保中心 。 4.2如果因时间紧急,可送全血,将注射 器内血液凝固后,用胶带缠好,放置冰袋 即可送检。
2 鸡只送样要求: 2.1 活鸡选择有明显症状鸡只,如呼吸道 、伸颈、发蔫、挣扎、神经等。 2.2 死鸡选择新鲜刚死亡鸡只,并放于阴 凉处。 2.3 使用纸箱子,将鸡只放于纸箱,并用 胶带缠好,并用剪刀扎上透气孔。 2.4 不可将鸡放于汽车高温地方,如发动 机旁。
3 组织和实质器官采样要求:用于病毒或细菌分离 3.1 采取刚死亡鸡只或刚杀死鸡只病料。 3.2 分离病毒采取脾脏、肺脏、气管、输卵管、脑部、肾 脏等组织。 3.3 分离细菌以采取肝脏为主。 3.4病料的采集必须采用无菌操作。剖开腹腔后,注意肠 管的完整。更换无菌的器械,直接将目标病变器官摘下放 到无菌的包装袋中封好,每只鸡一个口袋。 3.5将病料袋标明时间、场名、栋舍、日龄。 3.6分离病毒病样冷冻保存. 3.7分离细菌病样尽量冷藏保存,冷冻会导致细菌细胞破 裂死亡。
三、采集步骤
1 肿瘤病料采集要点:需要用固定液固定,用于马立克、白血病、 网状内皮切片检测。 1.1 尽量采集活鸡病料,不要采死鸡病料。 1.2 采病料前放血一定要充分。 1.3 病鸡病变组织要明显,要有两个以上组织或器官有肿瘤病变。 1.4 组织块儿大小要求1cm×1cm×1cm或1.5cm×1.5cm×1.5cm, 组 织块儿太大固定效果不好。 1.5 采集正常组织和肿瘤组织交界处的组织。 1.6 每瓶固定液只能盛一只鸡的病料。 1.7 固定液浓度要求10%福尔马林(即10毫升40%甲醛+90毫升水)。 1.8 固定液最好盛在干净矿泉水瓶中,组织与固定液比例为1:20以上 。 1.9 采集脾脏时一定要剪开筋膜;腺胃不要环切,要顺腺胃长轴竖切 。
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