郑圣霞 重度宫腔粘连分离术后薄型子宫内膜之干细胞治疗
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但总体治疗效果欠佳！
overview
干细胞具有多向分化和自我更新的潜能具有广阔的发展 AnhuiProvincialHospital 前景
很多研究显示干细胞可诱导向子宫内膜细胞定向分化， 促进子宫内膜生长，治疗薄型子宫内膜，包括： 骨髓间质干细胞（BMSCs） 子宫内膜干细胞（EDSCs） 人胚胎干细胞（hESCs） 人脐带华通胶间充质干细胞（WJ-MSCs） 。。。。。。
重建子宫内膜组织
的HE及免疫组化分
析。A：HE染色见脂
M肪体组 样e织结n内构S见；C散B：s在H可E腺染以在NOD/SCID小鼠体内
重色未建见脂子肪组宫织内内膜组织
见散在腺体样结构；
C、D：空白对照；E：
CK强阳性表达；F：
VIM弱表达；G：
CD31强表达；H：ER
几乎不表达；I：PR
中等强度表达；J：
每个月经周期子宫内膜快速的修复与重建与 高度增值和快速血管生成的MenSCs有关
a
b
a 超声下月经期子宫内膜薄 3.8mm； b 超声下排卵期子宫内膜厚 11.2mm
overview
与BMSC相比，MenSCs具有以下特征：
Anhui Provincial Hospital
1）更快的增殖速率；
我们中心的研究
Anhui Provincial Hospital
原代培养正常MenSCs24h、72h、7d、14d可见细胞克隆样生长
我们中心的研究
Anhui Provincial Hospital
MenSCs倍增24次没有发生染色体畸变
a MenSCs倍增24次细胞染色体核型分析示正常；b原代培养和传第4代冻存前后的细胞 生长曲线
Anhui Provincial Hospital
Anhui Provincial Hospital
重度宫腔粘连分离术后薄型子宫 内膜之干细胞治疗
郑圣霞 刘雨生 安徽省立医院
overview
在辅助生殖技术中，薄型子宫内膜是指子宫内膜厚度不 AnhuiProvincialHospital 足以支持胚胎着床及临床妊娠
我们中心的研究
Anhui Provincial Hospital
MenSCs 标记物 OCT4、STRO-1、CD45、HLA-DR的免疫细胞化学和流式分析
我们中心的研究
MenSCs体外诱导分化 后RT-PCR及Western blot检测CK、VIM mRNA及蛋白表达水
M平免e（疫nA细S：胞Ca、 化sb学： 可染诱色以导；前诱c、导分化子宫内膜细胞
overview
子宫内膜中干细胞具有高度增殖、分化潜能以及较低的 AnhuiProvincialHospital 免疫源性，但是直接获取子宫内膜具有一定的侵入性
月经血源性子宫内膜干细胞(menstrual blood-derived mesenchymal stem cells, MenSCs)[1]
使用孕激素处理后
ER强阳性表达。
（A×4，B-H×20）
我们中心的研究
Anhui Provincial Hospital
IUA子宫内膜干细胞严重减少！！！
我们中心的研究
Anhui Provincial Hospital
MenSCs治疗前4.9mm，治疗后12.4mm
2）不表达STRO-1；
3）表达胚胎干细胞多能性标记物OCT-4；
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
4）高表达MMP。
能够分化为三胚层组织，故也称之为子宫内膜再生细胞
（Endometrial Regenerative Cells，ERCs) ［1］
研究显示与BMSCs相比，ERCs高表达血管生成因子，如
PDGF、EGF、VEGF和MMP，所以更适合再生医学[2]。
overview
在I期临床实验中
Anhui Provincial Hospital
静脉和鞘内注射EnSCs治疗4例多发性硬化患者未发现
免疫反应和毒副反应[1]。
肌肉注射EnSCs治疗杜氏肌营养不良患者，未发现毒副
反应，并且增强了肌张力和减少呼吸道感染[2]。
静脉注射EnSCs治疗充血性心力衰竭的患者，增加了射
血分数，减少利尿钠肽数值，降低心衰评分[3]。
美国Medistem团队正在致力于II期临床实验评价EnSCs
治疗心衰患者的潜能[4]。
[1] Zhong Z,et al.2009； [2] Ichim TE,et al.,2010；[3] Ichim TE, et al.,2010； [4] Bockeria L et al.,2013。
目前，国际上对薄型子宫内膜的评价标准尚未统一，最 新的一项Meta分析认为子宫内膜厚度超过7mm的患者
妊娠率明显高于不足7mm者（Mazdak Momeni，2011）
重度宫腔粘连是导致薄型子宫内膜的重要原因之一
临床对薄型子宫内膜治疗的方式较多：药物、搔刮刺激、 宫腔内注射粒细胞集落刺激因子、电生理刺 激 。。。。。。
[1]Meng X, et al., Endometrial regenerative cells: a novel stem cell population2007; 5:57 [2]Bockeria L, et al.. Endometrial regenerative cells for treatment of heart failure: a new stem cell enters the clinic. J Transl Med 2013.
d：诱导后免疫细胞化 学染色；e：免疫细胞 化学评分； B：RT-PCR检测CK、 VIM mRNA的相对表达 量 C：Wetsern blot检测 CK、VIM 蛋白的相对 表达量）
Anhui Provincial Hospital
我们中心的研究
MenSCs皮下移植后
Anhui Provincial Hospital
从经血获得MenSCs不具有侵入性，不会对供者造成伤 害, 且来源广泛[1]
[1]1Meng X, et al., Endometrial regenerative cells: a novel stem cell population2007; 5:57
overview
Anhui Provincial Hospital
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干细胞具有多向分化和自我更新的潜能具有广阔的发展 AnhuiProvincialHospital 前景
很多研究显示干细胞可诱导向子宫内膜细胞定向分化， 促进子宫内膜生长，治疗薄型子宫内膜，包括： 骨髓间质干细胞（BMSCs） 子宫内膜干细胞（EDSCs） 人胚胎干细胞（hESCs） 人脐带华通胶间充质干细胞（WJ-MSCs） 。。。。。。
重建子宫内膜组织
的HE及免疫组化分
析。A：HE染色见脂
M肪体组 样e织结n内构S见；C散B：s在H可E腺染以在NOD/SCID小鼠体内
重色未建见脂子肪组宫织内内膜组织
见散在腺体样结构；
C、D：空白对照；E：
CK强阳性表达；F：
VIM弱表达；G：
CD31强表达；H：ER
几乎不表达；I：PR
中等强度表达；J：
每个月经周期子宫内膜快速的修复与重建与 高度增值和快速血管生成的MenSCs有关
a
b
a 超声下月经期子宫内膜薄 3.8mm； b 超声下排卵期子宫内膜厚 11.2mm
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与BMSC相比，MenSCs具有以下特征：
Anhui Provincial Hospital
1）更快的增殖速率；
我们中心的研究
Anhui Provincial Hospital
原代培养正常MenSCs24h、72h、7d、14d可见细胞克隆样生长
我们中心的研究
Anhui Provincial Hospital
MenSCs倍增24次没有发生染色体畸变
a MenSCs倍增24次细胞染色体核型分析示正常；b原代培养和传第4代冻存前后的细胞 生长曲线
Anhui Provincial Hospital
Anhui Provincial Hospital
重度宫腔粘连分离术后薄型子宫 内膜之干细胞治疗
郑圣霞 刘雨生 安徽省立医院
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在辅助生殖技术中，薄型子宫内膜是指子宫内膜厚度不 AnhuiProvincialHospital 足以支持胚胎着床及临床妊娠
我们中心的研究
Anhui Provincial Hospital
MenSCs 标记物 OCT4、STRO-1、CD45、HLA-DR的免疫细胞化学和流式分析
我们中心的研究
MenSCs体外诱导分化 后RT-PCR及Western blot检测CK、VIM mRNA及蛋白表达水
M平免e（疫nA细S：胞Ca、 化sb学： 可染诱色以导；前诱c、导分化子宫内膜细胞
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子宫内膜中干细胞具有高度增殖、分化潜能以及较低的 AnhuiProvincialHospital 免疫源性，但是直接获取子宫内膜具有一定的侵入性
月经血源性子宫内膜干细胞(menstrual blood-derived mesenchymal stem cells, MenSCs)[1]
使用孕激素处理后
ER强阳性表达。
（A×4，B-H×20）
我们中心的研究
Anhui Provincial Hospital
IUA子宫内膜干细胞严重减少！！！
我们中心的研究
Anhui Provincial Hospital
MenSCs治疗前4.9mm，治疗后12.4mm
2）不表达STRO-1；
3）表达胚胎干细胞多能性标记物OCT-4；
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
4）高表达MMP。
能够分化为三胚层组织，故也称之为子宫内膜再生细胞
（Endometrial Regenerative Cells，ERCs) ［1］
研究显示与BMSCs相比，ERCs高表达血管生成因子，如
PDGF、EGF、VEGF和MMP，所以更适合再生医学[2]。
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在I期临床实验中
Anhui Provincial Hospital
静脉和鞘内注射EnSCs治疗4例多发性硬化患者未发现
免疫反应和毒副反应[1]。
肌肉注射EnSCs治疗杜氏肌营养不良患者，未发现毒副
反应，并且增强了肌张力和减少呼吸道感染[2]。
静脉注射EnSCs治疗充血性心力衰竭的患者，增加了射
血分数，减少利尿钠肽数值，降低心衰评分[3]。
美国Medistem团队正在致力于II期临床实验评价EnSCs
治疗心衰患者的潜能[4]。
[1] Zhong Z,et al.2009； [2] Ichim TE,et al.,2010；[3] Ichim TE, et al.,2010； [4] Bockeria L et al.,2013。
目前，国际上对薄型子宫内膜的评价标准尚未统一，最 新的一项Meta分析认为子宫内膜厚度超过7mm的患者
妊娠率明显高于不足7mm者（Mazdak Momeni，2011）
重度宫腔粘连是导致薄型子宫内膜的重要原因之一
临床对薄型子宫内膜治疗的方式较多：药物、搔刮刺激、 宫腔内注射粒细胞集落刺激因子、电生理刺 激 。。。。。。
[1]Meng X, et al., Endometrial regenerative cells: a novel stem cell population2007; 5:57 [2]Bockeria L, et al.. Endometrial regenerative cells for treatment of heart failure: a new stem cell enters the clinic. J Transl Med 2013.
d：诱导后免疫细胞化 学染色；e：免疫细胞 化学评分； B：RT-PCR检测CK、 VIM mRNA的相对表达 量 C：Wetsern blot检测 CK、VIM 蛋白的相对 表达量）
Anhui Provincial Hospital
我们中心的研究
MenSCs皮下移植后
Anhui Provincial Hospital
从经血获得MenSCs不具有侵入性，不会对供者造成伤 害, 且来源广泛[1]
[1]1Meng X, et al., Endometrial regenerative cells: a novel stem cell population2007; 5:57
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