细胞增殖及其调控lgy

期。
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细胞周期和细胞类群(根据增殖状 况将细胞分类)
◆持续分裂细胞（周期中细胞）： 如上皮组织的基底层细胞，不断分裂，补充表层死 亡脱落的细胞。
◆终末分化细胞： 分化程度高，永久性失去了分裂能力的细胞，如横 纹肌细胞。
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◆G0细胞：
又称静止期细胞。暂时脱离细胞周期,不进行增殖,也叫 静止细胞群,如某些免疫淋巴细胞, 肝,肾细胞等。 G0期 细胞一旦得到信号指使，会返回细胞周期，分裂增殖， 如结缔组织中的成纤维细胞，平时并不分裂，一旦所 在的组织部位受到伤害，它们会马上返回细胞周期， 分裂产生大量的成纤维细胞，分布于伤口部位，促使 伤口愈合。
用流式细胞仪测定每个细胞群体的处于不同时 期的细胞数量和DNA含量。采用不同时间连续 分析，即可综合分析细胞周期及其各个时期的 长短而确定细胞周期时间长短。
◆缩时摄像技术，可以得到准确的细胞周 期时间及分裂间期和分裂期的准确时间。
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❖ 细胞周期的研究方法
细胞同步化(synchronization)
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细胞周期长短测定
◆脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观 察测定法（P362）
用3H-TdR短期饲养细胞，数分钟至半小时后，将 3H-TdR洗脱，置换新鲜培育液并继续培养。随后， 每隔半小时或一小时定期取样，作放射自显影分析， 从而确定细胞周期各个时相的长短。
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◆流式细胞仪测定法(Flow Cytometry)
第十一章 细胞增殖及其调控
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细胞增殖的意义
◆细胞增殖(cell proliferation)是细胞生命活动的重要特征 之一,是生物繁育的基础。
◆单细胞生物细胞增殖导致生物个体数量的增加。
◆多细胞生物由一个单细胞即受精卵分裂发育而来，经过无数 次细胞增殖核细胞分化， 细胞增殖是多细胞生物繁殖基础。
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检验点（checkpoint）:
由于细胞内存在一系列监控机制 （surveillance mechanisms）,可以鉴别 细胞周期进程中的错误，并诱导产生特 异的抑制因子，阻止细胞周期进一步运 行。这些监控机制尤如交通路途中设立 的检查站。因而称为检验点。检验点存 在于细胞的各个时期，如S期检验点，G2 期检验点，纺锤体组装检验点等。
◆分裂中期阻断法：通过抑制微管聚合来抑制细胞分裂器的形 成，将细胞阻断在细胞分裂中期。如用秋水仙素。
优点是操作简便，效率高。缺点是这些药物的毒性相对较大。
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❖ 特异的细胞周期
--Embryonic cell cycles
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爪蟾早期胚胎细胞的细胞周期
·细胞分裂快,无G1期, G2期非常短,S期也短(所有复制子 都激活), 以至认为仅含有S期和M期（P368图11-7）； ·无需临时合成其它物质； ·子细胞在G1、G2期并不生长，越分裂体积越小 ； ·细胞周期调控因子和调节机制与一般体细胞标准的细胞周 期基本是一致的。
优点是细胞未经任何药物处理，细胞同步化效率高。缺 点是分离的细胞数量少。
◆密度梯度离心法：根据不同时期的细胞在体积和重量
上存在差别进行分离。优点是方法 简单省时，效率高，
成本低。缺点是对大多数编种辑类ppt 的细胞并不适用。
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药物诱导法
◆ DNA合成阻断法 ─ G1/S-TdR双阻断法（P366图11-6）。最 终将细胞群阻断于G1/S交界处。优点是同步化效率高，几乎适 合于所有体外培养的细胞体系。缺点是诱导过程可造成细胞非 均衡生长.
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❖ 细胞周期各时 相的合成活动
◆G1期 (Gap1 phase) ◆S 期 (synthesis phase) ◆G2 期(Gap 2 phase) ◆ M期(mitosis phase)
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G1期
·与DNA合成启动相关，开始合成细胞生长所 需要的多种蛋白质、碳水化合物、脂等，但是不
合成DNA，同时染色质去凝集。
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S期
·DNA 复 制 与 组 蛋 白 合 成 同步，组成核小体串珠结 构
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G2期
· DNA复制完成，在G2期合成
一定数量的蛋白质和RNA分子
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M期
· M期即细胞分裂期，真核细胞的细胞分裂主要 包括两种方式，即有丝分裂(mitosis)和减数分裂 (meiosis)。遗传物质和细胞内其他物质分配给子 细胞。
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◆从细胞形态变化考虑，将细胞周期划分为两
个相互延续的时期，即细胞有丝分裂期 （mitosis）和位于两次分裂期之间的分裂 间期（interphase）。分裂间期是细胞增殖 的物质准备和积累阶段，分裂期则是细胞增 殖的实施过程。
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细胞周期
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❖ 细胞周期时相及类型
➢ 间期(interphase)
◆G1期(Gap 1 phase),即从M期结束到S期开始前的一 段间歇期;
◆S期,即DNA合成期(DNA synthetic phase); ◆G2期(Gap 2 phase), 即DNA合成后(S期)到有丝分
裂前的一个间歇期;
➢ M期,即有丝分裂期(mitosis phase)。
不一定每种细胞都有四个时期，如胚胎细胞没有G1
◆选择同步法(selection synchrony)
●有丝分裂选择法
●细胞沉降分离法
◆诱导同步法
●DNA合成阻断法
●中期阻断法
◆条件突变(conditional mutants)：条件依赖性突
变株
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人工选择同步化
◆有丝分裂选择法：
例如，处于对数生长期的单层培养细胞，从培养瓶（皿） 壁上隆起，与培养瓶（皿）壁的附着力减弱。若轻轻震 荡培养瓶（皿），处于分裂期的细胞即会从瓶（皿）壁 上脱落，悬浮到培养液中。收集培养液，通过离心，即 可获得一定数量的分裂期细胞。
◆成体生物仍然需要细胞增殖，主要取代衰老死亡的细胞， 维 持个体细胞数量的相对平衡和机体的正常功能。
◆机体创伤愈合、组织再生、病理组织修复等，都要依赖细 胞增殖。
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11.1 细胞周期与细胞分裂
一、细胞周期
细胞周期是指连续分裂的细胞从一次有丝分 裂结束后开始到下次有丝分裂终止所经历的 全过程。在这一过程中,细胞的遗传物质进行